Морфология сперматозоидов и эякулята. Критерии оценки, анализ. Проблемы с простатой. Подготовка к анализу
Смотрите также:
- БЕХТЕРЕВ , Владимир Михайлович(1857- 1927), всемирно-известный невропатолог и психиатр. Родился в Вятской губ. В 1878 г. блестяще окончил Медико-хирургич. академию и был оставлен при ней в штате институтских врачей для подготовки...
- БЕХТЕРЕВА БОЛЕЗНЬ , см. Спондилёзы.
- БЕХТЕРЕВА МИКСТУРА , Infusi Adoni-dis vernalis 4,0 - 6,0: 200,0, Kalii bromati 10,0-12,0, Codeini 0,2 (4-5 столовых ложек в день). Микстура применяется при лечении эпилепсии. ...
- БЕХТЕРЕВА ПРИБОРЫ . Алгезиметр, прибор для точного измерения болевой чувствительности; раздражение производится иглой, выталкиваемой.из прибора пружиной; длина иглы меняется при помощи микрометрического винта, вследствие чего степень раздражения находится в прямой зависимости от...
- БЕХТЕРЕВА ЯДРО (nucl. angularis), принадлежит к вестибулярной системе, расположено по дну IV желудочка, в нижней половине Варолиева моста, у его наружного угла, кнутри от верхних ножек мозжечка. В нем заканчиваются восходящие ветви...
Основным анализом для мужчин, желающих определить причину бесплодия, является спермограмма. Показатели этого анализа могут указывать на различные проблемы, которые влияют на возможность зачатия здорового ребенка. Для получения достоверных результатов требуется правильно подготовиться к спермограмме и соблюдать рекомендации ее сдачи.
При стандартном способе проведения анализа возможно обнаружение круглых клеток. Что это значит и как должно быть в норме?
Значение клеток округлых форм
Чтобы рассмотреть подобные элементы в образце спермы, нужно, чтобы лаборатория была оснащена хорошими микроскопами. Также не обойтись без работы высококвалифицированных специалистов.
Чаще всего округлые клетки в спермограмме – это:
- Лейкоциты. Их наличие в результате анализа имеет особое значение. Исходя из количества лейкоцитов в образце, можно выявить наличие воспалительных процессов в мочеполовых органах. Это также может указывать на развитие опухоли. Если количество таких клеток превышает норму, то у мужчины подозревают развитие таких патологий, как лейкоспермия (влияет на снижение активности сперматозоидов) и пиоспермия (присутствие гноя при тяжелых воспалительных заболеваниях);
- Макрофаги. Эти клетки могут быть двух видов:
- обычные – иммунные элементы, которые в норме могут содержаться в сперме. Основная функция таких клеток заключается в «съедании» патологического агента. Если такие круглые клетки в спермограмме повышены, то, скорее всего, развивается инфекционный процесс;
- спермиофаги «съедают» сперматозоидов. Если с помощью хорошего микроскопа рассмотреть эту клетку, то можно увидеть «съеденного» сперматозоида, его хвост будет торчать снаружи;
- Несозревшие сперматозоиды. Клетки сперматогенеза в спермограмме впоследствии становятся половозрелыми клетками, которые могут отличаться размерами и морфологическими особенностями. Такие сперматозоиды в норме могут содержаться в сперме, только важно, чтобы их количество было в пределах нормы;
- Эпителиальные клетки в спермограмме. Что это и как они себя ведут? В норме эти клетки также могут содержаться в образце спермы. Они попадают туда за счет:
- отслойки плоского ороговевшего эпителия головки и крайней плоти;
- отслоения неороговевшего слоя ладьевидной ямки, участвующей в процессе формирования мочеиспускательной струи;
- отхождение цилиндрического эпителия, который покрывает уретру. Форма клеток имеет округлый и немного вытянутый вид, на конце имеется хвостик;
- обнаружение клетки эпителия в спермограмме может быть за счет ее отслоения из выстилающего эпителия уретры. Под микроскопом такие клетки имеют округлую и немного мятую форму.
Микроскопическое исследование эякулята проводят после полного разжижения материала.
Оно включает:
изучение в нативном препарате подвижности сперматозоидов (кинезиограмма), наличия агглютинации или агрегации;
подсчет количества сперматозоидов, лейкоцитов и клеток сперматогенеза в камере Горяева;
дифференциальную диагностику живых и мертвых сперматозоидов;
изучение морфологии сперматозоидов, клеток сперматогенеза, лейкоцитов и эпителия в окрашенных препаратах;
обнаружение в этих препаратах простейших;
обнаружение в препаратах, окрашенных по Граму, грамотрицательных диплококков (Gn).
Согласно рекомендациям ВОЗ, микроскопическое исследование эякулята следует проводить в два этапа. На первом этапе оценивают концентрацию, подвижность и агглютинацию сперматозоидов, а также наличие других клеточных элементов.
Исследование проводят на неокрашенных мазках простой световой микроскопией или с помощью фазово-контрастного микроскопа.
На втором этапе исследование проводят на окрашенных препаратах, оценивают жизнеспособность сперматозоидов, определяют их концентрацию, проводят морфологическую классификацию и выявляют наличие антиспермальных антител. Дополнительные исследования сперматозоидов включают: определение индексов множественных дефектов сперматозоидов, тест на гипоосмотическое набухание, посев эякулята и биохимический анализ функций придаточных половых желез.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ НАТИВНОГО ПРЕПАРАТА
На предметное стекло, предварительно согретое до температуры хранения эякулята, полуавтоматической пипеткой с наконечником разового использования наносят каплю тщательно размешанного эякулята. Для создания тонкого слоя объем капли должен быть фиксированным (10 мкл), так же как и размер покровного стекла (22x22 мм).
Под тяжестью покровного стекла эякулят равномерно и однослойно распределяется по поверхности предметного стекла, стандартная толщина слоя - около 20 мкм, что обеспечивает оптимальный обзор препарата.
В приготовленном препарате между покровным и предметным стеклом не должно быть пузырьков воздуха. Стабилизация препарата происходит в течение 1 мин. Не следует сильно прижимать покровное стекло, так как при толщине препарата менее 20 мкм возможны нарушения вращательных движений сперматозоидов. Исследование следует проводить при температуре не ниже 20 °С, поддерживая температуру в помещении на постоянном уровне, иначе будут искажаться результаты оценки подвижности сперматозоидов.
