Анализ на определение группы крови RapidVet-H. Кинология. Учебное пособие для вузов

Рисунок 2 Взятие крови при помощи 50 мл шприца с добавленным антикоагулянтом (в данном случае CPDA-1) через иглу-бабочку 21G из яремной вены кошки, находящейся под воздействием седативных веществ.

Рисунок 4 Пробирочный метод для тестирования совместимости крови. Две капли (100-200 ил) сыворотки или гепаринизированной плазмы и две капли 3-5% эритроцитарной суспензии в физ. растворе поменяются в каждую пробирку. Гемагглютинация может быть видна в пробирке 1, отрицательная или контрольная реакция - в пробирке 2, и гемолиз - в пробирке 3.

Рисунок 7 Собака, получающая трансфузию крови через мозговую вену.

Рисунок 8 Внутрикостная трансфузия крови у кошки, находящейся под действием седативных препаратов. Используется тот же участок, что и при биопсии костного мозга

Рисунок 9 Собака с симптомами крапивницы (припухшие губы, отек век и отечные бляшки на коже).

Резюме

Введение

Иммуногематологические особенности у собак

Иммуногематологические особенности у кошек

Общие показания к переливанию крови

Выбор донора и сбор крови

Возможности получения донорской крови

Доноры в закрытой колонии

Общественные доноры

Доноры из ветеринарной клиники

Приготовление и применение цельной крови и препаратов крови

Цельная кровь

Консервированные эритроциты

Плазма

Тромбоциты

Большая перекрестная проба

Малая перекрестная проба

Процедура переливания крови

Реакции на трансфузию

Группы крови и изоэритролиз новорожденных

Заключение

В наши дни процедура переливания крови в практике специалистов по мелкодомашним превратилась из экзотики во вполне себе реальную рутину. Состояний, при которых оно требуется, существует великое множество, одного разбора гемолитических анемий хватит на большую отдельную стену текста, до которой, возможно, я доберусь попозже. Тем не менее вопрос об определении совместимости донорской и реципиентской кровушки по-прежнему вызывает у многих специалистов затруднения, тем более что область эта сложна и не до конца изучена даже в Европах и прочих "прогнивших Западах".

Для начала следует разобраться, что же это такое - группы крови и зачем они нужны. Википедия сообщает нам, что это описание индивидуальных антигенных характеристик эритроцитов, определяемое так-то и так-то. Очень понятно, да? :)

Смысл в том, что организм животных через сложную систему оценки состава поверхностных молекул может (и должен) отличать свои собственные клетки от чужих, кои должны немедленно из организма элиминироваться. Эритроциты разных животных, даже одного вида, к сожалению, также могут отличаться по этим характеристикам. К сожалению - это, конечно, для клиницистов, которым приходится попотеть, чтобы найти совместимых доноров умирающему человеку или животному. При этом белки, определяющие группу крови - это не какие-то специальные белки, которые только для того и нужны, чтобы пощекотать трансфузиологам нервы, а поверхностные мембранные белки, выполняющие свои, не связанные напрямую с иммунной защитой организма, функции.

Общеизвестно, что у человека 4 группы крови. Это тоже не совсем так. 4 группы - только по системе АВО, резус - это уже другая система, которая увеличивает количество возможных вариантов до восьми. Но АВО и резус - это только верхушка айсберга, ибо существуют еще Kell, Kidd, Duffy и другие , о чьем клиническом значении я распространяться не буду.

Вернемся к нашим баранам собакам и кошкам...

Группы крови собак

В этих ваших интернетиках часто можно встретить утверждение, что у собак 7 групп крови (и перечисление). Увы, все далеко не так просто и ясно, а скудность информации не делает вопрос проще.

На самом деле перечисление A-G - это перечисление СИСТЕМ групп крови, точнее только один вариант из ныне употребляемых, датируемый аж 1961 годом. С тех пор многие и многие ученые мужи собирались и пытались привести в порядок имеющиеся данные о группах крови у собак, в 1976 году пришли к номенклатуре DEA (dog erythrocyte antigen), которая в данный момент считается общепринятой в США. Согласно это номенклатуре, системы описываются как DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, DEA 4, DEA 5, DEA 7 и DEA 8. Присовокуплю табличку из Шалма, очень наглядно объясняющую ху из ху в этой запутанной истории.

И это еще далеко не все варианты, а только те, которые более-менее хорошо изучены.

Система DEA 1

Из них наиболее клинически актуальной является DEA 1. В этой системе 3 пары ген-белок и 4 возможных фенотипа - DEA 1.1, 1.2, 1.3 и 0. У одной собаки возможен только один фенотип. У собак, в отличие от системы АВО человека или АВ кошки, в норме нет антител к антигенам других групп, что означает, что в экстренной ситуации собаке, которую никогда не переливали ранее, можно переливать кровь без определения совместимости по DEA 1.1, и переливание будет иметь необходимый эффект. Однако при необходимости повторного переливания уже возникнут сложности.

Есть вещи, которые надо объяснить подробно и на пальцах, и, увы, система DEA 1.1 в этом списке к простейшим не относится.

При переливании DEA 1-отрицательному реципиенту (фенотип 0) крови DEA 1-положительного донора (фенотип любой кроме 0) организм реципиента через 7-10 суток выработает антитела к антигену DEA 1, которые радостно разрушат любые эритроциты, имеющие на себе этот антиген. В дальнейшем такому реципиенту будет требоваться переливание строго DEA 1-отрицательной крови, в противном случае донорские эритроциты вместо ожидаемых трех недель проживут в организме реципиента от нескольких минут до (в лучшем случае) нескольких часов, сводя целебный эффект гемотрансфузии до 0 и даже уводя его в глубокий минус. При этом DEA 1-положительному донору допустимо переливать кровь DEA 1-отрицательного, при условии что этот самый донор никогда в жизни не был реципиентом.

Пока все понятно? :)

Антиген DEA 1, как уже говорилось, может наличествовать в виде вариантов DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 1.3. Генеалогический анализ дает основания предполагать, что DEA 1 имеет аутосомно-доминантный тип наследования, причем DEA 1.1 > DEA 1.2 > DEA 1.3 > 0. Антигрупповые антитела, выработанные невезучим DEA 1-отрицательным донором абзацем выше, дают перекрестную реакцию со всеми тремя вариантами, но различной степени выраженности.

При иммунизации DEA 1-отрицательной собаки кровью DEA 1.1, антитела, которые она выработает, будут мгновенно разрушать эритроциты с DEA 1.1, вызывая острую гемолитическую реакцию, которая, если ее проводить не на стекле, а непосредственно в пациенте, с высокой вероятностью приведет к тяжелым осложнениям. При этом эритроциты с DEA 1.2 и 1.3 эти антитела будут агглютинировать, но не разрушать (хотя с точки зрения полезности для реципиента это немногим лучше).

В России популяционные исследования по группам крови не проводились, но ожидаемо, что процент DEA 1.1, 1.2 и 1.3-положительных собак будет очень сильно варьировать как от региона к региону, так и от породы к породе. В Штатах около 45% собак имеют группу DEA 1.1, 20% DEA 1.2, а DEA 1.3 толком не исследовалась (статистика нагло потырена из того же Шалма). По данным вот этого сайта , большинство грейхаундов DEA 1.1-отрицательны (правда, неясно, что там с DEA 1.2 и 1.3), что добавляет еще один плюс в копилку их положительных качеств как доноров, а лабрадоры - чаще DEA 1.1-положительны.

Помимо острых трансфузионных реакций, в большинстве которых "повинны" антигены группы DEA 1, считается, что у собак также возможен неонатальный изоэритролиз (более, впрочем, характерный для кошек, лошадей и людей ввиду наличия у них групповых антител без предварительной имунизации). Однако как раз из-за отсутствия в норме этих антител случаи считаются скорее спорадическими.

Система DEA 3 (в старой номенклатуре B)
В ней все проще. Собаки могут быть либо DEA 3-положительными, либо отрицательными. При этом у 20% В-отрицательных собак имеются антитела к В, даже при отсутствии предшествовавшей иммунизации несовместимой кровью. В Штатах из популяции всех-всех собак всех-всех пород DEA 3-положительными оказались 6% собак, но в выборке из популяции только грейхаундов DEA 3 имели уже 23% собак. Что еще раз намекает нам на большой разброс статистики по породам.

(картинка с lindasgreys.com просто чтобы разбавить стену текста. Да и просто люблю грейхаундов)

Переливание DEA 3-положительной крови собаке с соответственными антигрупповыми антителами (своими или приобретенными) вызывает разрущение эритроцитов донора в срок доо 5 дней и может стать причиной острых трансфузионных реакций.

