Preparaciones inmunobiológicas

para el diagnóstico, prevención y

tratamiento de enfermedades infecciosas

Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L.A., Kuklina N.V., Sazanskaya A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V., Prokopyev V. .IN.

Firmado para impresión en papel Offset. Tirada: 500 ejemplares.

Impreso en la imprenta: :;

Institución educativa estatal de educación profesional superior Universidad Médica Estatal de Altai de la Agencia Federal para la Salud y el Desarrollo Social.

Preparaciones inmunobiológicas

para el diagnóstico, prevención y

tratamiento de enfermedades infecciosas

Un libro de texto para la autopreparación de los estudiantes para clases prácticas de microbiología.

Barnaúl, 2011

Revisores:

El libro de texto describe cuestiones teóricas relativas a la naturaleza y el uso de preparados inmunobiológicos (diagnósticos, terapéuticos y profilácticos): vacunas, sueros, bacteriófagos, etc.

Los estudiantes de las facultades de medicina (médica, pediátrica, odontológica) necesitan un estudio más profundo de los mecanismos de acción de los fármacos bacteriológicos, la respuesta del organismo a la introducción de vacunas y fármacos séricos, y las complicaciones que surgen al utilizar determinados fármacos.

Preparaciones inmunobiológicas para el diagnóstico, prevención y tratamiento de enfermedades infecciosas: Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L. .A., Kuklina N.V., Sazanskaya A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V. - Barnaul, 2002. - 46 p.

c) Universidad Médica Estatal de Altai, 2002

© Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L.A., Kuklina N.V., Sazanskaya

A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V., 2002

En la prevención, diagnóstico y tratamiento de enfermedades infecciosas, se utilizan ampliamente preparaciones inmunobiológicas, elaboradas a partir de microorganismos vivos y muertos (bacterias, rickettsias, virus), sus productos metabólicos (toxinas), así como antígenos de células microbianas individuales extraídos por diversos métodos. . También se utilizan sueros y gammaglobulinas e inmunoglobulinas específicas con fines terapéuticos y de diagnóstico. Además, las preparaciones de bacteriófagos se utilizan ampliamente con fines diagnósticos y terapéuticos.

La información sobre la composición, preparación y mecanismo de acción de los fármacos inmunobiológicos es necesaria para el médico en su actividad práctica. Al mismo tiempo, los médicos no siempre tienen la oportunidad de familiarizarse con las vacunas y los sueros de nueva creación y las características de su uso. Además, los libros de texto modernos no reflejan plenamente las cuestiones relacionadas con la preparación, el mecanismo de acción y el uso de fármacos inmunobiológicos.

Todo lo anterior generó la necesidad de crear un libro de texto que contenga información sobre fármacos inmunobiológicos. Este manual incluye información sobre la recepción, principio activo, uso de medicamentos inmunobiológicos y complicaciones que surgen al utilizar algunos de ellos. El manual tiene como objetivo preparar a los estudiantes de tercer año de las facultades de medicina, pediatría, odontología y medicina preventiva para clases prácticas de microbiología privadas.

Clasificación de preparaciones inmunobiológicas.

I.Fármacos de diagnóstico.

Preparaciones que contienen antígenos: diagnósticos, alérgenos, toxinas.

Preparaciones que contienen anticuerpos: sueros de diagnóstico.

Bacteriófagos diagnósticos.

• II. Fármacos terapéuticos y profilácticos.

Preparaciones que contienen antígenos - vacunas.

Preparaciones que contienen anticuerpos: sueros terapéuticos y gammaglobulinas e inmunoglobulinas.

Bacteriófagos.

Microbios antagonistas.

Interferones y otras citoquinas.

Sección I

Medicamentos de diagnóstico

Los medicamentos de diagnóstico se utilizan en el diagnóstico de laboratorio de una serie de enfermedades, cuyo diagnóstico preciso sólo puede realizarse con la ayuda de estudios bacteriológicos y virológicos. Además, los fármacos de diagnóstico son necesarios para confirmar mediante métodos de laboratorio el diagnóstico de una enfermedad que tiene un curso atípico o una enfermedad caracterizada por un polimorfismo de síntomas. Además, el diagnóstico de enfermedades que no se encuentran en una zona determinada y en un momento determinado debe confirmarse mediante métodos de laboratorio.

Las técnicas de diagnóstico microbiológico se utilizan ampliamente en el diagnóstico de enfermedades infecciosas. En este caso se utilizan métodos de diagnóstico bacteriológicos, virológicos, serológicos, alérgicos, inmunológicos, así como métodos de hibridación molecular y PCR. Para cada uno de estos métodos se requieren determinadas preparaciones inmunobiológicas de diagnóstico: diagnósticos, sueros de diagnóstico (especies, tipos, complejos, adsorbidos, etc.), complemento, alérgenos, bacteriófagos, sistemas para RIF y ELISA, sondas de ácido nucleico.