Предварительная оценка сперматозоидов
Нативный препарат просматривается при малом увеличении с окуляром (уве-личение в 10 раз) или бинокуляром (в 7 раз) и объективами (в 8,10 или 20 раз) со спущенным конденсором или же при поднятом конденсоре и закрытой диафрагме. Определяют качество приготовления нативного препарата: отсутствие пузырьков воздуха, равномерную толщину препарата. В бланке отмечают наличие агглютинации, агрегации сперматозоидов и слизи, а также присутствие эритроцитов, «круглых клеток» (лейкоцитов, клеток сперматогенеза, эпителия и др.) и элементов простаты [кристаллов спермина (Беттхера), лецитиновых зерен и амилоидных телец], а также простейших (Trichomonas urogenitalis).
Агглютинация сперматозоидов - склеивание подвижных сперматозоидов между собой головками, хвостами или головок с хвостами.
В норме у практически здоровых пациентов агглютинации сперматозоидов нет. Агглютинация позволяет предположить наличие иммунологического фактора бесплодия, однако ее нельзя считать доказательством последнего.
В бланке отмечают тип агглютинации (головками, хвостами или смешанный вариант) и оценивают степень агглютина¬ции полуколичественно:
«-» - отсутствие агглютинации;
«+» - слабовыраженная агглютинация (в нативном препарате до 10 кучек по 4-6 сперматозоидов в каждой);
«++» - значительная агглютинация (в препарате более 20 кучек сперматозоидов);
«+++» - резко выраженная агглютинация (в препарате более 20 кучек, при этом в каждой более 20 сперматозоидов);
«++++» - тяжелая степень агглютинации (при которой все подвижные сперматозоиды агглютинированы).
Агрегация (псевдоагглютинация) - хаотическое скопление неподвижных сперматозоидов, нагромождение их на комочки или тяжи слизи, клеточные элементы и детрит. Агрегацию и агглютинацию оценивают как отдельные показатели. Слизь в нормальном эякуляте отсутствует. Обнаруживают слизь при воспалении мочеиспускательного канала, бульбоуретральных желез, простаты, простатических ходов и т. д.
При определении вязкости разжиженного эякулята слизь вытягивается из общей массы спермы в виде волокон и тяжей или густой липкой массы. При нанесении капли спермы на предметное стекло может быть обнаружена слизь в виде комочков. Происхождение слизи в нативных и окрашенных азур-эозином препаратах определяют по обнаруженным в них эпителиальным клеткам и другим клеточным элементам. Слизь, в каком бы виде она ни присутствовала в сперме, препятствует движению сперматозоидов и приводит к снижению фертильности (оплодотворяющей способности спермы).
Из предстательной железы с простатическим соком в сперму попадают липоидные, амилоидные тельца и кристаллы спермина.
Trichomonas urogenitalis - простейшее из класса жгутиковых, имеет груше-видную форму, длину 10-20 и ширину 7-10 мкм. Форма тела поддерживается скелетным образованием - аксостилем. В переднем конце тела клетки расположены ядро и пучок из четырех жгутиков. Пятый жгутик, возвратный, проходит по краю ундулирующей мембраны (складки цитоплазмы). Движение простейшего поступательно-колебательное, осуществляется в результате постоянного движения жгутиков; ундулирующая мембрана совершает волнообразные движения, препятствующие вращению клетки. Трихомонады достаточно легко распознаются в нативном препарате спермы, несмотря на активное движение сперматозоидов. Это достаточно крупные клетки, их диаметр в 1,5-3 раза больше диаметра нейтрофила. Более четко строение трихомонад можно определить в препаратах, окрашенных азур-эозином. Это клетки неправильной округлой формы. В переднем конце тела клетки расположено вытянутое, в виде косточки сливы, ядро с четкой хроматиновой структурой, коричневато-вишневого цвета. Сложность лабораторно-диагностических процедур при трихомонозе бывает связана с идентификацией нетипичных округлых и амебовидных форм простейших в клиническом материале.
ПОДСЧЕТ СПЕРМАТОЗОИДОВ (КИНЕЗИОГРАММА)
Оценка подвижности сперматозоидов и разделение их по группам - субъективный фактор. Существует несколько рекомендаций по способам определения подвижности. Ниже приведено разделение подвижности сперматозоидов в соответствии с рекомендациями ВОЗ.
Подвижность каждого сперматозоида классифицируется по категориям а, b, с, d, при этом используются следующие критерии:
а - быстрое поступательное движение (т.е. >25 мкм/с при 37 °С и >20 мкм/с при 20 °С; 25 мкм примерно соответствуют длине пяти головок или половине длины хвоста нормального сперматозоида);
b - медленное, вялое поступательное движение;
с - непоступательное (колебательное или маятникообразное, манежное), скорость движения менее 5 мкм/с;
d - неподвижные сперматозоиды.
В окуляр с десятикратным увеличением вкладывают окошко Фонио и с объективом, увеличивающим в 40 раз, подсчитывают 100 или 200 сперматозоидов. В первые 3-5 с регистрируются проходящие через поле зрения, ограниченное окошком Фонио, активные, подвижные сперматозоиды (а), в следующие 3-5 с - малоподвижные сперматозоиды с поступательным движением (b), после них отмечаются сперматозоиды с непоступательным движением (маятникообразным и манежным) (с) и, наконец, с помощью движения микровинта регистрируются лежащие на предметном стекле (на нижнем уровне препарата) неподвижные сперматозоиды (d). Препарат резко передвигают, после чего регистрируют сперматозоиды в новом поле зрения в том же порядке. Не рекомендуют изучать подвижность сперматозоидов по краю покровного стекла. Если сперматозоидов мало, подсчет проводят без окошка Фонио.
не менее 50% сперматоцитов относится к категории подвижности а + b;
не менее 25% сперматоцитов относится по подвижности к быстрым с поступательным движением (категория а).
Дискинезия - маятникообразное, или манежное, движение сперматозоидов, в норме составляет 2%. При комнатной температуре сперматозоиды сохраняют подвижность 12-24 ч, при этом в первые 2 ч подвижность их не снижается, к концу 5 ч уменьшается примерно в 2 раза.
ПРЕДВАРИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КОНЦЕНТРАЦИИ СПЕРМАТОЗОИДОВ
В рекомендациях ВОЗ предлагается проводить предварительную оценку концентрации сперматозоидов в нативном препарате. При увеличении в 400 раз диаметр поля зрения в различных микроскопах варьирует в пределах между 250 и 400 мкм, что соответствует 1-2,5 нл при толщине препарата 20 мкм. Подсчитать диаметр поля зрения можно с помощью окуляр-микрометра или по решетке счетной камеры.
Если количество сперматозоидов в поле зрения, соответствующем 1 нл, менее 15, сперму разводят теплым (37 °С) изотоническим раствором натрия хлорида 1:5; если 15-20, разводят 1:10; если 40-200 - 1:20; если более 200 - 1:50 или 1:100. Если в 1 нл присутствует очень мало сперматозоидов (всего 1-2), что соответствует 1-2х106/мл сперматозоидов, для клинических целей необходимо сделать запись о малом количестве, а для повышения их концентрации и точного подсчета провести центрифугирование (обогащение). Если количество сперматозоидов в каждом отдельном поле зрения значительно колеблется, это свидетельствует о негомогенности образца. Причиной негомогенности может быть плохое перемешивание - следует еще раз перемешать сперму. Если негомогенность сохраняется, это следствие патологической консистенции и разжижения образца, агрегации сперматозоидов в слизи или их агглютинации. Эти находки следует обязательно зафиксировать в бланке.
Нормозооспермия . У здорового мужчины в эякуляте в 1 мл содержится более 20 млн сперматозоидов. Общее количество сперматозоидов в эякуляте - более 40 млн.
Полизооспермия . Количество сперматозоидов в 1 мл эякулята превышает 150 млн.
Олигозооспермия . В 1 мл эякулята содержится менее 20 млн сперматозоидов. Количество сперматозоидов между 10 и 20 млн/мл обозначается как олигозооспермия I степени, менее 10 млн/мл - как олигозооспермия II степени.
Азооспермия - сперматозоиды при микроскопическом исследовании в нативном препарате и осадке эякулята после центрифугирования не обнаружены. Могут присутствовать клетки сперматогенеза.
Аспермия - нет эякулята. Для определения при олигозооспермии истинного количества сперматозоидов необходимо провести 2-3 контрольных подсчета с интервалом 3-4 нед.
Транзиторная и старческая олигозооспермия . У одного и того же мужчины количество сперматозоидов подвержено большим физиологическим колебаниям. У пожилых людей олигозооспермия связана с инволюцией половых желез.
Истинную олигозооспермию могут вызвать следующие патологические процессы.
Обструкция семявыносящих путей - разделяется на врожденную и приобретенную. Предположить обструкцию можно, если после центрифугирования спермы в осадке отсутствуют не только сперматозоиды, но и клетки сперматогенеза. К приобретенной обструкции семявыносящих путей приводят хронические воспаления верхних отделов мочеполовых путей, вызванные гонококками, хламидиями, микобактериями туберкулеза.
Муковисцидоз - у таких больных сперма может не содержать сперматозоидов и клеток сперматогенеза, а pH эякулята может быть ниже 7,0 (кислая реакция). Патология связана с нарушением функций семявыносящих путей, причем у этих пациентов также может быть обнаружена атрезия эпидидимиса и семенных пузырьков.
Тестикулярная дисфункция - может привести к нарушению сперматогенеза. При непосредственном поражении яичек (гонад) возникает первичный гипогонадизм. При нарушении гипоталамо-гипофизарной регуляции сперматогенеза развивается вторичный гипогонадизм.
- Первичный гипогонадизм может быть врожденным и приобретенным. Врожденный гипогонадизм обусловлен наследственными генетическими аномалиями и дефектами развития.
- Наследственные генетические аномалии: синдромы Клайнфельтера и Шерешевского-Тернера, хромосомные аберрации, мутации AZF области Y (синдром «только клетки Сертоли»), наследственные синдромы с нормальным кариотипом (синдром Нунан), низкая чувствительность к андрогенам.
- Врожденные дефекты развития: крипторхизм, врожденный анорхизм, первичная недостаточность клеток Лейдига.
- Приобретенный первичный гипогонадизм развивается при травматических или инфекционных орхитах, синдроме сдавления, варикоцеле, новообразованиях половых органов, лейкемии, злокачественной лимфоме, повреждении спинного мозга, при печеночной и почечной недостаточности, после облучения, при действии токсичных препаратов, психологических стрессах и у людей пожилого возраста. Диагностика приобретенного гипогонадизма складывается из изучения анамнестических данных, гормонального статуса и общеклинических исследований.
- Вторичный гипогонадизм вызывается нарушением регуляторной функции гипоталамогипофизарной системы. В крови у этих пациентов снижено содержание гонадотропных гормонов (гипогонадотропный гипогонадизм). Дефицит гонадотропинов может быть вызван как первичной патологией гипофиза, так и нарушением секреции гонадотропин-рилизинг-факторов гипоталамуса (GnRH). У таких пациентов в крови снижен уровень тестостерона (идиопатический гипогонадизм). К этой категории патологии относятся синдром Кальмана (врожденный дефект гипоталамуса с дефицитом GnRH), синдром Прадера-Вилли, синдром фертильных евнухов с характерным дефицитом лютеинизирующий гормон и тестостерона на фоне нормальной концентрации фолликулостимулирующего гормона.
Астенозооспермия - снижение подвижности сперматозоидов.
Подвижность сперматозоидов считается нормальной, если:
в сумме не менее 50% сперматоцитов имеет быстрое или медленное поступательное движение (категория подвижности а + b);
не менее 25% сперматоцитов относится по подвижности к быстрым с поступательным движением (категория а).
Физиологические колебания подвижности
Подвижность сперматозоидов зависит от времени года и суток. Имеются сообщения, что весной подвижность сперматозоидов снижается (сезонные колебания). При наблюдении за количеством активных, подвижных сперматозоидов в течение суток было отмечено увеличение их количества во второй половине дня (суточные ритмы). Было также прослежено колебание подвижности сперматозоидов от частоты эякуляции. У пациентов с олиго- и астенозооспермией при эякуляции каждые 4-6 ч отмечалось относительное увеличение количества активных, подвижных сперматозоидов.