Система DEA 4 (С)
Также имеет всего два фенотипа, + и -. Без предварительной иммунизации у DEA-4-отрицательных собак антител к DEA 4 нет. До 98% собак в Штатах DEA 4-положительны, но опять же у нас все может быть совсем не так. Повторное переливание DEA-4-отрицательному реципиенту не вызывает гемолитической реакции даже при наличии антител к DEA 4, однако описан гемолиз у реципиента, которому переливали несомвестимую кровь несколько раз подряд.

Система DEA 5 (D)
Два фенотипа, + и -. У 10% DEA 5-отрицательных собак в норме имеются антитела к DEA 5. Переливание крови сенсибилизированному реципиенту вызывает гемолитическую реакцию и гибель донорских эритроцитов в течение 3х суток.

Система DEA 6 (F)
Два фенотипа, + и -. DEA 6-положительные собаки очень распространены (в Штатах до 100%). В норме антитела к этому антигену отсутствуют. Переливание крови сенсибилизированному реципиенту приводит к умеренно выраженной трансфузионной реакции и умеренному снижению продолжительности жизни донорских эритроцитов.

Система DEA 7 (Tr)
Имеет три фенотипа, Tr, O и отрицательный. Антиген Tr имеется у 40-45% собак. Антитела к Tr и О имеются у 25% DEA 7-отрицательных собак, но они не имеют выраженного гемолитического эффекта, а вот при предшествующей сенсибилизации нарабатываются другие, способные разложить донорскую кровь за срок до 3х суток.

Система DEA 8 изучена мало. Кроме вышеперечисленных, существуют еще системы, не включенные в DEA по причине недавности открытия, а также ряд систем, специфичных, к примеру, только для восточных пород собак (шиба-ину и прочие).

Что делать?
Существуют коммерческие диагностические наборы для определения наличия или отсутствия антигенов DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, и 7. При этом лично я видела в продаже в России только набор для DEA 1.1 - вот он:

Стоимость определения одного антигена высока - для мегакоровского набора это 1-1,5 тысячи за пробу (это жеж специально подготовленные антитела, нанотехнологии буквально), поэтому в реальной жизни протипировать реципиента и хотя бы одного донора по всем из доступных антигенов - роскошь мало кому доступная. При наличии определенного количества постоянных доноров, имхо, имело бы целесообразность их типировать хотя бы по DEA 1.1, а дальнейшую совместимость определять уже по необходимости биопробой или пробой на индивидуальную совместимость. Это хотя бы позволило отделить собак, несовместимых по группе DEA 1 как наиболее клинически значимой и с наиболее серьезными посттрансфузионными реакциями.

В жизни, особенно в некрупных городах, "готовых" доноров нет, и совместимость определяется "на стекле" между реципиентом и каждым из доноров. Метод прост, нагляден, а главное дешев, однако позволяет исключить только вероятность немедленной трансфузионной реакции, ибо взаимодействие эритроцитов удается отслеживать только в течение 5-10 минут, пока капля не высохнет. Спрогнозировать жизнь перелитой крови на 3-5 суток по такому методу, увы, невозможно, поэтому возможность неэффективности переливания или отдаленных трансфузионных реакций следует всегда иметь в виду.

А теперь все то же самое, только по кошкам... :3

Группы крови у кошек

У кошек наибольшее распространение и клиническое применение нашла одна-единственная система групп крови AB, по которой определяются 3 антигенных фенотипа - A, B, AB. Фенотипа 0 не существует. Пока что звучит очень похоже на людей (кроме отсутствия группы 0), и на людей кошки похожи еще и тем, что у них с рождения имеются антигрупповые антитела. Это важный факт, поэтому не поленюсь его лишний раз подчеркнуть: кошкам нельзя переливать кровь, несовместимую по группе, даже в первый раз! Доводилось видеть результат бездумной экстраполяции собачьей трансфузиологии на кошачью - результат был эффектен, реципиент не выжил, хотя врачи из нашего отделения ИТ очень старались.

Любопытно, что групповые антигены A и В кодируются в одной аллели и наследуются по Менделю, причем А доминирует над В. То есть, кошка с генотипом А/А имеет группу крови А, кошка с генотипом А/В тоже имеет группу А, и только кошка с В/В будет иметь группу крови В. Вариант группы крови АВ очень редок, молекулярный механизм его существования не до конца изучен, хотя доказано, что это ни кодоминирование, ни химеризм.

У кошек с группой крови А имеется небольшой титр анти-В антител, причем при проведении совмещения "на стекле" с эритроцитами группы В, где-то у двух третей реципиентов А начального титра этих антител не хватит, чтобы вызвать хорошо заметную агглютинацию. При этом у кошек с группой крови В анти-А антитела имеются всегда в высоком титре, поэтому при любом раскладе переливание кошек групп А и В будет иметь весьма и весьма печальные последствия. Кошки с группой АВ не имеют антител ни к А, ни к В и потому являются универсальными реципиентами.

Переливание даже 1 миллилитра крови от донора с группой А вызывает острую и тяжелую трансфузионную реакцию у реципиента с группой В, вплоть до гибели. Жизнь донорских эритроцитов в таком случае исчисляется минутами. Переливание крови группы В реципиенту с группой А вызывает разрушение эритроцитов донора в течение 2 суток, при этом антитела к А, имеющиеся в донорской крови, также не добавляют здоровья реципиенту.

Как и в случае с любыми рецессивными признаками, генотип В/В чаще встречается у чистопородных животных, наиболее часто описан у турецких ван и ангорок, чуть реже у рексов и британских короткошерстных. Подавляющее большинство безродных мурок и васек имеют группу крови А (в разных странах от 70 до 100%).

Неонатальный изоэритролиз

Врожденное наличие антигрупповых антител делает для кошек актуальной еще одну проблему. Как и у всех млекопитающих, кишечник котят в первые несколько суток жизни способен поглощать в неизменном виде материнские антитела (а мать - соответственно выделять их в молозиво). Это особенно актуально для кошек с группой крови В, поскольку титр антигрупповых антител у них выше и шанс их успешного поглощения котятами больше. Котята с группой крови А или АВ в таком случае ощущают на себе все радости трансфузионной реакции, развивающейся уже в первые часы жизни. Н.И. считается наиболее частой причиной "синдрома угасания котят" в неонатальном периоде.

Система Mik
Недавно были описаны случаи несовместимости между кошками с совпадающими группами крови по АВ. Удалось установить, что некий фактор несовместимости не связан с антигенами А и В и, таким образом, является компонентом другой системы, которую назвали Mik, но больше о ней на сегодняшний день мало что известно.

Определение групп крови у кошек
Обязательно даже при первом переливании, желательно при планировании беременности у высокоценных племенных кошек. Существуют (и достаточно распространены) коммерческие наборы вот такого вида:

или такого:

При их отсутствии можно провести определение индивидуальной совместимости, но с оглядкой на "скрытность" некоторых кошек группы А (низкий титр антител делает разрушение эритроцитов донора не мгновенным).

Недавно натыкалась на полемику о возможности-невозможности в экстренных ситуациях переливать кошкам кровь животных других видов. Теоретически звучит заманчиво - антител к эритроцитарным антигенам других видов у кошек точно нет, да и с собаки (а то и человека?) крови можно скачать гораздо больше, чем из донора-кошки, но отсутствие более-менее внятных публикаций на эту тему, наверное, говорит само за себя. То, что не доказано - то не рекомендовано.

Далеко не все знают, что донорами могут быть не только люди, но и собаки с кошками. Это спасает жизни многим, но из-за незнания это явление распространено в России слабо и ощущается острая нехватка донорского материала.

Какая собака может стать донором?

Сдать кровь может собака 2-8 лет, от 20 кг, привитая и не имеющая заболеваний. Порода не имеет значения, а характер вполне может сыграть роль: уравновешенный и добрый нрав играют большую роль при прямом переливании. Забор проводят из вены на шее. После сдачи собаке нужна особенно питательная диета. Сдача крови абсолютно безболезненна и оставляет только еле заметный выстриженный пятачок на шее. Собака не может сама принять решение о донорстве, однако чаще всего помогать другим хотят те хозяева, которые сами когда-то пользовались донорством.

Какая кошка может стать донором?