Clasificación de fármacos de diagnóstico.

1. Preparaciones que contienen anticuerpos - sueros de diagnóstico:

aglutinante;

precipitando;

antitóxico;

hemolítico;

antivírico;

luminiscente;

antiglobulina.

2. Preparados que contienen antígenos:

2.1) diagnóstico:

2.1.1.bacteriana;

2.1.2.eritrocitos;

2.1.3.virales;

2.2.) toxinas;

2.3.)alérgenos.

3. Bacteriófagos diagnósticos.

1. Sueros de diagnóstico

En el diagnóstico de enfermedades infecciosas, las reacciones inmunes se utilizan ampliamente para identificar microorganismos (bacterias y virus) o toxinas. Para realizar tales reacciones se requieren sueros de diagnóstico específicos.

1.1. Sueros aglutinantes.

Los sueros aglutinantes se obtienen inmunizando conejos con una suspensión de microorganismos muertos o sus antígenos, seguido de una extracción de sangre y preparación del suero. Los sueros aglutinantes se utilizan para identificar microorganismos en una reacción de aglutinación. La desventaja de tales sueros es que son capaces de producir reacciones de aglutinación grupal, porque contienen anticuerpos contra bacterias que tienen antígenos comunes. Por eso, hoy en día se utilizan la mayoría de sueros. adsorbido, Los sueros adsorbidos contienen solo anticuerpos típicos o específicos correspondientes a un tipo o tipo específico de antígeno. Para obtener dichos sueros, se utiliza el método Castellani: el método de adsorción. Este método consiste en agotar el suero de aglutininas del grupo saturándolo con bacterias heterogéneas relacionadas. En este caso, se produce la adsorción de anticuerpos grupales y los anticuerpos específicos permanecen en el suero. De esta manera, es posible obtener sueros monorreceptores: sueros que contienen anticuerpos contra un solo antígeno y sueros polivalentes que dan reacciones de aglutinación con dos o tres bacterias relacionadas que tienen un antígeno común. El título de un suero aglutinante es la dilución más alta a la que se produce la reacción de aglutinación.

Los sueros aglutinantes se utilizan ampliamente, por ejemplo, en el diagnóstico de enfermedades causadas por Escherichia, Salmonella y otros miembros de la familia Enterobacteriaceae.

1.2. Sueros precipitantes.

Los sueros precipitantes se obtienen inmunizando conejos con antígenos bacterianos, sus extractos y toxinas. El título del suero precipitante es la dilución máxima del antígeno a la que se produce la reacción de precipitación. Los sueros precipitantes se producen con un título alto, no menos de 1:100.000. Esto se debe al hecho de que el antígeno determinado en la reacción de precipitación tiene una estructura finamente dispersa y una unidad de volumen puede contener más anticuerpos que el mismo volumen de suero: anticuerpos.

Los sueros precipitantes específicos se utilizan en el diagnóstico de enfermedades infecciosas (ántrax, peste, tularemia, difteria, etc.), en exámenes médicos forenses para determinar el tipo de proteína, en la práctica sanitaria para detectar la conformidad de sustancias proteicas en productos (en caso de falsificación se sospecha).

La reacción de precipitación se puede realizar como una reacción de precipitación en anillo o una reacción de precipitación en gel.

1.3.Sueros hemolíticos.

Los sueros hemolíticos se obtienen inmunizando conejos con una suspensión de eritrocitos de oveja. El título sérico es la dilución máxima que, en presencia de complemento, provoca la hemólisis del 3% de una suspensión de glóbulos rojos de oveja. Los sueros hemolíticos se utilizan para la titulación del complemento y para realizar la reacción de fijación del complemento en el sistema indicador.

1.4. Sueros antivirales.

Los sueros inmunes antivirales se obtienen inmunizando a varios animales según el tipo de virus. Por ejemplo, el suero contra los adenovirus se obtiene inmunizando conejos, el suero contra el virus de la influenza se obtiene inmunizando hurones blancos, etc.

Los sueros antivirales de diagnóstico se utilizan para determinar el tipo o tipo de virus en RTGA, RSK., RN.

1.5.Sueros luminiscentes. Los sueros luminiscentes son sueros inmunes que contienen anticuerpos específicos marcados con tintes fluorescentes. Al preparar sueros luminiscentes, se añaden varios fluorocromos a la fracción de globulina del suero inmune mediante fuertes enlaces químicos. Los sueros luminiscentes se utilizan al realizar RIF.

1.6. Suero antiglobulina.

El suero antiglobulina (AGS) contiene anticuerpos contra inmunoglobulinas del suero humano o de conejo, según el suero inmunitario que se utilice en la reacción. La AGS se obtiene inmunizando animales con inmunoglobulinas humanas o de conejo. Estos sueros se utilizan para realizar RIF indirecto, reacción ELISA y reacción de Coombs.

Patogenesia.