Астенозооспермия отмечается примерно у 50% пациентов с нарушением фертильности. Заключение о незначительной степени астенозооспермии можно сделать, если количество активных и малоподвижных сперматозоидов с поступательным движением в сумме составляет менее 50, но более 30%.
Астенозооспермию вызывают эндогенные, генетические и экзогенные факторы.
Генетические нарушения строения жгутика.
Энергетические нарушения, связанные с генетически обусловленными или функциональными дефектами митохондрий.
Хронические воспалительные заболевания.
Бактериоспермия.
Экзогенные токсические факторы.
Хронигеские воспалительные заболевания . Подвижными сперматозоиды становятся в процессе созревания в придатке яичка. Их подвижность меняется по мере продвижения вдоль эпидидимиса. Созревание сперматозоидов обусловлено андроген-зависимыми факторами, которые вырабатывает эпителий эпидидимиса. Эпидидимиты различной этиологии вызывают снижение подвижности сперматозоидов. Астенозооспермия возникает в результате нарушения секреторной функции эпителия эпидидимиса. В период между эякуляциями каудальный отдел эпидидимиса является местом хранения зрелых сперматозоидов, при его воспалении интоксикация поражает сперматозоиды и приводит к астенозооспермии и увеличению количества мертвых клеток.
Бактериоспермия . Некоторые микроорганизмы приводят к снижению подвижности сперматозоидов, вызывая их агглютинацию и/или адгезию. Этот процесс зависит от концентрации бактерий в сперме. Так, in vitro Е. coli значительно снижает подвижность сперматозоидов в концентрации 104/мл.
Экзогенные и токсигеские факторы . Исследование следует проводить при температуре не ниже 20 °С, поддерживая ее в помещении на постоянном уровне, иначе будут искажаться результаты оценки подвижности сперматозоидов по категориям. Подвижность сперматозоидов снижается при действии электро-магнитных полей, солей тяжелых металлов, свинца, наркотических препаратов, накоплении в сперме кадмия. Экспериментально доказано, что у сперматозоидов, помещенных в магнитное поле, снижается подвижность из-за изменения формы жгутика. По-видимому, действие экзогенных факторов неспецифическое и прямо или косвенно влияет на структуру компонентов жгутиков. Так, у наркоманов были обнаружены значительные изменения микротрубочек аксонемы жгутиков, напоминающие подобные при синдроме Картагенера (сперматозоиды живые, но неподвижные).
Cпермограмма или анализ спермы – один из основных методов диагностики способности зачатия при обследовании мужчины в случае бесплодия.
В 2010 году всемирная организация здравоохранения издала «Пособие по лабораторному исследованию человеческой спермы» («WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen »). В данном руководстве рассмотрены все этапы анализы спермы – от техники получения до утилизации.
Синонимы: анализ спермы, анализ эякулята, спермиог рамма, спермато грамма, анализ семени, сперматологическое исследование.
Спермограмма (анализ спермы) это
стандартизированный метод исследования эякулята, нацеленный на оценку макроскопических и микроскопических параметров спермы.
Термин «анализ спермы» довольно широк, включает в себя несколько видов исследования (согласно определению ВОЗ), а «спермограмма» нацелена в первую очередь на оценку количества и качества сперматозоидов. В отечественной урологии и андрологии данные термины используют как синонимы.
Что такое сперма и эякулят?
Сперма – концентрированная суспензия сперматозоидов, выделяется во время эякуляции.
Эякулят – жидкость, вытекающая из мужского пениса во время оргазма, состоит из сперматозоидов и секрета простаты и семенных пузырьков. Термины «эякулят» и «сперма» – синонимы.
Сперма на 90% состоит из воды, 6% органических веществ и 4% .
Состав спермы
- семенная плазма – смесь из жидкостей, вырабатываемых яичками, клетками семявыносящих канальцев, протоков придатка яичка, семявыносящих протоков, семенных пузырьков, простаты, бульбоуретральных желез и парауретральных желез в самой уретре;
- форменные элементы, среди которых первое место занимают зрелые сперматозоиды, количество у взрослого мужчины около 15-100 миллионов в 1 мл эякулята; в сперме могут быть выявлены другие виды клеток, но их общее число не должно превышать 2% от общего числа клеток
- круглые дегенеративные клетки из герминативного эпителия или из выстилки прямых канальцев и сети яичка
- цилиндрический эпителий из выводных половых протоков и уретры
- лейкоциты
- фрагменты цитоплазмы сперматид (остаточные тельца)
- простатические камни
- липидные зерна
- белковые гранулы
- пигментные зерна
- кристаллы Бетхера — призматические кристаллы, осадок солей фосфорной кислоты и спермина, появляются при испарении воды из спермы
Подготовка
- половое воздержание (в т.ч. и от мастурбации) 2-7 дней; при последующих исследованиях срок воздержания должен быть одинаковым – если при первом исследовании было 4 дня, то и при втором и т.д. — аналогично 4 дня
- исключить влияние температуры – сауна, баня, горячая ванная или душ
- не употреблять алкоголь за 14 дней до исследования
- исключить прием препаратов, оказывающих влияние на урогенитальный тракт
- сдавать сперму для нужно в специальной комнате при лаборатории (клинике) для минимизации времени между получением материала и его исследованием
- метод получения спермы – мастурбация в химически чистый, широкогорлый стеклянный или пластиковый стаканчик (можно приобрести в аптеке или в самой лаборатории)
- в некоторых случаях можно использовать специальные презервативы без спермицидов
- собрать нужно всю сперму, самой ценной считается именно первая капля в которой содержится максимум спермиев (ее потеря может привести к ложным результатам теста)
- посуда для спермы должна быть стерильной, если будет производится бактериологический посев спермы, внутриматочная инсеминация или оплодотворение в пробирке (IVF, in vitro fertilisation )
- температура посуды 20-40°С (т.е. нельзя прийти с мороза и начать сдавать пробу)
- в исключительных случаях собрать сперму можно в домашних условиях, но время транспорта ее в лабораторию должно быть менее 60 минут в светонепроницаемом пакете, температура 20-40°С
Запрещено:
- сперма, полученная при прерванном половом акте, не подходит для анализа, поскольку велик риск потери первой капли, расшифровать, полученный таким образом, анализ спермы невозможно
- обыкновенные презервативы нельзя применять для сбора спермы, поскольку латекс оказывает спермицидное действие (разрушает сперматозоиды)
В процессе анализа спермы существует четыре важных пункта – подготовка к анализу, транспортировка в лабораторию, выполнение самого анализа, расшифровка. От мужчины зависят только первые два.