Это домашнее животное с хорошим самочувствием, сделаны все прививки и последняя сдача была более месяца назад. Вес от 4 кг, возраст 1-8 (лучше 1-5) лет с покладистым характером и легко переносит визиты к врачам. После процедуры нужно давать много воды и жидкости для восполнения энергии.

Собачье донорство: необходимая дополнительная информация

Собачья кровь сильно отличается от человеческой: во-первых, не имеет резус-фактора, во-вторых, у нее не 4, а целых 12 групп! Правда, до конца исследованы и идентифицированы всего 8. Красные кровяные клетки (эритроциты) имеют на поверхности индивидуальный белок, так называемый групповой антиген. Если перелить такую кровь собаке с другой группой, то ее иммунитет воспримет антиген как инородное тело. Кстати, первый раз донорство с большой вероятностью будет удачным, потому что антитела еще не выработались. А в последующие разы уже нужно будет знать группу, чтобы избежать неприятных последствий. DEA - аббревиатура группового антигена.

Как определить группу крови у собак и кошек?

Сдать кровь натощак в ветклинике. У совсем маленьких щенков забор производят из пуповины.

Алгоритм определения группы крови у собак и кошек

Собаки . Анализы на наличие DEA 1.1. При обнаружении у собаки будет DEA 1.1. положительная ("+"), которая встречается у 45% собак, при отсутствии DEA 1.1 отрицательная ("-") 55%. Причем положительные - универсальные реципиенты (кому переливают), отрицательные - универсальные доноры, которым подходит только группа DEA 1.1 "-". Если вы хотите завести потомство от собаки, особенно выставочной, знание групп крови родителей очень важно. Если у мамы - DEA 1.1 "-", а у папы DEA 1.1 "+", детеныши могут умереть еще в утробе от анемии.

Кошки . У кошки всего 3 группы крови A - 95%, B < 5%,AB < 1% (малоизученная и очень редкая). Если при вязке у мамы B, а у папы - A, то потомство может родиться мертвым. Если котята родятся живыми, то примерно в месяц у них может отмереть кончик хвоста.

В каких случаях делают переливание крови?

Пулевые ранения

Операционные,послеродовые, желудочные и любые сильные кровотечения

В повседневную практику современных ветеринарных клиник прочно вошла и стала обычным делом процедура переливания крови - гемотрансфузия. Травмы, огнестрельные ранения, операционные и послеродовые кровотечения, тяжелые желудочно-кишечные кровотечения, отравления, последствия тяжело перенесенного пироплазмоза и множество других заболеваний, сопровождающихся анемией (малокровием) - все это состояния, которые без переливания крови могут закончиться летально. И до недавнего времени так оно и было. Став ежедневной рутинной процедурой, переливание крови спасло жизнь сотням животных. Но для того, чтобы, в случае необходимости, гемотрансфузия была проведена грамотно, без осложнений, связанных с переливанием несовместимой крови, каждый владелец собаки должен знать группу крови своего питомца.

Не секрет, что первое переливание крови в жизни собаки переносится легко в подавляющем большинстве случаев и не приводит к анафилактическим реакциям. Но, начиная со второго переливания, уже необходимо использовать донорскую кровь, совпадающую по основным, наиболее критичным факторам. Учитывая довольно широкое распространение гемотрансфузии на сегодняшний день, все чаще в клинику попадают животные, которые уже имеют в своем анамнезе переливания крови. А владельцам обязательно нужно помнить, что вторая и все последующие гемотрансфузии в жизни Вашего питомца уже будут небезопасны без определения группы крови.

Что же такое группа крови у собаки?

Начнем с того, что такое групповой антиген? Это вещество, а точнее - белок, который присутствует в крови данного организма (на поверхности каждого эритроцита), и который при попадании в другой организм воспринимается им как «чужой». При этом происходит иммунный ответ с выработкой антител. При повторном попадании «чужой» крови иммунный ответ настолько силен, что возникает прямая угроза здоровью и даже жизни пациента.

Группы крови людей и группы крови у собак - это не совсем одно и то же. У людей выделяют два основных (и несколько дополнительных, встречающихся редко) групповых антигена: А и В. Кроме того, у людей определяют еще резус-фактор, который тоже обладает антигенными свойствами, и который в крови человека либо есть, либо нет. Таким образом, у людей основных групп крови четыре: 0(I), А(II), В(III), АВ(IV), каждая из которых может быть резус-положительной или резус-отрицательной.

У собак резус-фактора нет, а групповых антигенов известно уже более десятка. Их фактическое число и роль в организме собаки, антигенные возможности и биологические свойства еще долго будут предметом изучения специалистов.

На сегодняшний день для известных групповых антигенов собак принято международное обозначение: DEA - Dog Erythrocyte Antigen. Отдельные антигены (или групповые факторы) обозначают цифрами: DEA 1.1, DEA 1.2, DEA 3, 4, 5 и т.д.

ДЛЯ УСПЕШНОЙ ГЕМОТРАНСФУЗИИ ВАЖНО ЗНАТЬ ФАКТОР DEA 1.1 !

Именно DEA 1.1 обладает сильнейшими антигенными свойствами, так как способен вызывать мощные иммунные реакции. Остальные групповые факторы собак на практике не ведут, в случае несовместимости, к таким тяжелым клиническим осложнениям.

Наша лаборатория имеет возможность определять фактор DEA 1.1. Он или есть в крови собаки (собака DEA 1.1 - положительная), или его нет (DEA 1.1 - отрицательная). Согласно европейской статистике, около 45% собак являются DEA 1.1 - положительными, остальные - отрицательными.

Собаки, положительные по DEA 1.1, являются универсальными реципиентами , то есть им можно переливать кровь любой другой собаки, но в идеале, от собаки DEA 1.1 + (уточним, что собака-донор должна быть абсолютно здоровой, и не иметь в анамнезе переливаний крови). Собака DEA 1.1 + может быть донором только для такой же, DEA 1.1 - положительной собаки.

Собаки, отрицательные по DEA 1.1, являются универсальными донорами , то есть их кровь можно переливать другим собакам, а им самим только такую же, DEA 1.1 - отрицательную кровь. Но опять же, в идеале, переливать кровь лучше от положительной собаки - положительной и от отрицательной - отрицательной.

Что будет, если отрицательной собаке перелить положительную кровь? Изначально в крови такой собаки антител к фактору DEA 1.1 нет, поэтому первое переливание практически всегда проходит успешно, без клинически выраженных иммунных реакций. Но такая собака на всю жизнь остается чувствительной к данному, чужому для нее, веществу, так как в ее крови образовалась «армия» соответствующих антител. Повторное переливание крови, если оно проводится наугад, без учета группы крови, может оказаться для этой собаки смертельным. И, кроме того, если такая собака - сука, то владельцам следует избегать вязок с DEA 1.1 - положительными кобелями, ведь часть ее потомства окажется положительными. А так как антитела матери легко проникают через плацентарный барьер к плодам, а также содержатся в молозиве, новорожденные щенки будут страдать гемолитической анемией и могут погибнуть, возможна также внутриутробная гибель плодов.

Итак, в определении группы крови нуждается каждая собака! И то, какой у нее фактор DEA 1.1: положительный или отрицательный, должно быть указано в ветеринарном паспорте. Ответственные владельцы собак беспокоятся о будущих потребностях своего питомца заранее!

Владельцы собак, отрицательных по DEA 1.1, помните: ваша собака может стать настоящим героем-спасителем для чьего-то любимца, ведь она - универсальный донор!

В комплексе лечения переливание крови имеет очень важное значение. В клинической практике гемотрансфузии применяют с заместительной целью (перелитые эритроциты находятся в крови реципиента 30-120 дней), стимулирующей целью (действует на различные функции животного организма), с целью улучшения гемодинамики (увеличивается ОЦК, усиливается работа сердца, повышается минутный объем сердца и т.д.), гемостатической целью (переливание крови оказывает стимулирующее действие на систему гемостаза реципиента, вызывая умеренную гиперкоагуляцию, обусловленную увеличением тромбопластической и снижением антикоагулянтной функции крови) (О.К. Гаврилов, 1982).

У собак имеется семь групп крови, определяемых по антигенной принадлежности: А, В, С, D, Е, F и G. Фактор А у животных имеет такое же значение, как и резус-фактор у людей. Этот фактор имеется примерно у 60-65% животных. Повторное переливание крови животному, у которого этого фактора нет, может привести к тяжелым гемотрансфузиологическим последствиям – гемолизу крови и гибели животного.

