Program na určenie krvnej skupiny a ako ho používať. Metóda krížovej reakcie. Ako určiť krvnú skupinu pomocou zoliklonov

Definícia skupinová príslušnosť prietok krvi cez systém ABO sa uskutočňuje pomocou aglutinačnej reakcie. V súčasnosti sa na určenie krvných skupín pomocou systému ABO používajú tri metódy:

Podľa štandardných izohemaglutinačných sér,

Podľa štandardných izohemaglutinačných sér a štandardných erytrocytov (crossover metóda),

Použitie monoklonálnych protilátok (koliklony anti-A a anti-B).

Štandardné izohemaglutinačné séra

Štandardné izohemaglutinačné séra používané na stanovenie krvnej skupiny zodpovedajú štyrom krvným skupinám 0 (I), A (II), B (III), AB (IV). Získavajú sa z krvi, menej často z iných tekutín (ascitická tekutina, pleurálny exsudát). Používa sa krv od darcov, kadaverózna alebo placentárna krv. Krv sa usadí a odoberie sa sérum, ku ktorému sa pridá konzervačná látka (kyselina boritá v množstve 3,0 g prášku na 100 ml séra). Po usadení sa sérum naleje do sterilných ampuliek alebo fľaštičiek, ktoré sa ihneď uzatvoria alebo hermeticky uzavrú.

Požiadavky na štandardné izohemaglutinačné séra:

1. aglutinácia s príslušnými červenými krvinkami by sa mala objaviť v priebehu 15-20 s. a po 2 minútach. musí to byť jasné;

2. nepodávať aglutináciu s červenými krvinkami rovnakej a prvej skupiny:

3. titer v sére musí byť aspoň 1:32;

4. sérum musí byť bez známok mikrobiálnej kontaminácie a priehľadné;

5. Každá ampulka musí mať pas označujúci skupinu, dátum exspirácie, titer, miesto a čas prípravy so zodpovedajúcimi farebnými pruhmi.

Aby sa predišlo chybám pri určovaní krvných skupín, séra sa farbia na určitú farbu. Sfarbenie štandardných izohemaglutinačných sér: 0(1) - nefarbené, A(II) - modrá, B(III) - ružová, AB(IV) - žltá. Séra sa uchovávajú hermeticky uzavreté na tmavom mieste, najlepšie v chladničke.

Koncept titulu

Aglutinačná reakcia s rôznymi sérami a erytrocytmi môže v niektorých prípadoch nastať pomerne rýchlo a byť zreteľne vyjadrená, v iných je menej výrazná a prebieha pomalšie. Niekedy je aglutinácia jasne zistená aj pri veľkom riedení séra, v iných prípadoch dokonca slabé riedenie vedie k jeho neexistencii. To všetko je spôsobené tým, že citlivosť červených krviniek a séra podlieha výrazným výkyvom. Aglutinačný titer sa vzťahuje na maximálne zriedenie séra, pri ktorom môže ešte dôjsť k aglutinačnej reakcii. Pri určovaní sérového titra sú konštantnou hodnotou štandardné červené krvinky; pri stanovení titra erytrocytov je konštantnou hodnotou štandardné sérum. Titer je relatívny pojem, pretože titer erytrocytov je presne stanovený iba vo vzťahu k testovanému séru a titer séra iba vo vzťahu k testovaným erytrocytom. U iných červených krviniek môže byť iná, ale jej výkyvy sú zvyčajne malé. Avšak celý riadok erytrocyty majú rovnakú citlivosť, rovnako ako množstvo sér má rovnaký titer. Titer závisí aj od metódy stanovenia. Pri určovaní odkvapkávacia metóda na tanieri u zdravých ľudí sa titer v sére pohybuje od 1:8-1:32. Ak je titer stanovený v skúmavkách, je oveľa vyšší.

Praktický význam má skutočnosť, že titer aglutinínov u novorodencov je extrémne nízky a ako sa človek vyvíja, zvyšuje sa; dosiahne maximum medzi 5. a 20. rokom života, potom začína klesať. Titer aglutinogénov sa môže počas chorôb meniť. Jeho nárast je pozorovaný u mnohých zápalové procesy, prudký pokles sa deje s ťažkým všeobecná infekcia. Pri leukémii sa pozoroval slabý sérový titer. U zdravých ľudí zostáva titer v sére takmer nezmenený.

Závislosť aglutinačnej reakcie od fyzikálno-chemických podmienok

Priebeh aglutinácie môže byť ovplyvnený množstvom fyzikálnych a chemických faktorov.

Teplota. Pri nízkych teplotách dochádza k nešpecifickej „studenej aglutinácii“. Je charakterizovaný výskytom aglutinácie bez ohľadu na krvnú skupinu. „Aglutinácia za studena“ je spôsobená prítomnosťou špeciálneho studeného aglutinínu v sére, ktorý môže spôsobiť aglutináciu iba vtedy, keď nízke teploty. Pri teplotách nad 20 °C nikdy nevyvoláva aglutináciu. Preto nedodržanie teplotného režimu pri určovaní krvnej skupiny môže viesť k chybe.

Chemické faktory. Priebeh aglutinácie závisí od stupňa koncentrácie soľný roztok, ktorý obsahuje červené krvinky. Zvýšenie jeho koncentrácie vedie k jeho oslabeniu a pri obsahu 4,25 % v suspenzii erytrocytov už nedochádza k aglutinácii. Zrýchlenie aglutinácie sa pozoruje po pridaní 10 % roztoku citrátu sodného.

Thomsenov fenomén. Špecifická je aglutinácia, ku ktorej dochádza pri interakcii rovnakých aglutinogénov a aglutinínov. Nešpecifická aglutinácia môže byť spôsobená množstvom faktorov. Jedným z typov takejto aglutinácie je Thomsenov jav, popísaný v roku 1927. Podstata tohto javu je nasledovná: nesterilne odobraté a umyté červené krvinky, bez ohľadu na ich skupinovú príslušnosť, po 24 hodinách státia pri izbovej teplote začnú aglutinácia so sérami všetkých skupín, vrátane vlastných. Príčinou Thomsenovho fenoménu je bakteriálna kontaminácia krvi. o mikroskopické vyšetrenie Takáto aglutinácia ukazuje, že červené krvinky ležia blízko seba a sú medzi nimi viditeľné hranice, čo nie je prípad skutočnej aglutinácie. Makroskopicky sa aglutinácia v tomto fenoméne nedá odlíšiť od skutočnej. Preto je možné nesprávne určiť krvnú skupinu, všetky červené krvinky budú interpretované ako patriace do skupiny (AB)1V.