A. Formación de complejos inmunes.Los complejos inmunes que consisten en un fármaco y un anticuerpo se unen de manera inespecífica a las membranas de los eritrocitos, seguido de la activación del complemento. Una prueba de Coombs directa con anticuerpos contra el complemento suele ser positiva y con anticuerpos contra IgG, negativa. Los anticuerpos contra el fármaco se pueden detectar incubando el suero del paciente con glóbulos rojos normales en presencia de complemento y el fármaco. La mayoría de los casos de anemia hemolítica inmunitaria inducida por fármacos son causados ​​por este mecanismo. La administración repetida del fármaco, incluso en pequeñas dosis, provoca hemólisis intravascular aguda, que se manifiesta por hemoglobinemia, hemoglobinuria e insuficiencia renal aguda.

b. Formación de anticuerpos citotóxicos.Cuando se une a los glóbulos rojos, el fármaco se vuelve inmunogénico y estimula la formación de anticuerpos, generalmente IgG. Sólo la prueba de Coombs directa con anticuerpos contra inmunoglobulinas es positiva. Los anticuerpos contra el fármaco se determinan de la siguiente manera. Después de incubar los glóbulos rojos normales con este medicamento, se mezclan con el suero del paciente. En presencia de anticuerpos contra el fármaco, se desarrolla hemólisis. Un ejemplo clásico de anemia hemolítica inmune causada por anticuerpos citotóxicos es la anemia causada por bencilpenicilina. Ocurre raramente y sólo cuando el medicamento se prescribe en dosis altas (más de 10 millones de unidades/día i.v.): la prueba de Coombs directa con anticuerpos contra inmunoglobulinas es positiva en aproximadamente el 3% de los pacientes, la hemólisis se desarrolla aún con menos frecuencia. La bencilpenicilina causa hemólisis extravascular. La aparición de IgG a la bencilpenicilina no está asociada con una alergia a las penicilinas causada por la IgE.

v. Algunos fármacos, como las cefalosporinas, provocan agregación de IgG inespecífica y complemento, aunque rara vez se acompaña de anemia hemolítica. Una prueba de Coombs directa puede ser positiva; una prueba de Coombs indirecta siempre es negativa.

GRAMO. Formación de autoanticuerpos.Los medicamentos pueden estimular la formación de autoanticuerpos contra los antígenos del sistema Rh. Probablemente esto se debe a la inhibición de la actividad de los supresores T y a la proliferación de clones de linfocitos B que producen los anticuerpos correspondientes. La prueba de Coombs directa con anticuerpos contra inmunoglobulinas es positiva. La incubación del suero del paciente con glóbulos rojos normales en ausencia de fármaco da como resultado la absorción de IgG en los glóbulos rojos. La síntesis de autoanticuerpos contra los glóbulos rojos es causada por metildopa, levodopa y ácido mefenámico. La prueba de Coombs directa es positiva en aproximadamente 15% de los pacientes que toman metildopa, pero se desarrolla anemia hemolítica en menos de 1% de los pacientes. El efecto de la metildopa sobre la formación de autoanticuerpos contra los glóbulos rojos parece depender de la dosis. La anemia se desarrolla gradualmente, durante varios meses de uso de drogas, y es causada por hemólisis extravascular.

2. Tratamiento.El primer paso y el más importante en el tratamiento de la anemia hemolítica inmunitaria inducida por fármacos es la interrupción del fármaco que la provocó. Con la hemólisis causada por complejos inmunes, la recuperación se produce rápidamente. En casos graves, se observa insuficiencia renal aguda. En la hemólisis causada por autoanticuerpos, la recuperación es más lenta (generalmente varias semanas). La prueba de Coombs puede seguir siendo positiva durante 1 o 2 años.

Artículo para el concurso “bio/mol/texto”: Uno de los peligros más importantes para la salud humana son las bacterias. Pero las bacterias también tienen oponentes: los virus bacteriófagos que utilizan la célula microbiana como un hotel de todo incluido y, al salir del refugio, a menudo matan al huésped. La invención del método de presentación en fagos hizo posible utilizar las propiedades de los bacteriófagos en la búsqueda de nuevos anticuerpos, que tienen una gran demanda para mejorar el diagnóstico y la terapia de muchas enfermedades peligrosas.

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Anticuerpos como medicamentos.