Первое переливание крови, как правило, не вызывает тяжелых осложнений из-за слабо выраженных антигенных свойств факторов В-G. Однако в некоторых случаях могут наблюдаться аллергические реакции в виде крапивницы, зуда и т.п., которые могут развиться сразу (ранняя реакция) и спустя несколько дней (поздняя реакция). Во избежание этих осложнений необходимо проводить пробы на групповую и индивидуальную совместимость. Для этого необходимо к 1 мл сыворотки реципиента добавить 0,1 мл эритроцитов донора. Реакция производится на стекле при температуре 22-25 0 С. учет осуществляют через 5 минут. При отсутствии агглютинации можно приступать к биологической пробе на индивидуальную совместимость.

Биологическая проба на индивидуальную совместимость проводится путем струйного переливания 10-15 мл крови в течение 3 минут крупным породам собак и 3-5 мл – мелким. Проба проводится трехкратно. При этом у животного, по возможности, измеряется артериальное давление, частота пульса, число дыхательных движений до переливания и через 10-15 минут после струйного введения крови. Беспокойство животного, одышка, тахикардия или аритмия, падение давления, рвота, появление болевых ощущений свидетельствуют о несовместимости переливаемой крови.

При переливании крови следует учитывать, что наиболее подходящей для гемотрансфузии является свежая донорская кровь. Заготовленная заранее кровь уже к 10 дню имеет кислую реакцию (рН до 6,0) и содержит калий в высоких концентрациях (до 8 ммоль/л), что может вызвать аритмию и даже остановку сердца. При переливании заранее заготовленной крови ее необходимо подогревать на водяной бане до температуры 37 0 С, т.к. холодная кровь вызывает гипотермию миокарда, спазм периферических сосудов и ацидоз, легко уходит в кровяное депо. На каждые 200-250 мл цитратной крови вводится 5 мл 10%-ного раствора хлористого кальция, 50 мл 40%-ного раствора глюкозы с 4 ед. инсулина и 20-30 мл 3%-го раствора соды (с целью нейтрализации гиперкалиемии и коррекции ацидоза) (А.А. Бунятян, 1982).

Заготавливая кровь, используют глюгицир (50 мл на 200 мл крови), или следующий состав:

Natrii citrici 2,2%

Ac. citrici 0,8%

Aq. destillatae 94,55%

Такой состав используется в количестве 15 мл на 100 мл крови (М. Закиевич, 1994). Кровь с консервантом можно хранить 21 день при температуре 4 0 С.

Забор крови от животного осуществляется путем венепункции толстой иглой и сливанием ее во флакон с приготовленным консервантом. Для предупреждения коагуляции крови в системе, последнюю необходимо предварительно промыть раствором гепарина или глюгициром, или ввести гепарин донору из расчета 100-200 ед. на 1 кг массы тела. Животному-донору предварительно вводят седативные препараты. Система для взятия крови не должна быть длиннее 25-30 см, т.к. кровь собак склонна к гиперкоагуляции и при большей длине трубки сворачивается в системе. Сосуд для сбора крови необходимо постоянно покачивать с целью перемешивания крови и консерванта.

Без ущерба для здоровья животного можно забирать кровь из расчета 10 мл/кг. Переливают кровь капельно с темпом 40-60 кап/мин из расчета 5-18 мл/кг в час. Повторный забор крови можно производить через 1,5-2 месяца.

При необходимости можно осуществлять заготовку трупной крови (от животных, погибших в результате травм). Заготовка крови в этом случае принципиально не отличается от описанной выше. Если забор крови производить из сердца, можно получить 80-90 мл на кг массы тела. Гепарин в этом случае вводится из расчета 120 ед/кг. Кровь от трупа можно забирать до 6 часов с момента гибели животного.

Для заготовки плазмы используют раствор следующего состава:

Ac. citrici 40.0

Ac. chlorici conc. 7 ml

Aq. destillatae 950 ml

На 900 мл крови добавляют 100 мл этого раствора. Кровь отстаивают в течение 1-2 часов, полученную плазму осторожно переливают в стерильные флаконы и запечатывают. При температуре –15 о С плазму можно сохранять в течение 2 лет. Плазма богата белком, переливание ее показано при острых нарушениях свертываемости крови, гипопротеинемии, интоксикации, для повышения коллоидно-осмотического давления крови.

В повседневной практике врачам довольно часто приходится сталкиваться с проведением различных трансфузиологических операций. Мы остановимся на некоторых из них, имеющих наибольшее значение в лечении больных животных.

Реинфузия крови – переливание крови, излившейся в плевральную или брюшную полости. Реинфузия крови является очень эффективной мерой лечения и предотвращает осложнения, связанные с переливанием донорской крови. Показанием для реинфузии является любая кровопотеря, допускающая использование излившейся в полости (плевральная, брюшная и т.д.) крови. Противопоказаниями являются: гнойное загрязнение излившейся крови, загрязнение излившейся крови мочой или кишечным содержимым, кровотечения, связанные с разрывом матки, почечная недостаточность.

Чаще всего врачу приходится иметь дело с реинфузией крови при разрывах легкого, печени, селезенки, внутрибрюшинных разрывов крупных сосудов. Наиболее простой способ сбора излившейся крови заключается в простом вычерпывании ее из полости ложкой или вымакивания марлей (последний способ значительно хуже, т.к. приводит к существенному разрушению эритроцитов). При сборе крови ее сливают в стерильный флакон с одним из стабилизаторов (глюгицир, цитрат натрия и др.), предварительно профильтровав ее через 4 слоя стерильной марли. После этого флакон закрывают и переливают кровь по обычной методике, осуществляя ее микрофильтрацию через фильтр системы для переливания крови.

Вторым способом забора крови для реинфузии является введение перфорированного трубочного дренажа в брюшную или плевральную полость посредством лапаро- или торакоцентеза. Такой способ позволяет собрать и реинфузировать кровь до оперативного вмешательства, что значительно снижает риск анестезиологического обеспечения, особенно при политравмах, сопровождающихся разрывом паренхиматозных органов и массивной кровопотерей. При эвакуации крови из брюшной полости необходимо убедиться в целостности мочевого пузыря (для этого его необходимо катетеризировать до выполнения лапароцентеза). Небольшие же повреждения кишечника, не сопровождающиеся массивным загрязнением собираемой крови, не являются противопоказанием к ее реинфузии (Е.А. Вагнер с соавт., 1977).

Внутрикостные трансфузии достаточны просты в исполнении, могут использоваться в тех случаях, когда внутривенное введение жидкостей затруднено (гнойные поражения кожи, массивные отеки конечностей и т.д.), а также у щенков и котят. Трансфузии осуществляются внутрикостным введением иглы с мандреном (костномозговая игла Кассирского) в эпифизы костей, крыло подвздошной кости. Перед введением иглы выбривают участок кожи, обрабатывают его как операционное поле (во избежание остеомиелита), прокалывают иглой кожу и подлежащие ткани до кости, затем, преодолевая костный кортикальный слой, получают ощущение "провала" иглы, удаляют мандрен, внутрикостно вводят 0,5-2 мл 2%-го раствора новокаина и проводят инфузию растворов под давлением. По окончании манипуляции кожу обрабатывают йодом и кубатолом.

Аутогемотрансфузия – переливание крови больному животному, взятой у него заблаговременно. Обычно такая необходимость возникает при повторном переливании крови, когда предполагается большая операция с массивной кровопотерей. У животного заблаговременно берут кровь (за 1-2 недели до предполагаемой операции), а затем ее же переливают во время оперативного вмешательства.

Реинфузия асцитической жидкости в сосудистое русло возможна у животных, больных циррозом печени, имеющих выраженный асцит, рефракторный к обычной диуретической терапии. Это позволяет избавиться от большого количества жидкости в брюшной полости, сохранив при этом белок, восстановить его уровень в плазме. Технически это выполняется следующим образом: после пункции брюшной полости асцитическую жидкость собирают в стерильный флакон, и тут же вводят ее внутривенно капельно со скоростью 10 мл/кг в час. За 1 сеанс можно реинфузировать от 10 до 30 мл/кг асцитической жидкости. Такие реинфузии могут проводиться 2-4 раза через 1-2 суток.

При острой кровопотере инфузионно-трансфузионная тактика зависит от количества излившейся крови.

Степень кровопотери	Общая потеря (от ОЦК), %	Общий объем вводимой жидкости (от объема кровопотери), %	Количество крови (от потери), %	Соотношение растворов
Степень кровопотери	Общая потеря (от ОЦК), %	Общий объем вводимой жидкости (от объема кровопотери), %	Количество крови (от потери), %	Солевые растворы	Коллоид. растворы
					1
					1
					2
Массивная		кровопотеря +300			3

Введение жидкостей должно осуществляться в две вены одновременно с введением крови.

