Лабораторная диагностика болезней животных. Введение

Являются производными мезенхимы. Вместе с органами кроветворения и иммунопоэза., лимфоидными образованиями, ассоциированными со структурами некроветворных органов, они связаны генетически и функционально, обеспечивая поддержание постоянства внутренней среды (гомеостаз), внутреннее дыхание, трофику, регуляцию и интеграцию всех систем организма, экскрецию шлаков и защиту (фагоцитоз, клеточный и гуморальный иммунитет, тромбообразование).

Морфология крови

Кровь состоит из плазмы (55-60%) и форменных элементов (40-45%).

Плазма – жидкая часть крови. В ней содержатся белки (более 100 разновидностей), жиры, углеводы, соли, гормоны, ферменты, антитела, растворенные газы и др. На сухой остаток плазмы приходится 7-10%, остальную часть составляет вода (90-93%). Основным компонентом сухого остатка являются белки (6,5-8,5%). Среда ее слабощелочная (рН 7,4). Белки плазмы делятся на 2 фракции: легкую фракцию составляют альбумины (60%) и тяжелую – глобулины (40%).

Альбумины синтезируются в печени. Они обеспечивают коллоидно-осмотическое давление крови, удерживают воду в кровотоке (при их недостатке – отёки), выполняют транспортную функцию, адсорбируя ряд соединений.

Глобулины имеют двоякое происхождение. Одни из них, γ-глобулины (антитела), продуцируются В-лимфоцитами и плазмоцитами, а другие, β-глобулины, фибриноген и протромбин, образуются в печени. β-глобулины способны связывать и переносить ионы Fe, Cu, Zn и др., а фибриноген и протромбин участвуют в тромбообразовании.

Форменные элементы крови. Д. Л.Романовский в 1891г. предложил окраску мазков крови смесью двух красителей – эозином и азуром-II, что позволило дифференцировать форменные элементы крови, к которым относятся эритроциты, лейкоциты, стволовые клетки и кровяные пластинки.

Эритроциты. У млекопитающих – это безъядерные клетки, у птиц, пресмыкающихся, амфибий и рыб они содержат ядра. Размеры эритроцитов имеют видовые особенности и в каждом конкретном случае они делятся на нормоциты, микроциты и макроциты (разнообразие размеров эритроцитов называется анизоцитозом).

В норме эритроциты имеют форму двояковогнутого диска (дискоциты). Однако при старении и различного рода патологических состояниях они могут изменять свою форму, в связи с чем различают: планициты - с плоской поверхностью, стоматоциты - куполообразной формы, сфероциты – шаровидные, эхиноциты – шиповидные и др.

– (разнообразие форм эритроцитов называется пойкилоцитозом - греч. пойкилис - разновидный).

Функции эритроцитов: транспорт О2 и СО2 (дыхательная), аминокислот, антител, токсинов, лекарственных веществ путём адсорбции. Дыхательная функция связана со способностью гемоглобина (Hb) присоединять к себе кислород (O2) и диоксид углерода (CO2). Однако Hb может образовывать прочные связи и с другими химическими соединениями:

Нb – дезоксигемоглобин,

НbО – оксигемоглобин,

НbСО2 – карбгемоглобин,

НbСО – карбоксигемоглобин (СО - угарный газ, прочность связи с Нb у которго в 300 раз выше, чем с О2),

Нb + сильные окислители (КМnO4; анилин, нитробензол и др.) → НbОН – метгемоглобин (в этих случаях Fe+2→ Fe+3, вследствие чего способность Нb присоединять кислород утрачивается).

Особенности строения плазмолеммы эритроцитов . Плазмолемма эритроцитов представляет собой типичную биологическую мембрану, состоящую из билипидного слоя и белков в комплексе с углеводами. Соотношение липидов и белков в ней 1:1. Углеводы входят в состав гликокаликса. На наружной поверхности мембраны расположены фосфолипиды, сиаловая кислота, антигенные олигосахариды, адсорбированные протеины. На внутренней - гликолитические ферменты, Na+-АТФазы и K+-АТФазы, гликопротеины и цитоскелетные белки.