En farmacología se utilizan dos conceptos básicos: medicamento Y objetivo. Un objetivo es una estructura del cuerpo asociada con una función específica, cuya violación conduce a la enfermedad. En caso de enfermedad, se puede ejercer un cierto efecto sobre el objetivo, lo que debería conducir a un efecto terapéutico. Un fármaco es una sustancia que interactúa específicamente con un objetivo y afecta el estado de una célula, tejido u organismo. El objetivo puede ser un receptor en la superficie de la membrana celular, una enzima o un canal que transporta diversos compuestos al interior de la célula. Sin embargo, el camino hasta el consumidor de cualquier fármaco es largo: tras la confirmación de su actividad funcional, siguen las etapas de ensayos preclínicos y clínicos, durante las cuales las pequeñas moléculas corren el peligro de no convertirse nunca en un medicamento. Bajo la influencia de los sistemas enzimáticos del paciente, pueden volverse venenosos o sus isómeros resultan tóxicos. Una sustancia de bajo peso molecular puede excretarse demasiado rápido o, por el contrario, acumularse en el organismo, envenenándolo. Por lo tanto, en los últimos años, las macromoléculas han ocupado una proporción cada vez mayor del mercado de medicamentos, y entre ellas el papel más importante lo desempeñan anticuerpos- proteínas protectoras del cuerpo (Fig. 1).

Figura 1. Estructura del anticuerpo. El anticuerpo consta de dos pesados (HC) y dos pulmones (LC) cadenas de aminoácidos conectadas entre sí. Cada una de estas cadenas tiene un dominio variable. (VH o VL), que es responsable de la unión al antígeno. varia se llama blanco precisamente porque estas áreas difieren más fuertemente en diferentes anticuerpos, es decir, están representadas por muchos variar ntov. La región que es escindida por la enzima papaína se llama fragmento Fab.

Cuando un antígeno, un componente de una bacteria o un virus, ingresa al torrente sanguíneo, inmediatamente pasa a estar bajo la atención de dos tipos principales de células inmunitarias: Linfocitos T y B. Las células B, después de la estimulación por células T o tras el contacto directo con un agente extraño, sintetizan anticuerpos contra él. Algunos de los linfocitos B activados son células plasmáticas- se especializan en la producción de anticuerpos y el resto se convierte en células de memoria, para que cuando te encuentres con el mismo antígeno en el futuro, le des un rechazo rápido y eficaz. El anticuerpo sintetizado por la célula plasmática se une al "extraño" y lo neutraliza. Esto sucede de varias maneras: los anticuerpos se unen específicamente a áreas tóxicas del antígeno, se aglutinan (se pegan) con partículas grandes que transportan antígenos en su superficie o incluso provocan directamente la destrucción de la célula bacteriana. Además, el antígeno "cubierto" de anticuerpos se vuelve vulnerable a otros componentes del sistema inmunológico, por ejemplo, los macrófagos o el sistema del complemento.

Propiedades importantes como la unión del antígeno, la fuerza de esta unión y la estabilidad de la molécula dependen de la estructura del anticuerpo. Sin embargo, la naturaleza de la creación de anticuerpos en el cuerpo es muy compleja y nadie puede garantizar que se formen anticuerpos de la misma estructura en respuesta incluso a antígenos idénticos. Si se utilizan anticuerpos contra el mismo antígeno, pero con diferentes estructuras, para crear un medicamento o un kit de diagnóstico, entonces, debido a la diferencia en estabilidad y especificidad, se puede olvidar la estandarización y reproducibilidad de los resultados. Esto significa que dichos anticuerpos no pueden llegar a ser diagnósticos ni medicinales de ninguna manera. De ahí la conclusión: Se necesitan anticuerpos con estructura idéntica..

Los anticuerpos “clon” se obtienen mediante métodos de biología celular a partir de una única célula progenitora. Estos anticuerpos se llaman monoclonal. Su uso como agentes terapéuticos se ha convertido en un paso estratégico para la medicina al cambiar el concepto de tratamiento, desde una terapia inespecífica a una terapia dirigida. Hoy en día, los anticuerpos monoclonales se utilizan más activamente en oncohematología, tratamiento de tumores, enfermedades autoinmunes y, especialmente, en diagnóstico.

La obtención de anticuerpos para las necesidades humanas suele comenzar con la inmunización de los animales. Se administran varias inyecciones del antígeno y los anticuerpos específicos se acumulan en el suero sanguíneo. Estos anticuerpos, obtenidos directamente del suero de un animal inmunizado, son producidos por diferentes células plasmáticas, es decir, que policlonal. Para obtener anticuerpos monoclonales completamente idénticos, en los años setenta del siglo pasado, los científicos Georg Köhler y César Milstein desarrollaron método híbrido. Se basa en la fusión de linfocitos plasmáticos (producen anticuerpos, pero no viven en cultivo) y células de mieloma (son células tumorales que no producen nada, pero se cultivan de manera excelente), como resultado de lo cual se forma una célula híbrida de este tipo. hereda de un linfocito B la capacidad de secretar las sustancias que necesitan los investigadores, los anticuerpos, y de un tumor, la inmortalidad (división casi infinita).