При острых заболеваниях органов брюшной полости (перитонит, острая кишечная непроходимость) инфузионно-трансфузионная терапия должна проводиться в течение 1-2 часов перед оперативным вмешательством. При низком центральном венозном давлении, выраженной тахикардии объем вводимой жидкости может достигать 0,5 мл/кг/мин – в первый час и в дальнейшем зависит от показателя ЦВД. Интенсивная терапия должна продолжаться во время операции и в послеоперацинном периоде. Проведение интенсивной терапии в этих случаях должно быть направлено на устранение гиповолемии, коррекцию водно-электролитного баланса и КОС, дезинтоксикацию, восстановление реологических свойств крови.

George Lubas DVM Университет Пизы, Италия

Джордж Любас является доцентом по Сравнительной клинической гематологии Института специальной Патологии и Ветеринарной Клинической Медицины Университета Пизы, Италия.

Собаки редко обладают высоким титром естественно возникающих антител против эритроцитов.

Реакции на первое переливание крови у собаки являются редкими.

Доноры крови для собак должны по меньшей мере иметь негативную реакцию на DEA 1 антиген.

Кошки с группой крови В встречаются редко, но они очень часто имеют высокие уровни естественно возникающих антител к А-антигену.

Несовместимые трансфузии у кошек могут вызвать острые реакции.

При трансфузиях у кошек очень важно определить группы крови и выполнить перекрестные пробы на совместимость.

Лечение переливанием крови в ветеринарии за последние годы пережило быстрый рост, особенно у домашних животных, и некоторые исследования документально подтвердили его пользу при ряде гематологических заболеваний. Много обзоров было опубликовано по смежным темам: таким как группы крови у собак и кошек, иммуногематологичсские характеристики как у собак, так и у кошек: показания к переливанию крови; этические и клинические исследования, касающиеся животных-доноров; производство и хранение препаратов крови (1,3, 4, 6, 7) .

С тех пор как в 50-х годах были опубликованы первые исследования в этой области, у собак было определено несколько групп крови. Номенклатура групп крови отражает расхождение мнений нескольких авторов, участвовавших в этих исследованиях, и в настоящее время равнозначно применяются две различные классификации:

DEA = Эритроцитарный Антиген Собаки (напр. DEA 1).
Заглавная буква для системы и строчная отдельная буква для фактора (напр.. Са). Иногда прибавляется номер для подтипа (напр., Аа1).

Антигены различных групп крови распознаются специфическими антителами в результате прямых или непрямых реакции (т. с. антиглобулинового теста) агглютинации и гемолиза. Некоторые из этих реакций могут проходить только при определенных температурах (напр., 4°С, 25°С или 37°С). Распределение различных групп крови по породам не изучено в деталях, хотя и сообщалось, что грейхаунды имели очень низкую частоту проявления антигенов DEA 1.1 и 1.2 (2, 6, 9) (Таблица 1).

ТАБЛИЦА 1. Характеристики групп крови у собак

Номенклатура	Тип реакции для определения антител		Частота появления реакции у собак смешанных пород
	Агглюти нация	Антиглобулин

Выбранный метод; (+) = альтернативный метод; - = нет реакции.

Очень немногие группы крови определены как значимые для лечения трансфузией, хотя группы DEA 1.1, 1.2 и 7 являются наиболее распространенными антигенными факторами. У собак, как признано, естественно возникающие антитела являются очень редкими и, если они присутствуют в сыворотке, то в низких титрах или вступают в реакцию при температурах, отличных от температуры тела. На самом деле только около 15% собак демонстрируют естественно возникающие антитела к DEA 3, 4, 5 и 7. Появление таких естественно возникающих антител не следует путать с приобретенными антителами к группам крови. Первые нс связаны с каким-либо проявлением иммуностимуляции, в то время как при последних имеется мощная иммунная реакция, вызванная, например, переливанием несовместимой крови (2,6,9).

Именно вследствие этих иммуногематологических особенностей крайне редко встречается реакция на первую трансфузию при переливании собаке несовместимой крови (2,3,6,9).

Главная группа крови у кошек обозначается как АВ и состоит из трех типов крови. Ее серологические и антигенные характеристики показаны в Таблице 2 . Недавно была определена биохимическая структура групповых антигенов кошачьей крови. Они представляют собой гликолипиды и гликопротеины, которые отличаются компонентом нейраминовой кислоты (6-8).

ТАБЛИЦА 2. Характеристики системы группы крови АВ у кошки (2, 3, 7, 8)

Группа крови (фенотип) А- В- никогда не был найден.
пол. = положительная; отр. = отрицательная

Группа крови А представлена в основном в популяциях домашних коротко- и жесткошерстных кошек. Эти кошки очень редко имеют в своей сыворотке высокие уровни естественно возникающих антител. Напротив, кошки с группой крови В встречаются редко, зато очень часто имеют в сыворотке высокие уровни естественно возникающих антител к А-антигену. Заметные различия в частоте этих групп крови могут возникать в популяциях породистых кошек, где на распределение групп крови повлияли методы селективного разведения пород (Таблицы 3 и 4) (6-8).

ТАБЛИЦА 3. Система группы крови АВ у домашних короткошерстных и длинношерстных кошек (8)

	Число тестированных кошек	Группа А (%)	Группа В (%)


Финляндия

Германия

Голландия
Шотландия
Швейцария
Австралия

* Включают процент кошек А+ В+: Голландия =1%, Австралия =0,4% Япония =9,7%.

ТАБЛИЦА 4. Система группы крови АВ у некоторых породистых кошек (8)

	Число тестированных кошек	Группа А (%)	Группа В (%)
Абиссинская
Бирманская
Британская короткошерстная

Девонский Рекс
Гималайская
Персидская
Шотландский фолд
Сиамская
Сомалийская
Тонкинская
А- В-кошки никогда не были обнаружены.

Есть и практические последствия этих иммуногематологических особенностей у кошек: если переливается перекрестно-совместимая кровь, продолжительность жизни эритроцитов у реципиента составляет около 4-5 недель. Если же используется несовместимая кровь, то продолжительность жизни эритроцитов может упасть от нескольких часов до нескольких дней. Кроме того, несовместимые трансфузии могут вызвать острую реакцию, особенно тяжелую, если эритроциты группы крови А вводятся кошкам группы крови В даже в первый раз (6-8).

Переливание крови может быть полезным при некоторых гематологических заболеваниях. Основные показания, в порядке значимости и современного применения, следующие (3,4, 6-8):

Острая кровопотеря.
Острая гемолитическая анемия.
Невосстанавливающаяся анемия с гематокритом (PCV) между 12 и 15%.
Наследственная или приобретенная коагулопатия
Тромбоцитопения/патия
Лейкопения
Гипопротеинемия (при ограничениях для применения плазмы).

Параметры, которые подтверждают необходимость срочной трансфузии (3,4,6-8):

Быстрое уменьшение циркулирующего объема (< 30%)
PCV менее чем 20% или 15% (соответственно для собаки и кошки)
Непрерывное кровотечение или гемолиз
Плохая реакция на традиционное лечение
Бледные слизистые оболочки
Повышенное время заполнения капилляров (> 2 секунд).
Тахикардия
Тахипноэ

При оценке потребности в трансфузии клиницист должен принимать во внимание некоторые другие факторы (3,4,6-8):

Степень анемии и скорость кровопотери.
Реакцию костного мозга, определенную посредством подсчета ретикулоцитов в мазках периферической крови или аспиратах костного мозга.
Причину анемии, которая дала бы ценные прогностические указания.

При ветеринарии необходимо также принимать в расчет этику и закон о защите донора, оснащение соответствующими инструментами для сбора и введения крови. В конце концов не следует пренебрегать и экономическими соображениями относительно применяемых веществ и профессионального надзора над их введением (3, 6-S).

Совсем недавно более пристальное внимание стали уделять аутологичной трансфузии. Эта процедура исключает любую опасность неблагоприятной иммуногематологической реакции или передачи заболевания и может быть использована во время большой полостной операции. Кровь извлекается из полостей тела и повторно вводится в кровеносную систему с помощью соответствующих фильтровальных устройств. Также возможно взять кровь за 2-3 недели до ожидаемой операции, хранить ее соответствующим образом и, если это необходимо, вводить ее по ходу операции (3, 6,7).