Panaglutinácia (autoaglutinácia). Fenomén nešpecifickej aglutinácie možno pozorovať aj v čerstvej, baktériami nekontaminovanej krvi. Je pomerne zriedkavý a nazýva sa panaglutinácia alebo autoaglutinácia. Pri tomto type aglutinácie poskytuje sérum pri izbovej teplote aglutináciu so všetkými erytrocytmi, dokonca aj zo svojej vlastnej skupiny, a erytrocyty súčasne spôsobujú aglutináciu so všetkými sérami, vrátane séra skupiny (AB)IV. Panaglutinácia sa môže vyskytnúť pri mnohých ochoreniach (ochorenia krvi, septikopyémia, ochorenia hepatolienálneho systému, zápal pľúc, zápal obličiek atď.) zdravých ľudí. Panaglutinácia sa vyskytuje len pri izbovej teplote pri teplotách blízkych telesnej teplote, zvyčajne sa nevyskytuje. Doteraz nie je známa príčina tohto javu. Makroskopicky je panaglutinácia nerozoznateľná od špecifickej aglutinácie.

Pseudoaglutinácia. Fenomén pseudoaglutinácie je spôsobený zlepovaním červených krviniek do stĺpcov mincí bez ohľadu na ich aglutinovateľné vlastnosti. Zároveň nie sú zničené, membrány sú zachované, čo je jasne viditeľné pod mikroskopom. Po pridaní 1-2 kvapiek izotonického roztoku chloridu sodného pseudoaglutinácia zmizne.

STANOVENIE KRVINÝCH TYPU ŠTANDARDNÝM IZOHEMAGLUTINAČNÝM SÉROM (JEDNODUCHÁ METÓDA)

V každodennom živote klinickej praxi Najčastejšie používanou metódou je stanovenie krvných skupín pomocou štandardných izohemaglutinačných sér. Podstatou metóda-použitieštandardné izohemaglutinačné séra určujú prítomnosť skupinových antigénov A a B v testovanej krvi.

Materiálové vybavenie: štandardné sera 0(1), A(II), B(III), AB(1V) skupiny dvoch sérií, izotonický roztok chlorid sodný, ihly, taniere, sklenené tyčinky alebo sklíčka, pipety, presýpacie hodiny, gumené rukavice, maska, okuliare, plátenná zástera. Na určenie krvnej skupiny sa používajú tanierovité tanieriky (doštičky) s otvormi, nad ktorými sú symboly zodpovedajúce štandardným séram.

Spôsob vykonania:

Stanovenie krvnej skupiny sa vykonáva pri teplote nie nižšej ako +15 °C a vyššej ako +25 °C.

2. Skontrolujte štandardné hemaglutinačné séra, aby ste sa uistili, že neobsahujú sediment, nie sú exspirované a či sú navzájom správne umiestnené.

3. Napíšte meno pacienta na štítok (doštičku).

4. Podľa označenia krvných skupín na platničke aplikujte do každej jamky samostatnou pipetou jednu kvapku štandardného séra - prvá, druhá a tretia skupina z dvoch sérií, pričom každá vytvorí dva rady po troch kvapkách.

5. Vezmite krv. Krv na výskum sa odoberá z prsta alebo žily. Pri odbere krvi z prsta ľavá ruka vziať ľavá ruka pacienta, ošetrite distálnu falangu štvrtého prsta alkoholom a prepichnite ho sterilnou ihlou, pričom odstráňte prvú kvapku krvi.

6. Preneste šesť kvapiek krvi sklenenou tyčinkou na doštičku a umiestnite ich vedľa kvapky štandardného séra. Môžete umiestniť jednu veľkú kvapku krvi na doštičku a potom ju pomocou rohu podložného sklíčka preniesť do kvapiek séra. Zakaždým, keď sa krv odoberie z nového rohu pohára. Pomer testovanej krvi a štandardného séra by mal byť 1:10.

7. Miesto pichnutia do prsta ošetrite alkoholom.

8. Zmiešajte každú kvapku krvi a séra na platni samostatnou tyčinkou.

9. Jemne kývajte platňou 5 minút, pričom neustále dávajte pozor na jamky, kde môže dôjsť k aglutinácii (zlepeniu červených krviniek). Keď dôjde k aglutinácii, ale nie skôr ako o tri minúty neskôr, pridajte jednu kvapku izotonického roztoku chloridu sodného ku kvapkám na platničku (doštičku).

10. Aglutinačná reakcia môže byť pozitívna alebo negatívna.

Aglutinácia sa zvyčajne vyskytuje počas prvých 10-30 sekúnd. Vizuálne sa v kvapke objavia malé červené zrná (aglutináty), ktoré pozostávajú z červených krviniek.

Malé aglutináty sa spájajú do väčších. Sérum je zvyčajne čiastočne zafarbené. Ak nedôjde k aglutinácii, sérum zostáva sfarbené do červena, nie sú v ňom žiadne aglutináty. Malo by sa pamätať na to, že krv obsahujúca aglutinogén A2 spôsobuje neskorú aglutináciu (po 3-4 minútach).

Výsledky štúdie v rovnakej skupine dvoch sérií by mali byť rovnaké.

Vyhodnotenie výsledkov

1. Štandardné séra troch skupín nespôsobujú aglutináciu červených krviniek vo všetkých jamkách - najprv krvná skupina O (I);

2. Štandardné séra O (I) a B (III) skupiny aglutinovali červené krvinky v prvej a tretej jamke, ale neaglutinovali v druhej - krvná skupina A (II) druhá;

3. Prítomnosť aglutinácie v prvej a druhej jamke a neprítomnosť v tretej - skupina B (III) tretia;

4. Štandardné séra všetkých troch skupín aglutinovali červené krvinky vo všetkých jamkách - táto krv patrí do štvrtej skupiny AB (IV). Ak sa ukáže, že testovaná krv je AB(IV), vykoná sa dodatočná kontrolná štúdia so štandardným sérom skupiny AB(1V). Pri absencii aglutinácie testovanej krvi so sérom skupiny AB(IV). daná krv možno zaradiť do štvrtej skupiny.

Poznámka: Vo všetkých pochybných prípadoch je potrebné vykonať opakovaný test s hemaglutinačnými sérami inej série.

STANOVENIE KRVNEJ SKUPINY DVOJITOU REAKCIOU (ŠTANDARDNÝM SÉROM A ŠTANDARDNÝMI ERYTROCYTMI) (crossover metóda)

Podstatou metódy je, že pomocou štandardných izohemaglutinačných sér sa zisťuje prítomnosť alebo neprítomnosť skupinových antigénov A a B v testovanej krvi a pomocou štandardných erytrocytov sa zisťuje prítomnosť alebo neprítomnosť skupinových protilátok calamus v plazme. Štandardné červené krvinky sú 10-20% suspenzia červených krviniek skupín 0(1), A(II) a B(III) v citrátovo-fyziologickom roztoku. Pripravujú sa z krvi darcov vopred slávna skupina krvi, skladujte pri +4-8°C. Čas použiteľnosti 2-3 dni.