Сперматозоид
Для врача, оценивающего качество спермы, наиболее важны два параметра:
- общее количество сперматозоидов – способность яичек вырабатывать сперматозоиды и транспортной системы их выделить
- общий объем эякулята – способность желез выделить секрет, обеспечивающий жизнеспособность сперматозоидов
Плохая спермограмма
Мужчины с результатами спермограммы, которые выходят за пределы нормы имеют меньшую вероятность зачатия естественным путем, но это ни в коем случае не значит, что мужчина не может стать отцом.
Расшифровка
1. Цвет спермы и время разжижения
Нормальная сперма имеет бело-серый цвет, слегка опалесцирует, однородна, при комнатной температуре разжижается за 15 минут. Если время разжижения более 60 минут – добавляют специальные ферменты для растворения, чтоб сделать ее пригодной для дальнейшего исследования. В сперме не должно быть примесей свежей крови, коричневого гематина (указывает не предыдущее кровотечение), видимого гноя и волокон слизи. Желтая окраска эякулята бывает при приеме поливитаминов, антибиотиков, желтухе. Могут присутствовать гелевые зерна, которые не растворяются при разжижении.
2. Объем
Минимальное количество спермы, необходимое для исследования – 1 мл, норма для оплодотворения – 1,5-5 мл. Количество спермы зависит от объема семенной плазмы и не зависит от числа сперматозоидов.
3. Консистенция и вязкость
Оценивается после разжижения по длине волокна, образованного при касании стеклянной палочкой к сперме. Повышенная вязкость спермы оказывает прямое влияние на подвижность сперматозоидов и непрямо свидетельствует о наличии антиспермальных антител.
4. Кислотность или pH
pH спермы слабощелочная, от 7,2 до 7,8. pH выше 7,8 свидетельствует о наличии инфекции, а при обструкции семявыносящего пути или врожденном отсутствии семявыносящего протока развивается азооспермия (полное отсутствие сперматозоидов) и кислотность ниже 7,0.
Микроскопическое исследование спермы
Микроскопическое исследование спермы проводится под специальным микроскопом с фазовым контрастом или обыкновенным световым микроскопом, просматриваются неокрашенный и окрашенные мазки.
1. Количество сперматозоидов
Врач подсчитывает число сперматозоидов в специальной счетной камере (гемоцитометре) под микроскопом и рассчитывает их общее количество в пробе и в 1 мл. В норме общее число сперматозоидов в пробе должно быть не менее 15 *10 6 /мл, а в целой пробе – более 39 *10 6 /мл
Если в сперме спермиев очень мало (олигоспермия), то дополнительно пробу центрифугируют и исследуют только осадок (криптозооспермия). Если же и в осадке спермы не выявлено ни одного сперматозоида, то в заключении будет написано – «азооспермия».
2. Подвижность сперматозоидов
Для исследования подвижности сперматозоидов врач дважды просматривает 5 полей зрения в микроскопе и оценивает не менее 200 сперматозоидов.
Критерии подвижности сперматозоидов:
a) быстрое прогрессивное движение (PR) – 25 микрон/сек или более при t 37°С или 20 микрон/сек или более при t 20°С; 25 микрон – это 5 размеров головок сперматозоида или половина жгутика, так продвигаются более 32% сперматозоидов
b) медленное прогрессивное движение («sluggish » – как улитка)
c) непрогрессивное движение (NP) – менее 5 микрон/сек
d) неподвижный сперматозоид (IM)
Общая подвижность – это сумма категорий a, b, c в норме более 40%.
Прогрессивно подвижные сперматозоиды – сумма категорий a и b должна быть не менее 32%.
При текущем инфекционном заболевании урогенитального тракта – простатите, уретрите, везикулите или наличии сперматических антител скорость движения сперматозоидов снижается.
3. Другие клеточные элементы в сперме
В эякуляте, кроме сперматозоидов, могут присутствовать и другие клетки, которые объединяют термином «круглые клетки», поскольку увеличение микроскопа не всегда позволяет их дифференцировать. Для их идентификации проводятся окрашивание препаратов специальными красителями.
«Круглыми клетками» являются:
- эпителиальные клетки из урогенитального тракта
- простатические клетки
- сперматогенные клетки
- лейкоциты
Нормальный эякулят должен содержать менее 5 миллионов круглых клеток в 1 миллилитре.
Лейкоциты, преимущественно , в незначительном числе присутствуют и в здоровом эякуляте, а вот их повышенное количество – лейкоцитоспермия – может быть вызвана инфекцией и воспалением.
При выявлении повышенного количества лейкоцитов в сперме нужно провести дополнительные исследования – бак. посев мочи, бак. посев секрета простаты, бакт. посев урогенитальных выделений. Отсутствие лейкоцитов в сперме не исключает наличие мочеполовой инфекции.
Присутствие в сперме незрелых зародышевых клеток (сперматиды, сперматоциты, сперматогонии) и эпителиальных клеток – показатель нарушенного созревания сперматозоидов, их замедленного созревания (гипоспермиогенез), варикоцеле, дисфункции клеток Сертоли, связано с низкой вероятностью успешного оплодотворения в пробирке (IVF).
4. Агглютинация сперматозоидов
Агглютинация или склеивание живых сперматозоидов между собой головками, шейками, жгутиками или смешанно (головка+жгутик, шейка+головка и т.д.) приводит к их обездвиживанию, это непрямой показатель иммунологического бесплодия. В норме агглютинация сперматозоидов отсутствует.
Для диагностики иммунного бесплодия проводится MAR-тест и immunobead-тест.
5. % живых сперматозоидов
Жизнеспособность сперматозоидов исследуют «прижизненной» окраской, показатель исследуют, если число неподвижных спермиев превышает 50%. Мертвые сперматозоиды, с разрушенной клеточной мембраной, не окрашиваются. Тест позволяет оценить число живых, но неподвижных спермиев от мертвых. Большое число живых, но неподвижных спермиев указывает на структурные дефекты жгутиков.
Значительное количество мертвых сперматозоидов (некроспермия) указывает на заболевание именно яичек.