Собака-донор должна соответствовать следующим требованиям (1,3, 5-7):

Вес свыше 25 кг.
Возраст от 2 до 8 лет.
Спокойный характер.
PCV выше40%.
Регулярная вакцинация против основных инфекционных болезней, таких, как чума, инфекционный гепатит, лептоспироз, парвовирусная инфекция и бешенство.
Клинически здорова (рекомендуется полный подсчет форменных элементов крови и исследование ее биохимического профиля).
Контроль на некоторые инфекционные заболевания в зависимости от географической местности (бабезиоз, лейшманиоз, эрлихиоз, боррелиоз, бруцеллез и дирофиляриатоз).
Исключаются группы крови DEA 1.1,1.2 (А) или DEA 7 (Тг), хотя есть сомнение, является ли DEA 7 значимым в реакциях на трансфузию.
Не должно быть естественно возникающих изоантител к эритроцитам в сыворотке.
Собаке должна быть сделана обычная коагулограмма, потому что донорская кровь может стать источником тромбоцитов и факторов коагуляции.

Кровь обычно берется из яремной вены асептическим способом (место взятия крови должно быть выстрижено и хирургически обработано). Взятое количество не должно превышать 20 мл/кг при максимальной частоте 1 раз в три недели. Постоянным донорам следует давать добавку железа в виде 10 мг/кг сульфата железа ежедневно. Рекомендуется применять коммерческие наборы для взятия крови, такие как пластиковые мешки из поливинилхлорида (PVC), предварительно наполненные цитратом фосфата декстрозы и аденином (CPDA-1) в соотношении 14 мл антикоагулянта на 100 мл крови. Кровь может храниться до 35 дней, если содержится при 4-6°С, или из нее могут быть приготовлены некоторые препараты крови. Сбор крови обычно производят непосредственным наполнением донорского мешка. При этом следят за равномерным смешиванием ее с антикоагулянтом. Ускоренное наполнение может быть достигнуто помещением мешка в вакуумную камеру (1, 3, 5-7).

Кошка-донор должна иметь следующие характеристики (3, 6-8):

Вес между 5 и 7 кг.
Возраст от 2 до 8 лет.
Кастрированная и со спокойным характером.
PCV выше35%.
Регулярно вакцинированная (кальцивироз, вирус герпеса панлейкопения, хламидиоз и бешенство).
Клинически здоровая и протестированная на Haemobartonellafelis и на вирусы лейкоза (FeLV), иммунодефицита (FIV) и инфекционного перитонита (FIP).

Рисунок 1 Набор инструментов для взятия и хранения крови человека, который может быть приспособлен и для собак. Он включает (1) входную трубку с иглой (обычно 18G), которая ведет к (2) мешку объемом 250 мл для цельной крови, обработанной 35 мл CPDA-1 в качестве антикоагулянта. Этот мешок имеет 2 выходных отверстия (3), (4) несколько алюминиевых герметизирующих колец, чтобы закрывать проводящую систему; (5) многофункциональный зажим, который дает возможность удалять кровь из донорской системы, герметик для обжатия алюминиевых колец и режущий инструмент, чтобы разрезать систему между герметиками; (6) стандартный набор для введения крови с наконечником для облегчения проникновения в мешок с кровью, фильтр для сгустков (обычно с порами 170-230 им в диаметре), капельницу, проводящую систему реципиента с адаптером иглы и зажимом для контроля потока.

Определение группы крови кошек-доноров позволяет, когда кровь необходима, быстро и правильно выбрать донора, если известна группа крови больного.

С целью обеспечения необходимой фиксации перед взятием крови кошку-донора подвергают анестезии или воздействуют на нее седативными препаратами. Во время взятия крови следует постоянно контролировать PCV, а кошка должна получать физиологический раствор в количествах в 2-3 раза больше объема взятой крови, который вводится либо внутривенно, либо внутрибрюшинно. Каждые 3 недели может быть взято до 11 мл крови на килограмм веса кошки-донора. Если собранная кровь должна быть немедленно перелита больному, рекомендуется использовать большие шприцы, содержащие одну часть 3,8% раствора цитрата натрия на 9 частей крови. Свертывания крови можно избежать путем обработки шприца 15 IU/ml гепарином. Однако, гепарин вызывает агрегацию тромбоцитов и подавляет факторы коагуляции (Рисунок 2) . В случае длительного хранения наилучшим антикоагулянтом, как описано выше, является CPDA-1 (3,6-8).

Существует по меньшей мере три разных пути получения доноров и соответственно донорской крови. Принятый подход будет зависеть от индивидуальных потребностей каждой ветеринарной практики (5,6,7). Следует помнить, однако, что использование животных в качестве доноров связано с этическими проблемами как для клинициста, так и для владельца животного, и на самом деле во многих странах является незаконным.

Преимущества:

Клинические. Легко выбрать донора, поскольку они имеют известный тип крови.
Заболевание. Животные полностью лишены возможности заболеть инфекционными болезнями, передаваемыми с кровью.
Отсутствие стресса. Животные испытывают минимальный стресс и беспокойство во время процедуры взятия крови, поскольку они привыкли к этому процессу.

Недостатки:

Этические. Животные используются исключительно с целью взятия крови. Забота о животном может быть направлена только на поддержание его здоровья и ограничена тем периодом, в который оно может быть использовано как донор. После этого срока должна быть сделана любая попытка для помещения его в приют для животных.
Финансовые. Значительные суммы тратятся на содержание и уход за донорами.

Местные владельцы животных предлагают своих любимцев для донорства на добровольной основе.

Преимущества:

Хозяева животных принимают непосредственное участие в программе.
У животных определяется тип крови, осуществляется ветеринарный контроль, включая обследования на заболевания, передаваемые с кровью.
Взятия крови являются менее частыми (раз в 2-3 месяца).

Недостатки:

Повышенная опасность переносимых с кровью инфекционных болезней, если кровь не проверяется при каждой сдаче.
Значительно повышаются расходы и происходят задержки в получении подходящей крови. Конечный продукт имеет укороченный срок хранения и является более дорогим.
Доноры потенциально могут испытывать неблагоприятные ощущения или стресс от процедуры взятия крови.

Многие практикующие врачи выбрали путь содержания животных-доноров, часто принадлежащих персоналу клиники, непосредственно в клинике или рядом с ней. Преимущества и недостатки этого подхода схожи с уже подчеркнутыми выше для общественных доноров. Кроме того, животные, постоянно находящиеся в клинике, имеют повышенный риск приобретения больничных инфекций. Зато кровь, собранная от этих доноров, почти всегда используется как свежая или консервированная цельная кровь, а не как ее обработанные компоненты.

В ветеринарии, в отличие от человеческой медицины, методы трансфузии и приготовления препаратов крови не развивались столь интенсивно и переливание цельной крови пока еще остается основным, принятым всюду методом. Однако, если у собак нередко примененяются препараты крови, то у кошек имеются ограничения, вызванные малым объемом крови, которая может быть собрана (1, 3-7). Производство компонентов крови ограничено необходимостью работы в асептических условиях и доступностью специализированного оборудования:

Рефрижераторной центрифуги.
Экстрактора плазмы.
Рефрижератора с постоянной температурой 4-6С.
Низкотемпературной камеры хранения с температурой ниже -20С.
Других запасных средств - таких как мешки для транспортировки плазмы (сухой), экстракторные пробирки, зажимы и герметики.

Свежая цельная кровь - самый легкий путь получения материала, пригодного для трансфузии. Поэтому она имеет самый широкий спектр клинического применения и показана при всех типах анемии, наследственной или приобретенной коагулопатии и нарушениях функции тромбоцитов. Поскольку цельная кровь является первичным источником трансфузии при очень небольшой практике для собак и предпочтительна для кошек, это делает излишним производство других препаратов из собранной крови.

Применение консервированной (до 30-35 дней) цельной крови, если она собрана с CPDA-1, ограничивается всеми типами анемии и не пригодно при гемостатической болезни (1,3-7).

Консервированные эритроциты (PRBCs) содержат большое количество клеточной жидкости, остающейся в первичном мешке для крови после того, как около 80% плазмы и CPDA-1 были асептически введены в мешок для транспортировки. Их приготавливают, помещая мешок в рефрижераторную центрифугу на 15 минут, при скорости вращения 5.000 g и температуре около 3-6°С. Герметично закрытые в мешке PRBCs сохраняют охлажденными при 3-6°С и применяют, пока не истечет срок годности (около 30 дней), не наступит обесцвечивание или какая-либо аномалия. Перед переливанием мешок необходимо согреть. Если для облегчения переливания потребуется развести содержимое, то следует добавить только хлористый натрий. PRBCs показаны для пополнения запаса эритроцитов (как, например, при состояниях хронической анемии) и особенно в ситуациях, когда у больного возникает риск перегрузки дополнительным объемом жидкости. PRBCs можно использовать в комбинации с кристаллоидами для лечения острой кровопотери.