El hibridoma fue un logro notable que abrió enormes oportunidades para los investigadores. Sin embargo, los anticuerpos que pueden obtenerse mediante el método del hibridoma todavía son producidos por animales y no son adecuados para la terapia humana. Por lo tanto, los investigadores se enfrentaron a la tarea de obtener anticuerpos completamente humanos. Para resolver este problema se desarrolló un grupo de métodos llamados mostrar. Lo que todos estos métodos tienen en común es que implican trabajar con el “enlace” de las secuencias de nucleótidos y aminoácidos de cada variante de anticuerpo específica. El nombre "display" proviene del inglés. mostrar- hacer alarde, demostrar. Una etapa integral de estos métodos es la "exposición" de fragmentos de anticuerpos en la superficie de la partícula del fago para una mayor selección de las variantes deseadas por parte de los antígenos.

Biblioteca in vitro

El método que fue nombrado. visualización de fagos , se basa en la capacidad de los bacteriófagos (virus que infectan bacterias) de exhibir secuencias peptídicas aleatorias en su superficie como parte de proteínas de superficie. Un bacteriófago está formado por ADN rodeado por una cubierta proteica (la cápside) y sólo puede reproducirse dentro de la célula huésped. Penetrando allí, utiliza descaradamente los sistemas enzimáticos de la desafortunada bacteria, proporcionándole su ADN para la síntesis de las proteínas necesarias para su reproducción. Una célula bacteriana infectada con un fago reproduce obedientemente todo lo que está codificado en el genoma del virus, de modo que su descendencia ensambla su caparazón a partir de bloques de construcción ya preparados. Si un investigador introduce una secuencia de nucleótidos que codifica el péptido deseado en el genoma del fago progenitor, su descendencia tendrá varias copias de una proteína de la cápside híbrida que consta de su propia cadena polipeptídica y aparecerá un fragmento de anticuerpo en la superficie de la partícula viral. . Un conjunto de bacteriófagos, en cuya superficie están presentes fragmentos aleatorios de anticuerpos, se denomina biblioteca de fagos(Figura 2).

Figura 2. Construcción de bibliotecas de anticuerpos sintéticos y naturales. La biblioteca se basa en las secuencias de nucleótidos de dominios variables de anticuerpos (inmunoglobulinas, Ig), naturales o sintéticos. A continuación, se combinan aleatoriamente y, como resultado, se forman muchos fragmentos de anticuerpos, a partir de los cuales se puede crear una biblioteca de fagos.

En las bibliotecas modernas, el repertorio de anticuerpos puede alcanzar los 10 mil millones de variantes únicas. ¿Cómo podemos seleccionar de esta variedad sólo unas pocas moléculas específicas de un único antígeno? En el caso de una biblioteca de visualización, las partículas virales actúan como "bibliotecas" y las células bacterianas se convierten en "lectoras". Si la búsqueda de libros en una biblioteca normal se realizara de la misma manera que la búsqueda de anticuerpos en una biblioteca de exposición, parecería muy inusual. Digamos que nos enfrentamos a la tarea de seleccionar todos los libros sobre un tema que nos interesa de una biblioteca que contiene 10 mil millones de libros: históricos, de ficción, cuentos de hadas, novelas románticas con cubiertas brillantes... Para buscar en la biblioteca de visualización, no es necesario que se confunda con las tarjetas y complete una solicitud, ¡y solo necesita traer este artículo con usted! Y luego los bibliotecarios (fagos) inmediatamente comenzarán a acercarse a él (el antígeno) con libros en la mano. Los libros específicos (anticuerpos) que están escritos únicamente sobre lo que trajimos con nosotros se "pegarán" firmemente al antígeno, y aquellos en los que se menciona el tema de pasada se pueden llevar fácilmente a la estantería. Una vez que se han encontrado las moléculas más específicas (libros) utilizando el antígeno (objeto), se transfieren a las bacterias "lectoras". Los “lectores” resultan ser tan concienzudos que no sólo perciben la información, sino que también la copian repetidamente. La selección de fagos con fragmentos de anticuerpos específicos de antígeno se llama selección(Figura 3).

Figura 3. Esquema de selección. La creación de una biblioteca de fagos a partir de una fuente sintética o natural implica la formación de estructuras que combinan secuencias de nucleótidos y aminoácidos de un fragmento de anticuerpo. genotipo-fenotipo-estructura). Luego se pone en contacto el antígeno (vinculado al plástico de la biblioteca de presentación), que se une específicamente a ciertos fragmentos de anticuerpo expuestos en la partícula del fago.

Por lo general, se llevan a cabo de 3 a 4 rondas de selección, como resultado de las cuales se selecciona el ADN de un número relativamente pequeño de fagos y, sobre esta base, se producen fragmentos de anticuerpos en células bacterianas para su posterior análisis. Por fuente de material Las bibliotecas de visualización se pueden dividir en tres grupos.

Cada uno de los tipos de bibliotecas enumerados tiene sus propias ventajas y desventajas. Por ejemplo, las bibliotecas sintéticas se basan en una pequeña cantidad de estructuras de dominios variables de anticuerpos, por lo que es mucho más fácil trabajar con ellas que con las naturales, que contienen secuencias que son diversas en características termodinámicas y de expresión. Pero cuando se utilizan variantes de bibliotecas naturales, la probabilidad de desarrollar una respuesta inmune es menor.