Нижняя граница нормы % жизнеспособных сперматозоидов 58%.
6. Строение сперматозоидов
Строение сперматозода очень вариабельно и не считается обязательным исследованием в рамках стандартной спермограммы, но обязательно при планировании ЭКО. Форма сперматозоида косвенно отображает способность к зачатию и определяет эффективность ЭКО. При низком числе морфологически нормальных спермиев рекомендовано ИКСИ (ICSI - IntraCytoplasmic Sperm Injection , введение сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки, интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида).
Врач обмеряет 200 сперматозоидов с сравнивает с «идеальным» сперматозоидом (читай выше в разделе о строении сперматозоида). Критерии «правильности» (Крюгера-Менквельда) очень строги, поэтому и нормы довольно низкие. В мазке должно быть не менее 14% анатомически образцовых сперматозоидов, чтоб сперма считалась фертильной (способной оплодотворить). Показатель 5-14% имеет хороший прогноз зачатия, а 0-4 – прогноз плохой, данная сперма субфертильна.
Сперматозоид считается нормальным / типичным если головка, шейка и жгутик не имеют ни одного отклонения от нормы, ни одной аномалии.
В эякуляте находится большое число сперматозоидов с различными морфологически комбинированными деформациями, например, сочетание измененной акросомы и круглой головки (). Поэтому врачи пользуются специальными индексами:
- TZI (teratozoospermia index) – индекс тератоспермии — среднее количество дефектов на 1 аномальный сперматозоид, в норме до 1,6
- MAI (multiple anomalies index) – индекс множественных аномалий – сумма всех дефектов в общем количестве аномальных спермиев
- SDI (sperm deformity index) – индекс дефектности сперматозоидов – сумма дефектов в общем числе всех подсчитанных сперматозоидов
Повышенный процент аномальных сперматозоидов вызван заболеваниями яичек и нарушенным спермогенезом.
Заключение врача, исследовавшего сперму
- нормозооспермия – нормальный (полностью «здоровый») эякулят, согласно написанным выше параметрам
- олигозооспермия – общее число сперматозоидов менее 20*10 6 /мл
- астенозооспермия – менее 50% спермиев с прогрессивными движениями категорий А и Б, или менее 25% с подвижностью А
- теротозооспермия – менее 15% сперматозоидов с нормальным строением
- олигоастенотератоспермия – комбинация всех трех описанных выше состояний
- олигоастенозооспермия – наиболее частая комбинация нарушений в сперме – снижение подвижности и количества сперматозоидов
- криптозооспермия – сперматозоиды выявляют только после центрифугирования – осаждения сперматозоидов
- некрозооспермия – живые сперматозоиды в препарате отсутствуют
- пиоспермия – повышенное число лейкоцитов в эякуляте
- азооспермия/аспермия – в образце эякулята отсутствуют сперматозоиды
Вопросы врачу
1. От чего зависит качество спермы?
Качество спермы зависит от состояния всех органов, принимающих участие в ее образовании и выведении, а также организма в целом. Нельзя ожидать нормального результата спермограммы при наличии тяжелых, хронических заболеваний или депрессии.
2. Как улучшить спермограмму?
Здоровый образ жизни (питание, работа, сон, отдых), своевременное полное лечение всех заболеваний и половая грамотность.
3. Выявляет ли спермограмма инфекции с половым путем передачи?
Нет. Только повышенное число лейкоцитов может косвенно указать на воспаление, но сам возбудитель спермограмма не выявит.
4. Нужно ли делать спермограмму профилактически, например, в определенном возрасте или раннего выявления заболевания?
5. Если спермограмма в норме, то больше мужчине обследоваться не нужно?
Нет, нормальный результат исследования спермы – первый шаг в диагностике заболевания. Нормальный результат анализа спермы не исключает наличие заболевания.
6. У меня нет проблем с эрекцией, значит спермограмму проводить не нужно?
Нет, связи между эрекцией и спермограммой нет. При нормальной эректильной функции сперма может быть «плохой» и наоборот.
Эрекция – это увеличение объема и затвердение полового члена при сексуальном возбуждении для осуществления полового акта.
7. Может для достоверности результата анализ спермы стоит проводить в разных лабораториях?
Нет. Анализ спермы нужно проводить в одной и той же лаборатории, поскольку в правильность результата большой вклад вносит профессионализм врача выполняющего исследование.
8. При каких параметрах спермограммы гарантировано зачатие?
Зачатие – сложный процесс слияния мужской и женской половых клеток – сперматозоида и яйцеклетки. При природном половом акте никто не сможет гарантировать успешность зачатия даже при идеальных результатах анализа спермы. Аналогично и при «плохой спермограмме» спонтанное зачатие возможно.
Факты
- спермограмма – это не анализ на бесплодие
- нормы и референсные пределы исследования спермы у каждой лаборатории «свои», поэтому не стоит удивляться увидев в один раз норму 2-6 а другой 0-8
- норма в результатах спермограммы довольно условна и субъективна, ведь анализ проводит человек; благодаря тому, что отдельные анализы в рамках спермограммы проводятся дважды, подобное искажение нивелируют
- расшифровывать спермограмму нужно комплексно, незначительное отклонение не всегда свидетельствует о наличии болезни
- автоматические анализаторы имеют лишь вспомогательную роль в исследовании спермы
- чтоб полученные результаты спермограммы можно было сравнивать между собой, необходимо проводить сбор спермы в одних и тех же условиях, одной и той же методикой, при одинаковом времени воздержания; оптимально, чтоб результаты расшифровывал один и тот же специалист
Спермограмма — анализ спермы, расшифровка, результаты was last modified: Октябрь 29th, 2017 by Мария Бодян
Основной целью исследования эякулята является определение способности спермы к оплодотворению и выявление заболеваний и/или патологических процессов, вызвавших соответствующие поражения. Исследование спермы – неотъемлемая часть диагностики бесплодия. Примерно в 47% случаев причиной бездетности семейных пар является мужчина. Причиной бесплодия мужчин могут быть заболевания яичек, простаты, нарушения проводимости семявыводящих путей, заболевания и пороки развития уретры. Исследование семенной жидкости также является одним из тестов при диагностике гормональных расстройств, заболеваний половых органов или пороков их развития.