Плазма представляет собой супернатант, и, как и PRBCs, готовится центрифугированием цельной крови собаки. Если плазму готовят с помощью рефрижераторной центрифуги, разделяют в течение б часов сбора и немедленно замораживают (-18°С или менее), то ее называют Свежезамороженной Плазмой (FFP) и используют для восстановления факторов свертывания, включая нестойкие компоненты. Срок хранения составляет 1 год при -40°С без утраты активности факторов свертывания. Плазму следует оттаивать при 30-37°С и вводить как можно скорее после оттаивания. Та плазма, которая была получена более чем через 6 часов после взятия крови или Свежезамороженная Плазма, неиспользованная в течение 24 часов после оттаивания или 1 года хранения, маркируется как Замороженная Плазма (FP). Она все еще обладает некоторыми факторами коагуляционной активности (напр., Фактором IX), но в основном используется как источник альбумина. Криопреципитат (СР) может быть приготовлен из FPP. Процедура состоит из продолжительного оттаивания, после чего супернатант удаляется в отдельный мешок. СР - компонент крови, богатый фибриногеном и FVIII, очень полезный для лечения гемофилии А и болезни фон Виллебранда. Остаточная плазма применяется и при других коагулопатиях, за исключением упомянутых выше, и в качестве источника альбумина (1,3-7) . В общем, плазма может быть получена и из цельной крови с CPDA-1 до истечения срока годности, но этот продукт имеет очень ограниченное применение и пригоден только в качестве источника альбумина.

Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) готовится в течение 6 часов после взятия крови путем мягкого центрифугирования (т. е. 2.000 g в течение 3 минут) резервуара цельной крови, собранной с CPDA-1. Супернатант переносят в дополнительный мешок, используя экстрактор плазмы. Срок хранения - до 3-х дней при 3-6°С и постоянном встряхивании (1,3-7).

Подбор донора - реципиента по группам крови (совместимость)

Окончательную уверенность в том, что эритроциты донора действительно подходят реципиенту и впоследствии будут эффективно выполнять функцию переносчика кислорода в организме могут дать только результаты перекрестной пробы. Эта процедура состоит из двух этапов (3, 4, 6-8).

Эритроциты донора (промытые три раза и взвешенные в 3-5% физ. растворе) приводятся в контакт с гепаринизированной плазмой или сывороткой крови реципиента (одна или две капли каждая). Более быстрая версия пробы, использующая мазки крови, менее пригодна, так как только сыворотка или плазма с высоким титром антиэритроцитарных антител будет демонстрировать агглютинацию или гемолиз (видимый уже через несколько минут) (Рисунок 3). При выполнении в лабораторных пробирках или на хороших платах тест занимает больше времени, зато позволяет определить низкий титр антиэритроцитарных антител при агглютинации или гемолизе (Рисунок 4-6). Такие реакции указывают на несовместимость групп крови донора и реципиента.

Рисунок 3 Метод приготовления четких слайдов, использованный для тестирования совместимости крови. Одна капля (50-100 мкл) сыворотки или гепаринизированной плазмы и одна капля 3-5% суспензии эритроцитов в физ. растворе помещаются на каждое предметное стекло. На слайде 1 можно видеть гемагглютинацию, на слайде 2 - отрицательную или контрольную реакцию и на слайде 3 - гемолиз.

Рисунок 5 Метод микротитровальных плат,использованный длятестирования совместимости крови, иллюстрирующий гемагглютинацию.25 ил сыворотки или гепаринизированной плазмы и 25 ил 3% суспензии эритроцитов в физ. растворе добавляются в каждую лунку. Микротитровальную плату затем помещают в термостат при 37С и результат реакции виден через 15 и 30 минут. Плата слегка наклоняется, позволяя небольшой массе осажденных на дне лунки эритроцитов подойти к "линии", указывающей на отрицательную реакцию (номера лунок А2; В1, 2, 3, 4, 5; Cl, 2, 3, 4. 5, 6, 7; D7). Положительные реакции наблюдают в тех лунках, где небольшая масса осадка эритроцитов в "полулунной "форме (агрегат) видна на нижней стороне лунки (номера лунок А), 3, 4, 5. 6, 7; В6, 7; DI, 2, 3, 4, 5, 6).

Рисунок 6 Метод микротитровальных плат, использованный для тестирования совместимости крови, иллюстрирующий гемолиз. 25 ил сыворотки или гепаринизированной плазмы и 25 ил 3% суспензии эритроцитов в физ. растворе добавляются в каждую лунку. Температура инкубации и время чтения реакции, как на Рисунке 5. Отрицательные реакции наблюдаются в лунках, где пока еще может быть видна осажденная эритроцитарная масса (номера лунок А1, 2, 3, 4, 5, 6, 7; С4, 5; D4, 5, 6, 7). Положительные реакции можно наблюдать в лунках с одинаковым розовым окрашиванием, где эритроцитарная масса исчезала вследствие гемолиза (номера лунок В1, 2, 3, 4, 5, 6, 7; Cl, 2, 3, 6, 7; DI, 2, 3).

Она идентична большой перекрестной пробе, но при проведении теста используются эритроциты от реципиента и сыворотка или гепаринизированная плазма от донора. В этой пробе та же иммунологическая позитивная реакция указывает на несовместимость групп крови донора и реципиента.

Перекрестная проба для собак, если позволяет время, должна быть выполнена при трех различных температурах 4°С, 25°С и 37°С или, по крайней мере, при 25°С. При проведении пробы в лабораторных пробирках мягкое центрифугирование (т. е. 1.000 g в течение 2 минут) после контакта промытых эритроцитов с сывороткой крови поможет демонстрации гемолиза (3, 4, 6, 7). Эта перекрестная проба обязательна для всех собак, которым ранее делали переливание, и для каждой кошки. Даже если группа крови реципиента и/или донора-кошки уже известна как АВ, здесь могут быть естественные или иммунные антитела, связанные с другими факторами группы крови, которые не были до сих пор хорошо определены у кошек (3,4,6-8).

Введение цельной крови или PRBCs реципиенту осуществляется внутривенным путем через мозговую либо яремную вены, при этом используют 20G иглу-бабочку или венозный катетер. Предварительно кровь должна быть согрета до комнатной температуры, которая не должна превышать 37С (Рисунок 7). Применение перистальтических насосов не рекомендуется из-за возможности чрезмерного гемолиза. Следует использовать для подачи крови набор с фильтром для профилактики введения мелких сгустков. Если рецепиент очень мал в размере или демонстрирует значительную гипотонию, то кровь можно также вводить через костный мозг в проксимальный конец бедренной или плечевой кости, где она абсорбируется со скоростью приблизительно одна капля в минуту (1,3, 6-8) (Рисунок 8).

Скорость внутривенной трансфузии цельной крови или PRBCs должна зависеть от клинического состояния реципиента. В первые 30 минут скорость вливания должна быть около 0,25 мл/кг; нормоволемическим больным кровь следует вводить со скоростью, не превышающей 5 мл крови на кг веса тела (ВТ) каждый час. Этот объем можно осторожно повышать: у гиповолемических особей - до 20 мл/кг ВТ/час; в то время как у больных, страдающих сердечно - сосудистой недостаточностью, отток следует снижать до 0,5-1,0 мл/кг ВТ/час (1,3, 4, 6-8).

Количество крови (мл), которое нужно перелить больному, может быть рассчитано по следующей формуле:

	(требуемый PCV - PCV реципиента)

где К является коэффициентом, связанным с объемом крови для каждого вида (88 для собак и 66 для кошек), ВТ - вес тела (в килограммах реципиента), и PCV донора определяется из расчета объема антикоагулянта. Для собак вместо примененного PCV в вышеупомянутой формуле можно ввести значение гемоглобина (Hgb) - в этом случае величина К снижается до 70. Проще говоря, введение 2 мл цельной крови или 1 мл PRBCs на кг ВТ повышает PCV реципиента на 1% (1, 3,4, 6-8).