В состав липидов внешнего слоя плазмолеммы входят фосфатидилхолин и сфингомиелин, содержащие холин, а внутреннего – фосфатидилсерин и фосфатидилэтаноламин, которые на конце молекулы несут аминогруппу. С внешней стороны имеются гликолипиды (5%). К трансмембранным гликопротеинам относится гликофорин. Его 16 олигосахаридных цепей располагаются в гликокаликсе. Среди них сиаловая кислота обеспечивает отрицательный заряд наружной поверхности мембраны зрелых эритроцитов. Это позволяет выходить зрелым клеткам из красного костного мозга. С гликофоринами связывают антигенные свойства различных групп крови.

Примембранный белок спектрин входит в состав цитоскелета и участвует в поддержании формы эритроцита. Спектрин вместе с другим белком – актином связаны белком полосы 4.1 в «узловой комплекс», который соединен с белком гликофорином. Изменение количества спектрина приводит к изменению формы эритроцита (сфероциты).

С плазмолеммой спектриновый цитоскелет связан другим белком – анкирином в зоне локализации трансмембранного белка полосы 3, который участвует в обмене О2 и СО2. Он формирует также гидрофильные «поры» – водные ионные каналы.

Состав цитоплазмы эритроцитов: Вода – 66%, гемоглобин – 33% (гем в нём составляет – 4%).

При различных патологических состояниях эритроциты могут подвергаться:

1. склеиванию, образуя монетные столбики (вследствие утраты заряда, обеспечивающего поверхностное натяжение);

2. гемолизу (при воздействии гипотоническим раствором, плазмой других видов, змеиным ядом гемоглобин поступает в плазму, при этом оболочка остаётся неповрежденной);

3. кренированию – сморщиванию (при воздействии гипертоническим раствором); от греч. сrеnа – вырезка;

Стареющие эритроциты фагоцитируются макрофагами. Продолжительность жизни эритроцитов 120 дней

Лейкоциты. В отличие от эритроцитов, «работающих» непосредственно в крови, лейкоциты «работают» в тканях тела, мигрируя (путем диапедеза) через стенки капилляров. Это ядросодержащие клетки.

Лейкоциты классифицируют на зернистые (гранулоциты) и незернистые (агранулоциты).

Гранулоциты. Своё название зернистые лейкоциты (гранулоциты) получили в связи с неоднозначностью окрашиваемости их гранул красителями при разных значениях рН среды, в связи с чем различают базофильные, эозинофильные и нейтрофильные зернистые лейкоциты.

Базофилы – клетки шаровидной формы, диаметром до 10–12 мкм. Ядро имеет лопастную или бобовидную форму (в зависимости от степени зрелости клеток). В их базофильной цитоплазме содержатся довольно крупные гранулы, окрашивающиеся основными красителями. Одной из особенностей содержимого гранул базофилов является метахроматическое их окрашивание красителями тиазинового ряда (метиленовый синий, толуидиновый синий и др., при этом вместо синей окраски гранулы приобретают фиолетовый, розовый или красный цвет).

В гранулах базофилов содержатся биологически активные вещества: протеогликаны, ГАГ (в том числе гепарин), вазоактивный гистамин, нейтральные протеазы, серотонин, пероксидазы, кислая фосфатаза, серотонин (гормон эпифиза, который ослабляет или угнетает секрецию гонадолиберинов в гипоталамусе), гистидиндекарбоксилаза (фермент синтеза гистамина) и др.