В норме эякулят представляет собой взвесь сперматозоидов в секрете яичек и их придатков, которая к моменту эякуляции смешивается с секретом предстательной железы, семенных пузырьков и луковично-уретральных желез.
Сперматозоиды составляют около 5% объема спермы, они образуются в семенниках. Приблизительно 60% объема спермы образуется в семенных пузырьках. Это вязкая, нейтральная или слегка щелочная жидкость, часто желтая или даже сильно пигментированная из-за высокого содержания рибофлавина.
Простата производит примерно 20% объема семенной жидкости. Эта жидкость, похожая на молоко, имеет слабокислую реакцию (рН около 6,5), в основном из-за высокого содержания лимонной кислоты. Простатический секрет также богат кислой фосфатазой и протеолитическими ферментами, считается, что протеолитические ферменты отвечают за коагуляцию и разжижение семенной жидкости.
Менее 10–15% объема спермы образуется в придатках яичек, семявыводящих протоках, бульбоуретральных и уретральных железах.
Стандартная спермограмма оценивает физические (макроскопические) и микроскопические параметры эякулята (Табл., рис. 1-3).
| Показатель | Характеристика | Интерпретация |
|---|---|---|
| Цвет | Серовато-беловатый, слегка опалесцирующий | Норма |
| Почти прозрачный | Концентрация сперматозоидов очень низка | |
| Красновато-коричневатый | Присутствие эритроцитов | |
| Зеленоватый | Пиоспермия | |
| Желтоватый | Желтуха, прием некоторых витаминов, при длительном воздержании | |
| Реакция рН | 7,2–7,8, слабо-щелочная | Норма |
| Ниже 7,0 | В образце с азооспермией – наличие обструкции или врожденного двустороннего отсутствия семявыносящих протоков | |
| 9,0–10,0, щелочная | Патология предстательной железы | |
| Объем | 2–6 мл | Норма |
| Менее 1 мл | Андрогенная недостаточность, эндокринные заболевания, сужения и деформации пузырьков, семявыводящих путей |
Условия взятия и хранения образца
Эякулят должен быть получен после, как минимум, 48 ч, но не более 7 дней полового воздержания.
Эякулят, полученный путем мастурбации, необходимо собрать полностью и держать в тепле (20–40 оС). Образец стабилен один час, однако в случае, если подвижность сперматозоидов патологически низкая (менее 25% сперматозоидов с быстрым линейным поступательным движением), срок между получением и анализом образца следует свести к минимуму.
Метод исследования
Макроскопическое исследование – определение консистенции, объема, запаха, цвета, вязкости и рН эякулята.
Сперма, полученная при эякуляции, густая и вязкая, что обусловлено свертыванием секрета семенных пузырьков. В норме при комнатной температуре образец эякулята должен разжижаться в течение 60 мин. Если эякулят длительное время остается вязким, полувязким или вообще не разжижается, то можно предполагать воспаление предстательной железы. В норме объем эякулята составляет 2–6 мл. Количество менее 1,0 мл характерно для андрогенной недостаточности, эндокринных заболеваний, сужения и деформации пузырьков, семявыводящих путей. Максимальный объем может достигать 15 мл. Объем эякулята не влияет на фертильность. Запах нормального эякулята специфический и обусловлен спермином (напоминает запах «свежих каштанов»). Специфический запах становится слабым или отсутствует при закупорке выводных протоков предстательной железы. При гнойно-воспалительных процессах запах спермы обусловлен продуктами жизнедеятельности бактерий, вызвавших воспалительный процесс.
Микроскопическое исследование – изучение в нативном препарате подвижности сперматозоидов и наличия агглютинации, подсчет количества сперматозоидов в камере Горяева, изучение морфологии сперматозоидов, клеток сперматогенеза и дифференциальная диагностика живых и мертвых сперматозоидов в окрашенных препаратах.
Микроскопическое исследование эякулята проводят после полного его разжижения
Подвижность каждого сперматозоида классифицируют по категориям, используя следующие критерии:
а) быстрое поступательное движение;
b) медленное и вялопоступательное движение;
c) непоступательное движение;
d) неподвижные сперматозоиды.
Сначала подсчитывают все сперматозоиды категорий а и b в ограниченном участке поля зрения или, если концентрация сперматозоидов низкая, во всем поле зрения (%). Далее в той же области подсчитывают сперматозоиды с непоступательным движением (категория с) (%) и неподвижные сперматозоиды (категория d) (%).
Определять подвижность можно с подсчетом в камере Горяева. Сперму разводят в 20 раз физиологическим раствором, в камере смотрят только неподвижные и малоподвижные сперматозоиды.
Расчет ведут по формуле:
Х = А – (В + С), где,
А – общее количество сперматозоидов;
В – количество малоподвижных сперматозоидов;
С – количество неподвижных сперматозоидов.
Отсюда количество активно подвижных сперматозоидов в процентах составляет (Y):
Y = Х * 100/А.
Подвижность сперматозоидов зависит от времени года и суток. Имеются данные, что весной происходит снижение подвижности сперматозоидов (сезонные колебания). При наблюдении за количеством активно-подвижных сперматозоидов в течение суток было отмечено увеличение их количества во второй половине дня (суточные ритмы).
Снижение подвижности сперматозоидов ниже нормы – астенозооспермия. Незначительной степени астенозооспермии – количество активно- и малоподвижных сперматозоидов c поступательным движением в сумме составляет менее 50%, но более 30%.
Оценка агглютинации сперматозоидов. Под агглютинацией сперматозоидов подразумевают склеивание подвижных сперматозоидов между собой головками, хвостами или головок с хвостами. Склеивание неподвижных сперматозоидов друг с другом или подвижных сперматозоидов с нитями слизи, другими клетками или остатками клеток следует считать и регистрировать не как агглютинацию, а как неспецифическую агрегацию. При исследовании регистрируют тип агглютинации (головками, хвостами, смешанный вариант). Можно использовать полуколичественный метод оценки степени агглютинации от «–» (отсутствие агглютинации) до «+++» (тяжелая степень, при которой все подвижные сперматозоиды подвержены агглютинации). В норме склеиваются не более 3–5%. Если количество агглютинированных сперматозоидов составляет 10–15%, можно говорить о понижении их оплодотворяющей способности.