Переливают различные виды препаратов плазмы, предварительно согретых до 37°С в водяной бане, используя комплект с проточным фильтром. В общем, окончательная дозировка составляет 6-10 мл/кг/час. При активном кровотечении, вызванном недостаточностью функции свертывания, предлагается 6-10 мл/кг ВТ FFP 2-3 раза в день в течение 3-5 дней, пока продолжается кровотечение. СР следует вводить в течение 6 часов со скоростью 12-20 мл/кг ВТ каждые 10-12 часов до полной остановки кровотечения (1, 3, 4, 6-8).

Осложнения трансфузии могут быть классифицированы как острые или замедленные и иммунные или неиммунные, но есть различия и между видами (3, 4, 6, 7). У собак, - из-за того, что они имеют низкое количество естественно возникающих антител, - острые реакции на трансфузию обычно вызваны сенсибилизацией вследствие ранее проведенной несовместимой трансфузии, особенно когда в реакции участвует DEA 1 антиген. На самом деле у реципиента, сенсибилизированного к DBA 1, трансфузированные эритроциты с позитивной реакцией на DEA 1 имеют очень короткое время циркуляции, исчезая из кровообращения примерно через 10 минут (3, 4, 6, 7).

У кошки кровь, несовместимая с АВ, вызывает серьезные гемолитические реакции из-за естественного появления аллоантител. Из-за более высокого титра антител к А-антигену у кошек типа В по сравнению с антителами к В-антигену у кошек типа А, трансфузии, несовместимые по АВ, вызывают более тяжелые реакции у кошек типа В, чем у кошек типа А (3, 4, 6-8).

У обоих видов острая иммунная реакция на трансфузию приводит к гемоглобинемии, гемоглобинурии, лейкоцитозу со сдвигом влево и к эритрофагоцитозу. Клинические проявления болезни: беспокойство, гипотония, слюнотечение, рвота, недержание кала и мочи и лихорадка. Шок, крапивница и смерть возникают намного реже. У здоровых собак были случаи обратимой нефропатии, у больных же собак результатом трансфузии может быть диссеминированная внутрисосудистая коагуляция и олигурическая почечная недостаточность. Подход к лечению последствий трансфузии в основном схож с лечением шока большим количеством кристаллоидных жидкостей, глюкокортикоидов и поддержанием экскреции мочи. Замедленная иммунная реакция на трансфузию, вызванная введеннием несовместимых RBCs (эритроцитов), индуцирует медленный гемолиз, приводящий к билирубинемии,билирубинурии и необъяснимому снижению PCV после трансфузии (3,4, 6, 7).

Острые неиммунологические реакции характеризуются главным образом лихорадкой. Они могут возникать вследствие бактериальной контаминации крови или реакции между антигеном и антителом, вовлекающей лимфоциты, гранулоциты или тромбоциты. Эта реакция может быть самокупирующейся или ее можно вылечить просто жаропонижающими или антибактериальными препаратами. Иногда возникает реакция типа крапивницы с эритемой, сыпью и зудом вследствие аллергической реакции на растворимый фактор в донорской крови (например, IgE или биоактивные амины) (Рисунок 9). В этом случае рекомендуется применять антигистаминные препараты. Возбуждение, рвота, кашель, тахикардия, одышка и цианоз - все это клинические признаки повышенной нагрузки на кровообращение, чего можно избежать соблюдением рекомендаций врача относительно дозы вводимой крови, медленным введением ее и применением консервированных эритроцитов (3, 4, 6, 7).

Однако, при трансфузии могут возникнуть и случайные малые осложнения. Например, случается интоксикация от цитрата, если большие количества консервированной крови вводятся быстро или обычно, но больному животному с нарушенной функцией печени. Иногда от хелации кальция возникает гипокальциемия, ее можно вылечить замедлением скорости вливания или, по необходимости, медленным внутривенным введением глюконата кальция. Гиперкалиемия, которая, как сообщалось, возникает после переливания крови у людей, не появляется у собак и кошек; потому что их эритроциты имеют более низкое содержание калия (3, 4, 6, 7).

Знание групп крови сделало возможным диагностику и профилактику феномена неонатального изоэритролиза -очень важного заболевания новорожденных, особенно у кошек. Неонатальный изоэритролиз, наряду с другими возможными причинами, рассматривают как ответственный за “Синдром Анемичного Котенка” - основную проблему в некоторых колониях кошек, вызванную высокой частотой группы крови В. Изоэритролиз новорожденных возникает, когда котята с группой крови А сосут молозиво у кошки с группой крови В, которая была спарена с котом группы крови А. Естественно возникающие антитела к А-анигену концентрируются в молозиве кошек группы крови В, и, поглощаемые котятами, абсорбируются и вступают в связь с их эритроцитами. Клинические симптомы включают анорексию, задержку роста, билирубинурию, желтуху, анемию и даже смерть, часто через несколько дней. Изоэритролиз новорожденных теперь может быть диагностирован у котят (Проба Кумбса, вероятно, окажется положительной) и вылечен всего лишь тем, чтобы в первые 24 часа после рождения отдать их на кормление другой кормящей кошке без специфических антител, направленных против эритроцитарных антигенов. Этого заболевания можно избежать и гемотипированием кошек до спаривания (3, 4, 6-8).

Изоэритролиз новорожденных случается и у собак, но гораздо реже по сравнению с кошками из-за отсутствия естественно возникающих изоантител в высоких титрах. Изоэритролиз новорожденных может возникать у щенков, рожденных от суки, которая до этого получила при трансфузии несовместимую кровь, содержащую DBA 1 антиген. Патогенез, симптомы и профилактические меры -те же, что и у кошек (3, 4, 6, 7).

Эритроциты

Антисыворотки

Характеристика естественных антител в сыворотке

Тип Частота Титр

Частота Антигена

редкая 1:2 ± 1:4 низкая

Высокая 1:128 высокая

АВ АВ/АВ пол.

Отсут. отсут.

Относительная простота систем групп крови у собак и низкая частота естественно возникающих изоантител у этого вида позволили ветеринарным врачам почти игнорировать несовместимость групп крови у больных, особенно при первой трансфузии. Желателен более тщательный выбор донора крови, который должен иметь отрицательную реакцию по меньшей мере на DEA 1. У кошки ситуация совсем другая, и неблагоприятные реакции могут возникнуть даже при первой трансфузии. Поэтому в лечении кошек важно определить группы крови и провести перекрестные пробы.

Другая проблема возникает при выборе донора, особенно из-за опасности передачи реципиенту разных болезней. Усилия исследователей направлены на производство безопасных препаратов крови и ее компонентов. В будущем для ветеринарного врача станут более доступными другие препараты и методы - такие, как аутотрансфузия, рекомбинантный FVIII, эритропоиэтин или другие факторы, стимулирующие колонии костного мозга, а также синтетические носители кислорода.

WALTHAM FOCUS VOL 6 NO 4 1996

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Authement, J. M., Wolfsheimer, К. J. and Catchings, S. (1987). Canine blood component therapy: product preparation, storage, and administration. Journal of the American Animal Hospital Association, 23: 483^93.

2. Bell, К. (1983). The blood groups of domestic mammals. Agar, N. S. and Board, P. G. (eds). Red Blood Cells of Domestic Mammals. Elsevier Science Publishers, Amsterdam, pp. 163-164.

3. Chabanne, L., Peyronnet, L., Fournel, C., Meyer, F. and Rigal, D. (1994). I gruppi sanguigni dei carnivori domestici. Trasfusioni e malattie emolitiche neonatali. Summa, 11: 5-17.

4. Cotter, S. M. (1991). Comparative transfusion medicine. Advances in Veterinary Science and Comparative Medicine, 36. Academic Press, San Diego, p. 343.

5. Dodds, W. J. (1993). Update on animal blood banking services. Veterinary Practice Staff, 5: 2-7.

6. Hohenhaus, A. E. (1992). Transfusion medicine. Problems in Veterinary Medicine, 4. J. B. Lippincott, Philadelphia, p. 670.

7. Kristensen, A. T. and Feldman, B. F. (1995). Blood banking and transfusion medicine. Ettinger, S. J. and Feldman, E. C. (eds). Textbook of Veterinary Internal Medicine. Diseases of the Dog and Cat. W. B. Saunders, Philadelphia, pp. 347-360.

8. Lubas, G. and Continanza, R. (1993). Recenti acquisizioni sulle caratteristiche immunoematologiche del gatto e relative applicazioni nella clinica. Veterinaria, 7: 5-11.

9. Swisher, S. N. and Young, L. E. (1961). The blood grouping systems of dogs. Physiology Reviews,

Понравилась статья? Поделитесь ей

Распечатать статью