Materiálové vybavenie: štandardné séra 0(1), A(II), B(III), skupiny dvoch sérií, štandardné erytrocyty 0(1), A(II), B(III) skupiny, izotonický roztok chloridu sodného, ​​ihly, taniere, sklenené tyčinky alebo sklíčka, pipety, presýpacie hodiny, gumené rukavice, maska, okuliare, plátenná zástera.

Spôsob vykonania:

1. Nasaďte si masku a zásteru, ošetrite ruky dezinfekčným prostriedkom na ruky, nasaďte si rukavice a ochranné okuliare.

2. Do skúmavky bez stabilizátora odoberte 3-5 ml testovanej krvi. Krv sa musí nechať usadiť alebo sa musí odstrediť, aby sa získalo sérum.

3. Naneste na tabletu dve kvapky štandardných sér skupiny 0(1), A(II), B(III), dve série.

4. Do každej skupiny sér aplikujte jednu kvapku štandardných erytrocytov skupiny 0 (1), A (II), B (III).

5. Pridajte jednu kvapku testovanej krvi do štandardného séra a dve kvapky testovacieho séra do štandardných erytrocytov.

6. Zmiešajte kvapky rohom podložného sklíčka, pričom zakaždým zmeňte uhol tak, aby nedošlo k zmiešaniu rôznych sér a rôznych erytrocytov.

7. Kýpanie tabletou v rukách po dobu 5 minút, sledujte nástup aglutinácie.

Vyhodnotenie výsledkov:

Pri interpretácii výsledkov vyhodnoťte údaje získané z oboch reakcií (so štandardnými izohemaglutinačnými sérami a štandardné červené krvinky)

1. Erytrocyty skupiny O (I) sú kontrolné, nedochádza u nich k aglutinácii.

2. Aglutinácia so štandardnými erytrocytmi A a B a žiadna aglutinácia v troch štandardných sérach dvoch sérií - v testovacom sére sú prítomné oba aglutiníny a aj β a v testovaných erytrocytoch nie sú žiadne aglutinogény, t.j. krv patrí do skupiny 0 ( ja).

3. Aglutinácia štandardnými erytrocytmi skupiny B(III) a štandardným sérom skupiny 0(1), B(III) - testované erytrocyty obsahujú aglutinogén A a testované krvné sérum obsahuje aglutinín β. Preto krv patrí do skupiny A (II).

4. Aglutinácia so štandardnými erytrocytmi skupiny A (II) a so štandardným sérom skupiny A (II), 0 (1) - testované erytrocyty obsahujú aglutinogén B a testovacie sérum obsahuje aglutinín a. Preto krv patrí do skupiny B (III).

5. Nedochádza k aglutinácii so štandardnými erytrocytmi a dochádza k aglutinácii so štandardnými sérami - testované erytrocyty obsahujú aglutinogény A aj B a v testovanom krvnom sére chýbajú oba aglutiníny krv patrí do skupiny AB (IV).

Poznámka. Výsledok krížovej metódy sa považuje za spoľahlivý iba vtedy, ak sa odpovede o testovanej krvnej skupine zhodujú so štandardnými izohemaglutinačnými sérami a štandardnými erytrocytmi. Ak sa výsledky nezhodujú, obe reakcie sa musia zopakovať.

STANOVENIE KRVNEJ SKUPINY POMOCOU PROTILÁTOK

Krvnú skupinu možno určiť pomocou monoklonálnych protilátok (MAbs). Na stanovenie aglutinogénov erytrocytov sa používajú štandardné činidlá tsoliclone antn-A a antn-B. Monoklonálne protilátky sa vyrábajú pomocou hybridómovej bitechnológie. Hybridóm je bunkový hybrid, ktorý je výsledkom fúzie nádorovej bunky kostnej drene (myelóm) s imunitným lymfocytom, ktorý syntetizuje špecifické monoklonálne protilátky. Hybridóm nadobúda vlastnosti oboch „rodičov“: schopnosť neobmedzeného rastu, charakteristickú pre nádorovú bunku, a schopnosť syntetizovať protilátky, charakteristickú pre imunitný lymfocyt. Koliklony anti-A a anti-B sú produkované dvoma rôznymi hybridómami. Sú určené na stanovenie ľudskej ABO krvnej skupiny namiesto štandardných izohemaglutinačných sér. Koliklony anti-A (červené) a anti-B ( modrej farby) sa vyrábajú v natívnej aj lyofilizovanej forme v ampulkách s 20, 50, 100, 200 dávkami s rozpúšťadlom pripojeným ku každej ampulke s objemom 2, 5, 10, 20 ml. Lyofilizovaný prášok sa zriedi izotonickým roztokom chlorid sodný bezprostredne pred štúdiom. Na každé stanovenie krvnej skupiny sa použije jedna séria anti-A a anto-B činidiel.

Materiálové vybavenie: anti-A a anti-B zoliklony, izotonický roztok chloridu sodného, ​​ihly, doštičky, sklenené tyčinky alebo sklíčka, pipety, presýpacie hodiny, gumené rukavice, maska, okuliare, plátenná zástera.

Spôsob vykonania:

1. Nasaďte si masku a zásteru, ošetrite ruky dezinfekčným prostriedkom na ruky, nasaďte si rukavice a ochranné okuliare.

2. Skontrolujte vhodnosť zoliklonov, daroval krv.

3. Na tanierik napíšte celé meno darcu a príjemcu.

4. Otvorte ampulky s tsoliklonmi, rozpúšťadlami, všetko premiešajte pomocou samostatných injekčných striekačiek, nalejte tsoliclones do fliaš pomocou pipety (anti-A - červená, anti-B - modrá).

5. Odoberte krv príjemcovi a darcovi.

6. Aplikujte 1 kvapku (0,1 ml) tsoliclone do dvoch jamiek pod príslušnými nápismi: anti-A alebo anti-B: do prvej - tsoliclone anti-A, do druhej - tsoliclone anti-B.

7. Pomocou samostatného konca sklenenej tyčinky alebo samostatnej pipety pre každú jamku preneste kvapku krvi 10-krát menšiu ako kvapka tsoliclonu zo skleneného podložného sklíčka do jamky a premiešajte s kvapkou tsoliclone, kým nevznikne homogénne sfarbenie tvorené.

Na určenie krvnej skupiny je potrebné nasledujúce vybavenie: dve sady štandardných hemaglutinačných sér skupín I (0), II (A), III (B) dvoch rôznych sérií a jedna ampulka séra IV (AB) (suchá , čistá pipeta je umiestnená v každej ampulke so sérom ), fľaštička izotonického roztoku chloridu sodného s pipetou, čistá, suchá doštička, podložné sklíčka, sterilné ihly v tvare kopija na prepichnutie kože prsta, sterilné gázové guľôčky, alkohol . Stanovenie sa vykonáva v miestnosti s dobré osvetlenie pri teplotách od 15 do 25°C.