Подсчет общего количества сперматозоидов проводят в камере Горяева. Общее количество сперматозоидов в эякуляте рассчитывают, умножая количество сперматозоидов в 1мл спермы на объем выделенной спермы.
Нормоспермия – у здорового мужчины в 1 мл эякулята содержится более 20 млн. сперматозоидов.
Полизооспермия – количество сперматозоидов в 1 мл эякулята превышает 150 млн.
Олигозооспермия – в 1 мл эякулята содержится менее 20 млн. сперматозоидов.
Азооспермия – отсутствие сперматозоидов в эякуляте.
Аспермия – в доставленной жидкости нет сперматозоидов и клеток сперматогенеза.
Оценка жизнеспособности сперматозоидов. Для оценки жизнеспособности сперматозоидов смешивают на предметном стекле одну каплю свежего эякулята с каплей стандартного красителя эозина. Живые сперматозоиды в таких препаратах не окрашиваются (белые); мертвые сперматозоиды окрашиваются в красный цвет, т.к. повреждены их плазматические мембраны. Под жизнеспособностью подразумевают долю (в процентах) «живых» сперматозоидов. Жизнеспособность следует оценивать, если процент неподвижных сперматозоидов превышает 50%.
Оценка жизнеспособности может служить контролем точности оценки подвижности сперматозоидов, поскольку процент мертвых клеток не должен превышать (с учетом ошибки подсчета) процента неподвижных сперматозоидов. Наличие большого количества живых, но неподвижных сперматозоидов, может указывать на структурные дефекты жгутиков. Сумма мертвых и живых сперматозоидов не должна превышать 100%.
Характеристика клеточных элементов эякулята. Обычно эякулят содержит не только сперматозоиды, но и другие клетки, которые в совокупности обозначают, как «круглые клетки». К их числу относят эпителиальные клетки мочеиспускательного канала, клетки предстательной железы, незрелые половые клетки и лейкоциты. В норме эякулят не должен содержать более 5*106 круглых клеток/мл.
В большинстве случаев эякулят человека содержит лейкоциты, в основном нейтрофилы. Повышенное содержание этих клеток (лейкоспермия) может свидетельствовать о наличии инфекции и о плохом качестве сперматозоидов. Число лейкоцитов не должно превышать 1106/мл. Подсчет ведут в камере Горяева аналогично подсчету сперматозоидов.
Эякулят кроме лейкоцитов может содержать незрелые половые клетки (клетки сперматогенеза) на разных стадиях созревания: сперматогоний, сперматоцит I порядка, сперматоцит II порядка, сперматид. (рис. 2)
Наличие в эякуляте различных типов незрелых клеток сперматогенеза обычно говорит о его нарушении. Избыток этих клеток является следствием нарушения функции семенных канальцев, в частности, при сниженном сперматогенезе, варикоцеле и патологии клеток Сертоли.
Оценка морфологии сперматозоидов. Для анализа используют мазок, окрашенный гистологическими красителями (гематоксилин, Романовский-Гимза и др.), в котором производят последовательный подсчет 200 сперматозоидов (однократный подсчет 200 сперматозоидов предпочтительней двукратного подсчета 100 сперматозоидов) и выражают в процентах количество нормальных и патологических форм (Рис. 3).
Головка сперматозоида должна быть овальной формы. Отношение длины головки к ее ширине должно составлять от 1,5 до 1,75. Должна быть видна хорошо очерченная акросомная область, составляющая 40–70% площади головки. Шейка сперматозоида должна быть тонкой, составлять 1,5 длины головки сперматозоида и прикрепляться к головке вдоль ее оси. Размеры цитоплазматических капель не должны превышать 1/2 размера головки нормального сперматозоида. Хвост должен быть прямым, одинаковой толщины на всем протяжении и несколько уже в средней части, не закрученным и иметь длину около 45 мкм. Отношение длины головки к длине хвоста у нормальных сперматозоидов 1:9 или 1:10.
Дефекты головки: большие, маленькие, конические, грушевидные, круглые, аморфные, с вакуолями в области хроматина; головки с маленькой акросомальной областью, вакуолизированной акросомой, с несимметрично расположенной акросомой; двойные и множественные головки, головки с компактным строением хроматина и т.д.
Дефекты шейки и средней части: «склоненная» шейка (шейка и хвост образуют угол 90° к длинной оси головки), асимметричное прикрепление средней части к головке, утолщенная или неравномерная средняя часть, патологически тонкая средняя часть (отсутствие митохондриальной оболочки) и их любая комбинация.
Дефекты хвоста: хвосты короткие, множественные, в виде шпильки, сломанные, наклонные (угол больше 90°), неравномерная толщина хвоста, тонкая средняя часть, закрученный конец, закрученный полностью и их любая комбинация. При дифференцированном морфологическом подсчете учитываются только сперматозоиды с хвостами.
Тератозооспермия – увеличение количества патологических форм сперматозоидов выше референсных значений. Выраженная тератозооспермия резко снижает шансы оплодотворения и увеличивает вероятность пороков развития у плода, если оплодотворение произошло. Тератозооспермия обычно сочетается с олигозооспермией и астенозооспермией.
Сперматозоиды, у которых головка заключена в цитоплазматическую каплю, и те, у которых цитоплазматическая капля расположена на шейке в виде шарфа и по отношению к размеру головки составляет более 1/3, выделяются как незрелые или юные. В нормальной спермограмме они составляют около 1%.
Референтные интервалы
- Объем – 2,0 мл или более;
- рН – 7,2 или более;
- концентрация – 20 *106 сперматозоидов/мл или более;
- общее количество – 40 *106 сперматозоидов и более в эякуляте;
- подвижность – 50% или более подвижных (категория а+b); 25% или более с поступательным движением (категория а) в течение 60 мин после эякуляции;
- жизнеспособность – 50% или более живых, т.е. не окрашенных;
- лейкоциты – менее 1 *106/мл.
Классификация показателей эякулята
- Нормозооспермия – нормальный эякулят;
- олигозооспермия – концентрация сперматозоидов ниже нормативных значений;
- астенозооспермия – подвижность ниже нормативных значений;
- тератозооспермия – морфология ниже нормативных значений;
- олигоастенотератозооспермия – наличие нарушений всех трех показателей;
- азооспермия – нет сперматозоидов в эякуляте;
- аспермия – нет эякулята.