Las moléculas así obtenidas pueden sufrir cambios, mejorando sus propiedades. Además, se pueden crear una variedad de agentes terapéuticos a partir del mismo fragmento de anticuerpo. Dependiendo del propósito de la terapia, puede asociarse con una toxina (por ejemplo, para combatir un tumor), con una citoquina (para su administración dirigida a un punto dolorido) o con otro fragmento auxiliar, incluso con un radionúclido.

El éxito de la farmacología moderna depende en gran medida del desarrollo de campos de la ciencia como la biología molecular, la bioinformática y la ingeniería genética. Gracias a estas disciplinas, fue posible sintetizar las secuencias de ADN deseadas, combinarlas y modificarlas, así como obtener proteínas animales en sistemas bacterianos. La ventaja indudable de las tecnologías modernas es que con su ayuda es posible no sólo obtener análogos de anticuerpos existentes, sino también crear otros completamente nuevos.

¡Es demasiado pronto para celebrar la victoria!

A pesar de todas las ventajas de los anticuerpos sobre las moléculas pequeñas, han surgido problemas con su uso. En 2004, se descubrió que en varios casos la toma de infliximab (Remicade), un anticuerpo monoclonal antiinflamatorio, se asociaba con el desarrollo de linfomas en los pacientes. En mayo de 2006, en el Journal of the American Medical Association ( JAMA) publicaron datos de que Remicade aumenta tres veces el riesgo de desarrollar cáncer. En junio de 2008, la FDA informó que Remicade puede estar asociado con el desarrollo de linfomas y otros tipos de tumores en niños y adolescentes.

Se encontró un mayor riesgo de muerte en pacientes con cáncer cuando tomaban Avastin (2,5%) - un bloqueador del factor de crecimiento endotelial (VEGF) - en comparación con el uso de quimioterapia sola (1,7%). El hecho es que Avastin (bevacizumab) en sí no interactúa con las células cancerosas. Bloquea el factor de crecimiento endotelial (células que recubren los vasos sanguíneos), que el tumor secreta para crear más vasos sanguíneos a su alrededor para una nutrición intensiva. El tumor secreta el mismo VEGF que otras partes sanas del cuerpo, por lo que es inevitable bloquear el crecimiento de una cierta proporción de vasos sanguíneos que necesita el cuerpo (por ejemplo, vasos sanguíneos para alimentar el corazón). Así, en el caso de Avastin, el aumento de la mortalidad de los pacientes no se asocia con la enfermedad subyacente, sino con la insuficiencia cardíaca.

El desarrollo de tales efectos secundarios es predecible. Un organismo vivo es un sistema muy complejo y la intervención dirigida a una parte del mismo implica cambios en otras. Por lo tanto, incluso con la llegada de una herramienta tan sutil como los anticuerpos terapéuticos, no podemos hablar de la invención de un "fármaco ideal".

Los protocolos actuales ya se basan en un enfoque de tratamiento combinado, que incluye vacunas, quimioterapia y anticuerpos monoclonales. Los investigadores aún tienen que desarrollar medicamentos y regímenes de tratamiento que proporcionen y seguro tratamiento de los pacientes.

Dibujos proporcionados por la empresa biofarmacéutica rusa Anterix.

Literatura

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4. Ivánov a.a. y Beletsky I.P. (2011). Terapia con anticuerpos monoclonales: ¿panacea o paliativo? remedio. 3 , 12–16..

· Sueros curativos.

· Inmunoglobulinas.

· Gammaglobulinas.

· Preparaciones de plasma.

Existen dos fuentes para la obtención de preparados de suero específicos:

1) hiperinmunización de animales (preparaciones de suero heterólogo);

2) vacunación de donantes (medicamentos homólogos).