Každá ampulka štandardného séra musí mať štítok z pasu s uvedením krvnej skupiny, čísla šarže, titra, dátumu exspirácie a miesta výroby. Je zakázané používať ampulku bez označenia. Štandardné séra na stanovenie krvnej skupiny podľa systému AB0 sa vyrábajú s určitým farebným označením: I (0) - bezfarebná, II (A) - modrá, III (B) - červená, IV (AB) - žltá. Označenie je na štítku vo forme farebných pruhov: na štítku séra I (0) nie sú žiadne pruhy, sérum II (A) - dva modré pruhy, sérum III (B) - tri červené pruhy a sérum IV ( AB) - štyri žlté pruhy farieb. Séra sa uchovávajú pri teplote 4-10 ° C. Sérum by malo byť ľahké a priehľadné, ampulka by mala byť neporušená. Prítomnosť vločiek, sedimentu a zákal sú znakmi nevhodnosti séra. Sérový titer musí byť aspoň 1:32, aktivita musí byť vysoká: prvé známky aglutinácie sa musia objaviť najneskôr do 30 s. Séra s uplynutou trvanlivosťou sú nevhodné na použitie.

Doska je rozdelená farebnou ceruzkou na štyri štvorce a štvorce I (0), II (A), III (B) sú označené v smere hodinových ručičiek. Veľká kvapka séra z dvoch sérií skupín I (0), II (A), III (B) sa nanesie pomocou pipety do príslušného štvorca platne. Konček prsta sa ošetrí alkoholom a koža sa prepichne ihlou. Prvá kvapka krvi sa odstráni gázovou guľôčkou, ďalšie kvapky sa postupne pridávajú do kvapiek séra pomocou rôznych rohov podložného sklíčka a dôkladne sa premiešajú. Kvapka pridanej krvi by mala byť 5-10 krát menšia ako kvapka séra. Potom sa zatrasením doštičky dôkladne premieša krv a sérum. Predbežné výsledky sa vyhodnotia po 3 minútach, potom sa pridá kvapka izotonického roztoku chloridu sodného, ​​znova sa premieša pretrepaním platne a po 5 minútach sa uskutoční konečné vyhodnotenie aglutinačnej reakcie (obr. 37, pozri farbu).

o pozitívna reakcia izohemaglutinačné vločky a zrná z lepkavých červených krviniek sa neoddeľujú, keď sa pridá a mieša izotonický roztok chloridu sodného. Ak je reakcia negatívna, kvapky séra na platni sú priehľadné, rovnomerne Ružová farba, neobsahujú vločky ani zrná. Možné sú nasledujúce štyri kombinácie aglutinačných reakcií so štandardnými sérami skupín I(0), II(A), III(B).

1. Všetky tri séra v oboch sériách nespôsobujú aglutináciu. Krvný test je skupina I (0).

2. Izohemaglutinačná reakcia je negatívna so sérami skupiny II(A) oboch sérií a pozitívna so sérami skupín I(0) a III(B). Krvný test je skupina II(A).

3. Izohemaglutinačná reakcia je negatívna so sérom skupiny III(B) v oboch sériách a pozitívna so sérom skupiny I(0) a III(A). Krvný test je skupina III (B).

4. Séra skupín I(0), II(A), III(B) dávajú pozitívnu reakciu v oboch sériách. Krv patrí do skupiny IV (AB). Ale predtým, ako urobíme takýto záver, je potrebné vykonať izohemaglutinačnú reakciu so štandardným sérom skupiny IV (AB) pomocou rovnakej metódy. Negatívna izohemaglutinačná reakcia nám umožňuje konečne zaradiť testovanú krv do skupiny IV (AB).

Identifikácia iných kombinácií naznačuje nesprávna definícia krvná skupina pacienta.

Informácie o krvnej skupine pacienta sa zapíšu do anamnézy a napíše sa príslušná poznámka titulná strana podpísané lekárom, ktorý vykonal štúdiu, s uvedením dátumu štúdie.

Chyby pri určovaní krvnej skupiny sú možné v situáciách, keď pri skutočnej prítomnosti aglutinácie nie je zistená alebo naopak aglutinácia je zistená pri jej skutočnej absencii. Nezistená aglutinácia môže byť spôsobená: 1) slabou aktivitou štandardného séra alebo nízkou aglutinovateľnosťou erytrocytov; 2) nadmerné množstvo testovanej krvi pridané do štandardného séra; 3) oneskorená aglutinačná reakcia pri vysokej teplote životné prostredie.

Aby sa predišlo chybám, je potrebné použiť aktívne sérum s dostatočne vysokým titrom s pomerom objemu testovanej krvi k štandardnému séru 1:5, 1:10. Štúdia sa vykonáva pri teplote nepresahujúcej 25 ° C, výsledky by sa mali hodnotiť najskôr 5 minút od začiatku štúdie.

Detekcia aglutinácie v jej skutočnej neprítomnosti môže byť spôsobená zaschnutím kvapky séra a tvorbou „mincových“ stĺpcov červených krviniek alebo prejavom studenej aglutinácie, ak sa štúdia vykonáva pri teplote okolia nižšej ako 15 °C Pridanie kvapky izotonického roztoku chloridu sodného do testovanej krvi a séra a vykonávanie výskumu pri teplotách nad 15 °C vám umožní vyhnúť sa týmto chybám. Chyby pri určovaní krvnej skupiny sú vždy spojené s porušením metodiky výskumu, preto je potrebné starostlivé dodržiavanie všetkých pravidiel výskumu.

Vo všetkých pochybných prípadoch je potrebné znovu otestovať priradenie do skupiny štandardnými sérami z iných sérií alebo použitím štandardných erytrocytov.

Stanovenie krvnej skupiny podľa systému AB0 pomocou monoklonálnych protilátok anti-A a anti-B (koliklony anti-A a anti-B)

Zoliklony anti-A a anti-B sa používajú na určenie krvnej skupiny osoby podľa systému ABO namiesto štandardných izohemaglutinačných sér detekciou antigénov A a B v erytrocytoch pomocou štandardných protilátok obsiahnutých v zoliklonoch.

Monoklonálne protilátky anti-A a anti-B sú produkované dvoma rôznymi hybridómami získanými fúziou svalových B lymfocytov produkujúcich protilátky s myšacími myelómovými bunkami. Menované zoliklony sú zriedenou ascitickou tekutinou myší nesúcich hybridómy obsahujúcej IgM proti antigénom A a B. Koliklony poskytujú rýchlejšiu a výraznejšiu aglutinačnú reakciu ako štandardné AB0 séra.

Krvná skupina sa zisťuje pri teplote 15 až 25 °C. Nanášajte jeden po druhom na porcelánový tanier alebo označený tanier. veľký pokles anti-A a anti-B zoliklony, kvapka testovanej krvi 10-krát menšej veľkosti sa aplikuje v blízkosti a zmieša sa so samostatnými tyčinkami alebo rohmi podložných sklíčok. Mierne potraste platňou a pozorujte reakciu 2,5 minúty. Reakcia nastáva zvyčajne v priebehu prvých 3-5 s a prejavuje sa tvorbou malých červených agregátov a následne vločiek. Možné sú nasledujúce možnosti aglutinačnej reakcie.