Функции базофилов . Базофилы могут фагоцитировать бактерии, препятствуют свёртыванию крови (гепарин), способствуют расширению сосудов и повышают проницаемость их стенки (гистамин), вследствие чего возникают отёки. Они опосредуют воспаление, активируют макрофаги, участвуют в иммунологических реакциях аллергического характера: секретируют эозинофильный хемотаксический фактор, который стимулирет миграцию эозинофилов. При астме, анафилаксии, сыпи наблюдается немедленного типа дегрануляция, пусковым механизмом которой является IgE-рецептор для IgE. Вместе с тучными клетками участвуют в антисвёртывающей системе крови и регуляции проницаемости стенки сосудов, вместе с нейтрофилами образуют биологически активные метаболиты арахидоновой кислоты – лейкотриены и простагландины. Базофильные гранулоциты не являются активными индукторами в развитии гиперчувствительности замедленного типа.

В периферической крови базофилы пребывают примерно 1-2 суток, а затем мигрируют в межклеточное вещество соединительной ткани, где продолжительность их жизни не велика.

Эозинофилы . Размеры этих клеток достигают 12-17 мкм. Ядро зрелых клеток обычно содержит 2 сегмента, но у овец – больше. Очень редко встречаются палочкоядерные и юные эозинофилы. Гранулы в цитоплазме довольно крупные. Различают две их разновидности: первичные азурофильные и вторичные – эозинофильные (модифицированные лизосомы). В центре эозинофильной гранулы содержится кристаллоид, который содержит главный основной белок, богатый аргинином, катионный белок, лизосомные гидролитические ферменты, пероксидазу, гистаминазу и др. Пероксидазная активность эозинофильных гранулоцитов не связана с пресутствием миелопероксидазы, которая строго специфична для системы нейтрофильных гранулоцитов.

В аллергических реакциях принимают участие Fс-рецептор плазмолеммы для IgE, а также С3- и С4– рецепторы.

Эозинофильные гранулоциты в крови находятся около 12-ти часов, а затем мигрируют в межклеточное вещество соединительной ткани, где функционируют до 8-12 суток (в соед. ткани их в 500 раз больше, чем в крови). Пероксидазная активность эозинофильных гранулоцитов не связана с пресутствием миелопероксидазы, которая строго специфична для системы нейтрофильных гранулоцитов.

Нейтрофилы . Размеры этих клеток варьируют в пределах 9–12 мкм. Форма ядра непостоянна и зависит от степени зрелости клеток. В связи с этим различают юные, палочкоядерные и сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты. У юных нейтрофилов ядро имеет бобовидную форму, гранул в цитоплазме относительно не много. Ядра палочкоядерных нейтрофилов выглядят в виде в разной степени изогнутой палочки, а в зрелых клетках – оно фрагментировано на сегменты, соединенные между собой тонкими перемычками. В цитоплазме нейтрофилов содержится 2 вида гранул:

1) первичные азурофильные неспецифичные (ПАН), их размеры - 0,4-0,8 мкм (до 20%), представляют собой первичные лизосомы, содержащие ß-глюкуронидазу, кислую ß-глицерофосфатдегидрогеназу, кислую протеазу, лизоцим (мурамидазу), кислую фосфатазу, миелопероксидазу (превращает перекись водорода в молекулярный кислород).

2) вторичные нейтрофильные специфические гранулы (ВНС), размеры которых составляют 0,1-0,3 мкм; они содержат щёлочную фосфатазу, фагоцитины, аминопептидазы, лизоцим, катионные белки и белок лактоферрин, обеспечивающий склеивание бактерий (бактериальная мультипликация) и торможение образования лейкоцитов в красном костном мозге.

Описание нейтрофильных гранулоцитов следует дополнить современными данными о третичных гранулах, секреторных пузырьках и адгезивных молекулах.

Функция нейтрофилов – неспецифическая антибактериальная защита путём фагоцитоза и выделения бактерицидных веществ, участие в воспалительных реакциях (осуществляется вне сосудов, в межклеточном веществе соединительных тканей). В образовании эндогенного пирогена, который теперь идентифицирован как интерлейкин-1, нейтрофильные гранулоциты не участвуют, его продуцируют клетки моноцитарно-макрофагальной системы. В крови они находятся до 8-12 часов, а в тканях - до 9 суток, где они погибают.