2.1. Preparaciones de sueros heterólogos.

Para la producción de preparados de suero heterólogos se utilizan principalmente animales grandes, como los caballos. Los caballos tienen una alta reactividad inmunológica;
En muy poco tiempo, se puede obtener suero que contiene anticuerpos con títulos elevados. Además, la introducción de proteína de caballo en humanos produce el menor número de reacciones adversas. Rara vez se utilizan animales de otras especies. Apto para uso a partir de los 3 años.
y los animales superiores están sujetos a hiperinmunización, es decir. el proceso de administración repetida de dosis crecientes de antígeno para acumular la cantidad máxima de anticuerpos en la sangre de los animales y mantenerla en un nivel suficiente durante el mayor tiempo posible. Durante el período de aumento máximo en el título de anticuerpos específicos en la sangre de los animales, se realizan 2-3 sangrías con un intervalo de 2 días. La sangre se extrae a razón de 1 litro por 50 kg de peso del caballo de la vena yugular a un frasco esterilizado que contiene un anticoagulante. La sangre obtenida de caballos productores se transfiere al laboratorio para su posterior procesamiento. El plasma se separa de los elementos formados en separadores y se desfibrina con una solución de cloruro de calcio. Usar
El uso de suero entero heterólogo se acompaña de reacciones alérgicas en forma de enfermedad del suero y anafilaxia. Una forma de reducir las reacciones adversas de los fármacos séricos, así como de aumentar su eficacia, es purificarlos y concentrarlos. El suero se purifica a partir de albúminas y algunas globulinas, que no son fracciones inmunológicamente activas de las proteínas del suero. A esta fracción pertenecen las pseudoglobulinas con movilidad electroforética entre gamma y beta globulinas, inmunológicamente activas. Además, las fracciones inmunológicamente activas incluyen gammaglobulinas; esta fracción incluye anticuerpos antibacterianos y antivirales. La purificación de sueros a partir de proteínas de lastre se realiza mediante el método Diaferm-3. Cuando se utiliza este método, el suero se purifica mediante precipitación bajo la influencia de sulfato de amonio y mediante digestión péptica. Además del método Diaferm 3, se han desarrollado otros (Ultraferm, Alcoholferm, inmunosorción, etc.) que tienen un uso limitado.

El contenido de antitoxina en los sueros antitóxicos se expresa en unidades internacionales (UI) adoptadas por la OMS. Por ejemplo, 1 UI de suero de toxina tetánica corresponde a la cantidad mínima de suero que neutraliza 1000 dosis letales mínimas (DLm) de toxina tetánica para un cobaya de 350 g. 1 UI de antitoxina botulínica es la cantidad más pequeña de suero que neutraliza 10.000 DLm. de toxina botulínica para un ratón de 20 g corresponde a su cantidad mínima neutralizando 100 DLm de toxina diftérica para un cobaya de 250 g.

En las preparaciones de inmunoglobulinas, la IgG es el componente principal (hasta un 97%). LgA, IgM, IgD se incluyen en el medicamento en cantidades muy pequeñas. También se producen preparaciones de inmunoglobulinas (IgG) enriquecidas con IgM e IgA. La actividad del fármaco inmunoglobulina se expresa en el título de anticuerpos específicos, determinado por una de las reacciones serológicas y se indica en las instrucciones de uso del fármaco.

Las preparaciones de suero heterólogo se utilizan para el tratamiento y prevención de enfermedades infecciosas causadas por bacterias, sus toxinas y virus. El uso temprano y oportuno del suero puede prevenir el desarrollo de la enfermedad, se prolonga el período de incubación, la enfermedad emergente tiene un curso más leve y se reduce la mortalidad.

Una desventaja importante del uso de preparaciones de suero heterólogas es la aparición de sensibilización del cuerpo a una proteína extraña. Como señalan los investigadores, más del 10% de la población rusa está sensibilizada a las globulinas séricas de caballo. En este sentido, la administración repetida de fármacos séricos heterólogos puede ir acompañada de complicaciones en forma de diversas reacciones alérgicas, la más peligrosa de las cuales es el shock anafiláctico. Para identificar la sensibilidad del paciente a la proteína de caballo, se realiza una prueba intradérmica con suero de caballo diluido 1:100, especialmente preparado para este fin. Antes de administrar el suero terapéutico, se inyectan por vía intradérmica 0,1 ml de suero de caballo diluido en la superficie flexora del antebrazo y se observa la reacción durante 20 minutos.

2.2. Preparaciones de sueros homólogos a partir de sangre de donante.

Las preparaciones de suero homólogo se obtienen de la sangre de donantes especialmente inmunizados contra un patógeno específico o sus toxinas. Cuando estos medicamentos se introducen en el cuerpo humano, los anticuerpos circulan en el cuerpo un poco más de tiempo, lo que proporciona inmunidad pasiva o un efecto terapéutico durante 4 a 5 semanas. Actualmente se utilizan inmunoglobulinas de donante normales y específicas y plasma de donante. El aislamiento de fracciones inmunológicamente activas a partir de sueros de donantes se realiza mediante el método de precipitación con alcohol.

Las inmunoglobulinas homólogas son prácticamente areactógenas, por lo que rara vez se producen reacciones de tipo anafiláctico con la administración repetida de fármacos séricos homólogos.

2.3. Preparados para terapia bacteriana (eubióticos).

Los preparados para la terapia bacteriana contienen cepas de bacterias vivas y antagónicamente activas, representantes de la microflora normal. Ejemplos de tales fármacos son lactobacterina, bifidumbacterina, colibacterina, bificol, bactisubtil, etc. Los microorganismos contenidos en dichos fármacos tienen propiedades antagonistas de diversos microorganismos, principalmente microbios intestinales patógenos. Dichas preparaciones se obtienen cultivando los microorganismos correspondientes o sus esporas en medios nutritivos líquidos y luego secándolos al vacío desde un estado congelado. Los medicamentos se usan para tratar la disbiosis.