1. Nedochádza k aglutinácii s anti-A a anti-B koliklonmi, krv neobsahuje aglutinogény A a B - testovaná krv je skupina I (0) (obr. 38, pozri farbu vrátane).

2. Aglutinácia sa pozoruje pri anti-A koliklonoch, erytrocyty testovanej krvi obsahujú aglutinogén A – testovaná krv je skupina II(A).

3. Aglutinácia sa pozoruje pri anti-B coliclone, červené krvinky testovanej krvi obsahujú aglutinogén B – testovaná krv je skupina III (B).

4. Aglutinácia sa pozoruje pri anti-A a anti-B koliklonoch, erytrocyty obsahujú aglutinogény A a B - skúmaná krv skupiny IV (AB) (tabuľka 2).

Tabuľka 2

Aglutinačná reakcia študovaných erytrocytov s anti-A a anti-B cyklónmi

V prítomnosti aglutinačnej reakcie s anti-A a anti-B koliklonmi [krvná skupina IV (AB)] sa na vylúčenie nešpecifickej aglutinácie vykoná dodatočná kontrolná štúdia s izotonickým roztokom chloridu sodného. Veľká kvapka (0,1 ml) izotonického roztoku sa zmieša s malou (0,01 ml) kvapkou testovanej krvi. Neprítomnosť aglutinácie potvrdzuje, že testovaná krv patrí do skupiny IV (AB). Ak je prítomná aglutinácia, krvná skupina sa určí pomocou premytých štandardných červených krviniek.

Anti-A a anti-B zoliklony sú dostupné v tekutej forme v ampulkách alebo liekovkách, tekutina je sfarbená do červena (anti-A) a modrej (anti-B). Uchovávajte v chladničke pri teplote 2-8 °C. Čas použiteľnosti 2 roky.

V súčasnosti medicína dosiahla veľké výšky. Lekári sú schopní vykonať dlhé operácie a zachrániť ľudí aj z tých zdanlivo beznádejných situácií z hľadiska prežitia. V takýchto prípadoch však treba čeliť problému potreby transfúzie krvi. Na dlhú dobu nebolo to možné, pretože pacienti zomierali veľmi rýchlo. ale táto otázka bola vyriešená objavom konceptu krvných skupín, či skôr detekcie antigénov na erytrocytoch a následne protilátok v krvnej plazme.

Začiatkom dvadsiateho storočia objavil austrálsky lekár a vedec na čiastočný úväzok K. Landsteiner prítomnosť antigénov a protilátok v krvi. Antigény sa nachádzajú na povrchu červených krviniek. Sú ich 2 druhy. Pre jednoduchosť ich biológovia označili ako A a B. Protilátky sú zase obsiahnuté v krvnej plazme a nazývajú sa α a β. Ak je A spojené s α a B s β, začne proces zrážania krvi. Táto reakcia sa nazýva hemaglutinácia.

Z dostupných súborov antigénov a protilátok je teda možné vytvoriť 4 typy krvi, ktoré sú uvedené v tabuľke nižšie:

Číslo skupiny	Svetové označenie	Antigény	Protilátky
ja	0	žiadne	α a β
II	A	A	β
III	B	B	α
IV	AB	A a B	žiadne

Dôležité! V závislosti od toho, aký typ darcovskej krvi je poskytnutý na transfúziu, krv pacienta sa buď zráža, alebo nie. Prvý prípad je smrteľný.

Séra na reakciu

V súčasnosti existuje pomerne veľké množstvo spôsobov, ako určiť krvnú skupinu. ale väčšina z ktorých je určený na analýzu v veľké laboratóriá. Aj keď sa však nachádzate v malej obci alebo na mieste, kde nie je možné takéto inštitúcie kontaktovať, stále zostáva možnosť identifikácie čísla vašej krvnej skupiny.

Stanovenie krvnej skupiny sa vykonáva pomocou štyroch špeciálnych štandardných sér, ktoré budú vyrobené z ľudskej krvi. Sú dostupné buď vo fľaštičkách alebo v ampulkách s objemom 2-5 ml a zodpovedajú rôznym krvným skupinám:

1. 0. Dodáva sa s bielym štítkom a je čírej farby.
2. A. Modrá kvapalina. Na fľašu sú aplikované dva modré pruhy.
3. B. Bledoružová kvapalina. Na fľaši sú tri pruhy rovnakej farby.
4. AB. Kvapalina žltá farba. Fľaša má 4 pruhy rovnakej farby.

Dôležité! V skutočnosti sú tieto činidlá pri výrobe bezfarebné. Sú špeciálne natreté tak, aby ich pri používaní nebolo možné zameniť.

Na štítkoch sú tiež:

• titer;
• dátum výroby;
• dátum minimálnej trvanlivosti;
• informácie o výrobcovi;
• sériové číslo.

Ako sa určuje krvná skupina?

Na určenie vašej krvnej skupiny budete potrebovať:

• plochá doska s 8 priehlbinami;
• sklenené tyčinky alebo pipety - 8 kusov;
• 2 sady sér rôznych sérií, aby sa eliminovala možnosť chýb;
• bežné alebo presýpacie hodiny.

Séra sa umiestnia v 2 radoch na rovnú dosku, po ktorej sa odoberú sklenené tyčinky. S ich pomocou sa testovaná krv zavádza do riadkov. Mieša týmito tyčinkami, po ktorých sa tanier začne hojdať. Ak máte šťastie, proces je možné sledovať za 10-30 sekúnd, ale je lepšie to urobiť až 5 minút, aby ste vylúčili možnosť pomalej reakcie. Potom sa získané výsledky študujú a dešifrujú.

Pozor! V prvom rade by ste si mali dať pozor na hrnčeky, do ktorých sa nalialo sérum krvných skupín II a III. Zaujímavosťou je prítomnosť drobných vločiek, ktoré vznikajú ako dôsledok aglutinácie – zhlukovania červených krviniek.

1. Ak nie sú žiadne vločky ani v II, ani v III a počas dodatočnej kontroly sa nič nezrazilo ani v I alebo IV, potom existuje prvá krvná skupina.
2. Ak sa v dôsledku toho koagulácia pozoruje všade okrem séra skupiny II, potom testovaná krv patrí do druhej skupiny.
3. Ak sa zrážanie pozoruje vo všetkých vzorkách okrem séra Skupina III, čo znamená, že testovaná krv patrí do skupiny s rovnakým názvom.
4. Ak k zrážaniu došlo vo všetkých vzorkách okrem séra skupiny IV, potom sa analyzovala krvná skupina s rovnakým názvom.