Агранулоциты . К незернистым лейкоцитам относятся лимфоциты и моноциты. Обе эти группы клеток принимают активное участие в иммунных реакциях организма. Иммунитет - это способ защиты организма от живых тел и веществ, несущих на себе признаки генетической чужеродности.

Лимфоциты . По степени зрелости лимфоциты делятся на большие (10 мкм), средние ((7-10 мкм) и малые (4,5-6 мкм). Зрелыми являются малые лимфоциты. Они содержат крупное круглое с небольшим вдавлением ядро, занимающее почти всю клетку. Оно окружено узким ободком базофильной цитоплазмы. По происхождению и функциональным свойствам различают 4 основные группы лимфоцитов: В-лимфоциты, Т-лимфоциты, натуральные киллеры (NK) и К-клетки. Все они участвуют в обеспечении иммунных реакций, защите от всего чужеродного, попадающего извне и образующегося в самом организме.

В-лимфоциты Образуются в лимфатических узлах и осуществляют специфический гуморальный иммунитет (поставляют антитела в кровь, лимфу и тканевую жидкость). На поверхности плазмолеммы В-лимфоцитов имеются антигенспецифические рецепторы, представляющие собой антитела – иммуноглобулины (Ig) классов M и D, или поверхностные иммуноглобулины (SIg). Распознаваемые рецепторами антигены присоединяются к ним, вследствие чего В-лимфоциты активируются, многократно пролиферируют и дифференцируются в эффекторные клетки – плазмоциты, или антителообразующие клетки (АОК), способные вырабатывать антитела (иммуноглобулины). Антитела на своей поверхности имеют связующие участки к данному конкретному антигену.

Процесс активации лимфоцитов можно представить в следующей последовательности: Активированный В-лимфоцит → плазмобласт (диаметр до 30 мкм) → проплазмоцит → зрелый плазмоцит (диаметр около 10 мкм).

В-лимфоциты – живут от нескольких недель до десятков месяцев.

Т-лимфоциты, натуральные киллеры ( NK ) и К-клетки образуются в тимусе. Они осуществляют реакции специфического клеточного иммунитета и регулируют гуморальный иммунитет. В плазмолемме Т-лимфоцитов содержатся поверхностные антигенные маркеры (антигены гистосовместимости) и много рецепторов, с помощью которых они распознают чужеродные антигены и иммунные комплексы. После встречи с антигенами Т-лимфоциты превращаются в Т-эффекторы: Т-киллеры, Т-хелперы и Т-супрессоры.

Эффекторные клетки Т-лимфоцитов Т-киллеры (цитотоксические) – обеспечивают клеточный иммунитет. Обладая цитотоксическим эффектом, они взаимодействуют с клетками-мишенями вследствие непосредственного с ними контакта или благодаря вырабатываемым ими близкодействующим токсическим медиаторам. В результате такого взаимодействия изменяется проницаемость мембраны клетки-мишени, что и приводит её к гибели.

При действии антигенов в Т-лимфоцитах вырабатываются особые растворимые вещества лимфокины, которые передают информацию об антигенах В-лимфоцитам.

Т-хелперы являются помощниками В-лимфоцитов, они распознают антиген и усиливают выработку антител; Т-супрессоры, наоборот, подавляют выработку антител В-лимфоцитами.

Продолжительность жизни Т-лимфоцитов до 10 лет.

В последнее время в научных публикациях (Г. М.Могильная и соавт., 2002) указывается, что следует ввести принятую иммунологами классификацию Т-лимфоцитов, которая основывается на определении с помощью иммунноцитохимии поверхностных дифференцировочных антигенов (cluster of differentiation - CD).