2.4 Preparaciones de bacteriófagos terapéuticos.

Los bacteriófagos son virus de bacterias. Penetran en la célula bacteriana, se multiplican en ella y la lisan. Ésta es la base de su uso para el tratamiento y prevención de enfermedades infecciosas. La acción de los bacteriófagos es estrictamente específica y se manifiesta en relación con determinadas especies y tipos de patógenos.

Para obtener preparaciones de bacteriófagos se utilizan cepas de fagos industriales y los correspondientes cultivos bacterianos. Un cultivo bacteriano cultivado en reactores con un medio nutritivo líquido se infecta con una suspensión madre del fago. Durante la reproducción, los fagos lisan las bacterias y se liberan en el medio nutritivo; esta composición se llama fagolizado. El medio nutritivo se pasa a través de filtros bacterianos para eliminar los restos de células bacterianas (filtrado de fagolizado). El filtrado con bacteriófagos se conserva y se controla su esterilidad, inocuidad y actividad. El producto terminado, que es un líquido amarillo transparente, se envasa en botellas. Junto con el líquido, se producen fagos secos en tabletas con una capa resistente a los ácidos y supositorios con fagos.

Los fagos se utilizan con fines terapéuticos y profilácticos. En nuestro país se elaboran preparados para salmonelosis, disentería, coliproteus, estafilococos, piófagos, etc. Dependiendo de la enfermedad, los fagos se utilizan localmente en forma de irrigaciones, enjuagues, lociones, taponamientos, para su introducción en la cavidad de heridas, abdominales. , pleural, etc. cavidades, por vía oral, así como por vía subcutánea, intradérmica e intramuscular. .

2.5 Preparaciones de citocinas.

Las citoquinas son sustancias producidas por diversas células del cuerpo y tienen un efecto inmunoestimulante inespecífico. Las citoquinas son muy numerosas y diversas, difieren en sus mecanismos de acción, mientras normalizan factores humorales y celulares de resistencia inespecífica e influyen en diferentes etapas y componentes de la inmunidad. Las citocinas se pueden utilizar como adyuvantes en vacunas y como fármacos independientes.

3. Efectos secundarios de las vacunas y sueros y medidas para prevenirlos

El uso de medicamentos inmunobiológicos y, sobre todo, vacunas y sueros, junto con el desarrollo de la inmunidad, pueden tener efectos inespecíficos en el organismo, que pueden ir acompañados de procesos patológicos que en ocasiones ponen en peligro la vida humana. Los procesos patológicos que ocurren después de la administración de fármacos inmunobiológicos, según el esquema de S.G. Dzagurova, se dividen en los siguientes grupos:

1) complicaciones asociadas con la violación de la técnica de administración del medicamento, las reglas asépticas durante la administración del medicamento, lo que conduce al desarrollo de supuración, infiltrados subcutáneos y abscesos en el lugar de la inyección;

2) complicaciones alérgicas por la administración de fármacos inmunobiológicos (enfermedad del suero, shock anafiláctico, etc.);

3) complicaciones debidas a reacciones individuales, principalmente del sistema nervioso central.

El papel principal en la génesis de las complicaciones posvacunación pertenece a los procesos alérgicos. Las complicaciones posvacunación más graves al administrar fármacos inmunobiológicos incluyen las siguientes:

1) shock anafiláctico. Se desarrolla con mayor frecuencia con la administración parenteral repetida de sueros y vacunas. Se refiere a una reacción alérgica general de tipo inmediato. La gravedad de los síntomas del shock puede variar, desde manifestaciones leves hasta formas fatales fulminantes. Para identificar sensibilización a un suero heterogéneo, antes de su administración se requiere una prueba cutánea con suero de caballo diluido 1:100. En caso de reacción alérgica grave y estado grave del paciente, se permite administrar el suero después de la administración intravenosa de prednisolona;

2) shock de endotoxinas. Observado después de la administración de vacunas de bacterias muertas, como manifestación de una mayor sensibilidad del cuerpo a las endotoxinas;

3) enfermedad del suero. Es una manifestación de una reacción alérgica del cuerpo a la introducción de una proteína extraña, generalmente proteína de caballo. Los síntomas de la enfermedad del suero aparecen entre 7 y 10 días después de la administración de medicamentos séricos, pero pueden ocurrir en fechas anteriores o posteriores;

4) reacciones alérgicas de la piel. Ocurre con mayor frecuencia después de la administración de DPT, rabia y otras vacunas;

5) complicaciones neurológicas posvacunación. Se manifiestan en forma de daño al sistema nervioso central y periférico.

En la prevención de todas las complicaciones descritas anteriormente, se concede una importancia crucial a la identificación de condiciones que son una contraindicación para la introducción de fármacos inmunobiológicos en el organismo.