Dôležité! Presne povedané, krvnú skupinu je možné určiť iba na základe séra krvných skupín 2 a 3. Ako však možno z podstaty metódy usúdiť, existuje veľký vplyv ľudský faktor. Z tohto dôvodu sa ako doplnkový test používajú séra krvnej skupiny I a IV.

Po ukončení procedúry by sa mal použitý riad dôkladne umyť teplá voda a sušené. Potom sa môže použiť na ďalší výskum.

Nepresné výsledky a ich dôvody

Niekedy sa stáva, že zrazeniny zlepených červených krviniek nie sú veľmi jasne viditeľné. Počas testovania možno často pridať izotonický roztok chloridu sodného. Eliminuje možnosť falošnej aglutinácie, ktorá spôsobí, že vločky, ktoré nevznikli v dôsledku koagulačného procesu, sa opäť rozpadnú.

Dôležité! Ak výsledok analýzy nie je veľmi jasne viditeľný, musí sa vykonať znova a pomocou mikroskopu preskúmať jemnú aglutináciu.

V prípade jasne identifikovaného výsledku môžete pacientovi okamžite presne povedať jeho krvnú skupinu. V opačnom prípade by ste sa mali obrátiť na iné metódy analýzy.

Nemali by sme zabúdať na možnosť chýb, ktoré sa zvyčajne vyskytujú z nasledujúcich dôvodov:

• použitie expirovanej alebo slabej srvátky;
• použiť tiež veľká kvantita krv testovaná vo vzťahu k objemu séra;
• reakcia trvá oveľa dlhšie, ako vyžadujú predpisy;
• teplota okolia nezodpovedá normálu, výsledkom čoho je studená aglutinácia červených krviniek.

Okrem toho je potrebné poznamenať, že počas procesu sušenia sa môžu pozdĺž okrajov zmesi séra a testovanej krvi vytvoriť zrnité oblasti, ktoré nemôžu slúžiť ako indikátory reakcie.

Použitie výsledku v praxi

Ako už bolo uvedené, stanovenie krvnej skupiny sa vykonáva na vylúčenie smrteľný výsledok počas jej transfúzie. V ideálnom prípade by mal pacient, ktorý dostáva krv – príjemca – dostať transfúziu krvi rovnakého typu, ako je jeho vlastná. Nie je to však vždy tak. Už len preto, že drvivá väčšina ľudí s prvou krvnou skupinou je 50%. Zároveň sú univerzálnymi darcami, pretože im chýbajú aglutinogény, ktoré stimulujú proces zrážania krvi.

Pozor! Pokiaľ ide o pacientov s krvnou skupinou IV, možno ich nazvať univerzálnymi príjemcami, pretože ich telo je schopné prijať krv akejkoľvek skupiny. Zároveň ich krv nemožno transfúziovať predstaviteľom inej skupiny.

Na ilustráciu kompatibility darcov a príjemcov uvádzame tabuľku:

Číslo skupiny	Pre ktoré skupiny sa stáva darcom?	Pre ktoré skupiny sa stáva príjemcom?
ja	I, II, III, IV	ja
II	II, IV	I, II
III	III, IV	I, III
IV	IV	I, II, III, IV

IN modernom svete Poznať svoju krvnú skupinu je dôležité. Z pohľadu lekárov bude od toho závisieť miera prežitia pacientov. Z pohľadu Obyčajní ľudia toto je šanca pohotovostna situacia zachrániť si život. V tomto ohľade nebude zbytočné poznať svoju krvnú skupinu a ak je to možné, uviesť ju do pasu alebo iných dokumentov, pretože kedykoľvek môže dôjsť k ohrozeniu zdravia a života.

Video - Stanovenie krvnej skupiny

Video - Stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora

Stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora hrá zásadnú úlohu v prípadoch, keď hovoríme o o záchrane života človeka. Z tohto dôvodu sa takáto štúdia vykonáva u všetkých pacientov v predoperačnom období, u tehotných žien pred pôrodom av mnohých iných situáciách, ktoré si môžu vyžadovať urgentnú transfúziu. Existuje niekoľko spôsobov, ako určiť krvnú skupinu pomocou rôznych laboratórnych činidiel a jeden z nich je založený na použití chemických látok nazývané zoliklony. Čo je stanovenie krvnej skupiny pomocou zoliklonov a ako sa postup vykonáva?

Skupina a Rh faktor sú geneticky podmienené krvné charakteristiky, ktoré sú zdedené od rodičov a zostávajú nezmenené počas celého života človeka. Krvné skupiny sú klasifikované na základe určitú množinu biochemické parametre a zloženie antigénov, a má 4 hlavné skupiny. Transfúzia krvi inkompatibilnej skupiny alebo s odlišným Rh faktorom pacientovi je so sebou smrteľné nebezpečenstvo – imunitný systém začne produkovať protilátky proti cudzie bunky, ktoré ich napádajú a ničia. Práve z tohto dôvodu je v situáciách, kedy hrozí rozsiahla strata krvi, nevyhnutná presná definícia krvnú príslušnosť a Rh faktor darcu aj príjemcu.

Čo sú zoliklony?

Koliklony sú protilátky, ktoré sa získavajú technológiou genetické inžinierstvo. Zvyčajne sa na získanie zoliklonov odoberú laboratórne myši - zvieratá sa injekčne podajú špeciálna droga, po ktorej sa odoberá kvapalina brušná dutina– práve ten obsahuje látky potrebné na analýzu. S vedecký bod Cykloklony možno klasifikovať ako imunoglobulíny M, ktoré sú schopné reagovať s aglutinogénmi - špecifickými bunkami prítomnými na povrchu červených krviniek.

Práve aglutinogény, respektíve ich typy, slúžia ako základ pre klasifikáciu krvných skupín: napríklad nosiči prvej skupiny tieto látky nemajú, majitelia druhej majú aglutinogény typu A atď. niektoré zoliklony reagujú s rôznymi typmi aglutinogénov, čo nám umožňuje určiť krvnú skupinu pacienta.

Tsoliklons sa vyrábajú vo forme tekutiny, plnené do 5 ml alebo 10 ml fliaš a každý typ má špecifické vlastnosti:

• anti-A je červenkastá kvapalina;
• anti-B má modrý odtieň;
• anti-AB (anti-D)– bezfarebný priehľadný roztok.

Výhodou cyklónov oproti iným chemickým činidlám je, že nevyžadujú špeciálny výcvik na analýzu a umožniť jej vykonanie v čo najskôr. Navyše to nie sú bunky Ľudské telo, Preto infekčná infekcia zdravotnícky personál v kontakte s látkami je úplne vylúčený.

Ako prebieha výskum?

Na určenie krvnej skupiny pomocou cyklónov potrebujete plochý, rovný povrch (doštičku) navlhčenú vodou, sadu chemických činidiel a vzoriek biologických tekutín a odborník môže použiť akúkoľvek krv: kapilárnu, venóznu, zmrazenú atď.

Dôležité! Po niekoľkých minútach dôjde k reakcii, pomocou ktorej je možné s vysokou presnosťou určiť, či krv patrí do určitej skupiny.

Interpretácia výsledkov postupu sa vykonáva vizuálne - kvapaliny sa buď úplne spoja, alebo dôjde k zlepeniu (aglutinácii) krviniek, v dôsledku čoho sa biomateriál koaguluje a tvoria sa v ňom malé vločky.

Dešifrovanie sa vykonáva takto:

• ak reakcia chýba vo všetkých vzorkách biomateriálu, možno ho zaradiť do skupiny I (to znamená, že v krvinkách nie je žiadny aglutinogén);
• úvod krvné bunky v reakcii s tsoliclone anti-A naznačuje, že krv skúmanej osoby patrí do skupiny II;
• zlepenie erytrocytov anti-B koliklonom je znakom krvnej skupiny III;
• ak biomateriál reagoval so všetkými látkami, potom patrí do skupiny IV.

Na kontrolu presnosti výsledkov a stanovenie Rh faktora sa do vzoriek biomateriálu pridáva tsoliklon AB - ak dôjde k aglutinačnej reakcii, je v krvi zistený ako pozitívny (neprítomnosť adhézie červených krviniek naznačuje negatívny Rh faktor). Aby sa vylúčili choroby, pri ktorých dochádza k aglutinácii pri kontakte s akýmikoľvek dráždivými látkami, kvapka krvi pacienta sa zmieša s fyziologickým roztokom. V prípadoch, keď nie je možné vizuálne určiť výsledok, analýza sa opakuje a vzorky sa skúmajú pod mikroskopom.

Tabuľka. Reakcie rôzne skupiny krv s anti-A a anti-B zolikónom.

Čo by ste mali zvážiť pri vykonávaní analýzy?

Aby bol výsledok analýzy čo najspoľahlivejší, počas postupu musí byť splnených niekoľko podmienok:

Doba trvania reakcie by mala byť aspoň 3 minúty a ak je výsledok sporný, čas pozorovania vzoriek biomateriálu by sa mal predĺžiť na 5 minút. Po 10 minútach však môže biomateriál vyschnúť a červené krvinky sa môžu prirodzene vyzrážať, preto by ste takejto štúdii nemali dôverovať.

Čo môže ovplyvniť výsledok?

Zoliklony sú citlivé na environmentálne faktory, preto je potrebné pri výskume pozorovať teplotný režim a hygienické pravidlá - miestnosť musí byť čistá a suchá a jednotlivé odbery krvi nesmú prísť do vzájomného kontaktu. Navyše pri niektorých patológiách môže ľudská krv zmeniť svoje vlastnosti, v dôsledku čoho sa výskum výrazne skomplikuje. Pri dysfunkcii pečene, sleziny, septických procesoch a rozsiahlych popáleninách teda u pacientov dochádza k takzvanej panaglutinácii krvi – červené krvinky sa vyzrážajú aj pri reakcii s fyziologickým roztokom. U pacientov s leukémiou a novorodencov sa pozoruje iný obraz - krvinky nereagujú na podnety, čo znemožňuje sledovanie adhéznej reakcie.

Poznámka! Okrem toho, u dvojčiat, ľudia s transplantáciou kostná dreň alebo u tých, ktorí podstúpili viacnásobnú transfúziu krvi, v biologické tekutiny vychádzať odlišné typy erytrocyty - preto sa počas analýzy pozorujú nepredvídateľné výsledky. Ak chcete definovať skupinu vo vyššie uvedených prípadoch, ďalšie laboratórne testy pomocou špeciálneho vybavenia.

Analýza pomocou zoliklonov je jednou z najjednoduchších a presné spôsoby určenie krvnej skupiny človeka. Ak sa dodržia všetky pravidlá a podmienky postupu, pravdepodobnosť chybného výsledku sa minimalizuje, a preto sa chemické činidlá tohto typu používajú takmer vo všetkých moderných laboratóriách.

Video - Stanovenie krvných skupín pomocou zoliklonov

Materiály sú publikované len na informačné účely a nie sú predpisom na liečbu! Odporúčame vám, aby ste sa poradili s hematológom vo vašom zdravotníckom zariadení!

Krvná skupina a Rh faktor sú špeciálne proteíny, ktoré určujú jeho individuálny charakter, rovnako ako farba očí alebo vlasov človeka. Skupina a Rhesus majú veľký význam v medicíne pri liečbe krvných strát, krvných chorôb a tiež ovplyvňujú formovanie tela, fungovanie orgánov a dokonca psychologické vlastnosti osoba.

Koncept krvnej skupiny

Dokonca aj starí lekári sa snažili doplniť stratu krvi transfúziou krvi z človeka na človeka a dokonca aj zo zvierat. Všetky tieto pokusy mali spravidla smutný výsledok. A až na začiatku dvadsiateho storočia rakúsky vedec Karl Landsteiner objavil u ľudí rozdiely v krvných skupinách, čo boli špeciálne bielkoviny v červených krvinkách – aglutinogény, tzn. spôsobenie reakcie aglutinácia – zlepovanie červených krviniek. Práve to spôsobilo smrť pacientov po transfúzii krvi.

Boli stanovené dva hlavné typy aglutinogénov, ktoré sa bežne nazývajú A a B. Adhézia červených krviniek, teda krvná inkompatibilita, nastáva, keď sa aglutinogén spojí s proteínom rovnakého mena - aglutinínom, obsiahnutým v krvi plazma a a b. To znamená, že v ľudskej krvi nemôžu byť proteíny rovnakého mena, ktoré spôsobujú zlepovanie červených krviniek, to znamená, že ak je tam aglutinogén A, tak v nej nemôže byť aglutinín a.

Zistilo sa tiež, že krv môže obsahovať oba aglutinogény – A aj B, no potom neobsahuje žiadny typ aglutinínu a naopak. To všetko sú znaky, ktoré určujú krvnú skupinu. Keď sa teda spoja rovnomenné proteíny v červených krvinkách a plazme, vzniká konflikt krvných skupín.

Typy krvných skupín

Na základe tohto objavu boli u ľudí identifikované 4 hlavné typy krvných skupín:

• 1., ktorá neobsahuje aglutinogény, ale obsahuje aglutiníny a aj b, je to najbežnejšia krvná skupina, ktorú má 45 % svetovej populácie;
• 2., obsahujúci aglutinogén A a aglutinín b, sa zistí u 35 % ľudí;
• 3., ktorý obsahuje aglutinogén B a aglutinín a, má ho 13 % ľudí;
• 4., obsahujúca aglutinogény A aj B a neobsahujúca aglutiníny, táto krvná skupina je najvzácnejšia, je určená len u 7 % populácie.

V Rusku je akceptované označenie krvnej skupiny podľa systému AB0, to znamená podľa obsahu aglutinogénov v nej. V súlade s tým vyzerá tabuľka krvných skupín takto:

Krvná skupina sa dedí. Môže sa vaša krvná skupina zmeniť Odpoveď na túto otázku je jasná: nemôže. Hoci história medicíny pozná len jeden prípad spojený s génové mutácie. Gén, ktorý určuje krvnú skupinu, sa nachádza v 9. páre chromozómová sada osoba.

Dôležité! Úsudok o tom, ktorá krvná skupina je vhodná pre každého, dnes rovnako ako koncept stratil na aktuálnosti univerzálny darca, teda majiteľ 1. (nulovej) krvnej skupiny. Bolo objavených mnoho podtypov krvných skupín a transfúziou sa dostáva len krv rovnakého typu.

Rh faktor: negatívny a pozitívny

Napriek Landsteinerovmu objavu krvných skupín sa pri transfúziách naďalej objavovali transfúzne reakcie. Vedec pokračoval vo výskume a spolu s kolegami Wienerom a Levine sa mu podarilo objaviť ďalší špecifický proteín-antigén erytrocytov – Rh faktor. Pôvodne bol identifikovaný v opice Makak rhesus, podľa ktorého dostal svoje meno. Ukázalo sa, že Rh je prítomný v krvi väčšiny ľudí: 85 % populácie má tento antigén a 15 % ho nemá, to znamená, že má negatívny Rh faktor.

Zvláštnosťou Rh antigénu je, že keď sa dostane do krvi ľudí, ktorí ho nemajú, podporuje tvorbu anti-Rh protilátok. Pri opakovanom kontakte s Rh faktorom tieto protilátky spôsobujú závažnú hemolytickú reakciu, ktorá sa nazýva Rh konflikt.

Dôležité! Keď je Rh faktor negatívny, neznamená to jednoducho neprítomnosť Rh antigénu v červených krvinkách. V krvi môžu byť prítomné anti-Rh protilátky, ktoré by mohli vzniknúť pri kontakte s Rh-pozitívnou krvou. Preto je analýza na prítomnosť Rh protilátok povinná.

Stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora

Krvná skupina a Rh faktor podliehajú povinnému stanoveniu v nasledujúcich prípadoch:

• na krvné transfúzie;
• na transplantáciu kostnej drene;
• pred akoukoľvek operáciou;
• počas tehotenstva;
• na choroby krvi;
• u novorodencov s hemolytickou žltačkou (nekompatibilita Rhesus s matkou).

V ideálnom prípade by však každý človek, dospelý aj deti, mal mať informácie o príslušnosti k skupine a Rh. Prípady ťažkého úrazu resp akútne ochorenie keď môže byť naliehavo potrebná krv.

Určenie krvnej skupiny

Stanovenie krvnej skupiny sa uskutočňuje špeciálne získanými monoklonálnymi protilátkami podľa systému AB0, teda sérovými aglutinínmi, ktoré spôsobujú adhéziu červených krviniek pri kontakte s rovnomennými aglutinogénmi.

Algoritmus na určenie krvnej skupiny je nasledujúci:

1. Pripravte si koliklony (monoklonálne protilátky) anti-A - ružové ampulky a anti-B - modré ampulky. Pripravte si 2 čisté pipety, sklenené tyčinky na miešanie a podložné sklíčka, jednorazovú 5 ml injekčnú striekačku na odber krvi a skúmavku.
2. Krv sa odoberá zo žily.
3. Veľká kvapka zoliklonov (0,1 ml) sa nanesie na podložné sklíčko alebo sa špeciálne označené malé kvapky testovanej krvi (0,01 ml) zmiešajú so samostatnými sklenenými tyčinkami;
4. Pozorujte výsledok 3-5 minút. Kvapka so zmiešanou krvou môže byť homogénna - mínusová reakcia (-), alebo vypadávajú vločky - plusová reakcia alebo aglutinácia (+). Výsledky musí posúdiť lekár. Možnosti na stanovenie krvnej skupiny sú uvedené v tabuľke:

Stanovenie Rh faktora

Stanovenie Rh faktora sa vykonáva podobne ako stanovenie krvnej skupiny, to znamená pomocou monoklonálna protilátka sérum na Rh antigén. Na špeciálny čistý biely keramický povrch sa v rovnakých pomeroch (10:1) nanesie veľká kvapka činidla (zoliklon) a malá kvapka čerstvo odobratej krvi. Krv sa opatrne premieša sklenenou tyčinkou a činidlom.

Stanovenie Rh faktora pomocou zoliklónov trvá kratšie, pretože reakcia nastáva v priebehu 10-15 sekúnd. Je však potrebné dodržať maximálne 3 minúty. Rovnako ako v prípade určenia krvnej skupiny sa skúmavka s krvou posiela do laboratória.

IN lekárska prax Dnes sa vo veľkej miere používa pohodlná a rýchla expresná metóda na určenie skupinovej príslušnosti a Rh faktora pomocou suchých koliklonov, ktoré sa bezprostredne pred štúdiou zriedia sterilnou vodou na injekciu. Metóda sa nazýva „Erythrotest-group card“, je veľmi vhodná na klinikách, v extrémnych podmienkach aj v teréne.

Charakter a zdravie človeka podľa krvnej skupiny

Ľudská krv ako jeho špecifikum genetická vlastnosť ešte nebol úplne preštudovaný. IN posledné roky Vedci objavili varianty krvných podskupín, vyvíjajú nové technológie na určenie kompatibility atď.

Krvi sa pripisuje aj schopnosť ovplyvňovať zdravie a charakter svojho majiteľa. A hoci táto otázka zostáva kontroverzná, mnohoročné pozorovania zaznamenali Zaujímavosti. Napríklad, Japonskí výskumníci Veria, že charakter človeka môžete určiť podľa jeho krvnej skupiny:

• majitelia 1. krvnej skupiny sú silní, silní, spoločenskí a emocionálni ľudia;
• majitelia druhej skupiny sa vyznačujú trpezlivosťou, svedomitosťou, vytrvalosťou a tvrdou prácou;
• predstavitelia 3. skupiny sú kreatívni jednotlivci, no zároveň sú príliš ovplyvniteľní, panovační a rozmarní;
• ľudia so 4. krvnou skupinou žijú viac citmi, vyznačujú sa nerozhodnosťou, niekedy sú až neospravedlnene drsní.

Pokiaľ ide o zdravie v závislosti od krvnej skupiny, predpokladá sa, že je najsilnejší u väčšiny populácie, teda v skupine 1. Osoby so skupinou 2 sú náchylné na srdcové choroby a onkologické ochorenia, pre majiteľov 3. skupiny je typické slabá imunita, nízka odolnosť voči infekciám a stresu a zástupcovia 4. skupiny sú náchylní na kardiovaskulárna patológia, ochorenia kĺbov, rakovina.