Тимус покидают две субпопуляции нативных Т-лимфоцитов с антигеном CD23. Т-хелперы маркируются антигеном CD4, а Т-киллеры - CD8. Установлено, что в ходе иммунного ответа CD4+ Т-хелперы (ThO) дают начало двум субпопуляциям Th1- и Th2-хелперов с преобладанием одной из них в зависимости от внутри - или внеклеточной локализации возбудителя, или от особенностей антигена. Путём продукции различных наборов цитокинов Th1 (интерферон гама, фактор некроза опухолей-альфа, лимфотоксин, интерлейкин-2) и Th2 (интерлейкины -4, -5, -6, -10, -13 и трансформирующий фактор роста - бета) регулируют развитие иммунного воспаления. Т-лимфоциты гиперчувствительности относятся к классу Th1-хелперов, поэтому их не обязательно выделять в отдельную клеточную форму. Стоит отметить, что после контакта с антигеном и синтеза цитотоксинов (перфорин, гранзимы) CD8+ Т-киллер получает название цитотоксического Т-лимфоцита (ЦТЛ).

В процессе локального контакта ЦТЛ с клеткой-мишенью происходит строгая направленность выброса цитотоксинов в зону пространственной связи Т-клеточного рецептора и антигена. Помимо этого, наблюдается осмотический лизис клетки, обусловленный самостоятельным эффектом перфорина, что ведёт к освобождению и рассеиванию внутриклеточно локализованного возбудителя. Целесообразно указать, что гибель клетки-мишени путём апоптоза, наступающая при сочетанном воздействии перфорина и гранзимов, биологически целесообразна, поскольку она ведёт к мембранной изоляции деградированного возбудителя или другого антигена.

Т - и В-клетки памяти – лимфоциты, возвращающиеся в неактивное состояние, но уже приобретшие информацию (память) от встречи с конкретным антигеном. При повторной встрече с этим антигеном они быстро обеспечивают иммунный ответ значительной интенсивности.

Т - и В-лимфоциты в сосудистом русле – в функциональном плане относительно неактивны. Их активация осуществляется антигенами, в результате чего эти клетки превращаются в эффекторные формы клеточного и гуморального иммунитета, за счёт чего увеличивается фонд клеток памяти.

Моноциты – довольно крупные клетки, в мазке крови их размеры достигают 15-20 мкм. Содержат крупные ядра лопастной, бобовидной и иной формы. Цитоплазма базофильна. Не смотря на то, что эти клетки относятся к агранулоцитам, в их цитоплазме могут обнаруживаться в небольшом количестве мелкие азурофильные гранулы, представляющие собой лизосомы. В функциональном плане – это типичные макрофаги, которые в периферическом русле крови находятся по пути из красного костного мозга в ткани, где они выполняют специфические защитные функции.

Процентное соотношение различных видов лейкоцитов в периферическом кровеносном русле (лейкоцитарная формула) у разных видов животных варьирует (табл. 2):

Таблица 2. Лейкоцитарная формула (в %)

Примечание : Б – Базофильный гранулоцит ; Э – Эозинофильный гранулоцит; Ю – Юный нейтрофильный гранулоцит ; П – Палочкоядерный нейтрофильный гранулоцит; С – Сегментоядерный нейтрофильный гранулоцит.

Как явствует из таблицы, у одних видов животных среди лейкоцитов преобладающими являются лимфоциты, а у других – зернистые лейкоциты.

Таким образом, в периферической крови циркулирует целый ряд клеток, которые обладают специфическими функциями, направленными на обеспечение защиты организма от чужеродных факторов (антигенов). К таковым относятся различные популяции лимфоцитов, потомки моноцитов – макрофаги и зернистые лейкоциты.

Кровяные пластинки. Кровяные пластинки. У млекопитающих – это обломки цитоплазмы мегакариоцитов. У птиц - это ядросодержащие клетки – тромбоциты. Размеры кровяных пластинок варьируют в пределах 2-4 мкм. Они состоят из периферической зоны – гиаломера и центральной - грануломера. Гиаломер в молодых кровяных пластинках окрашивается базофильно, а в старых – оксифильно. В гиаломере есть актин, который участвует в ретракции (уменьшении объёма) кровяных пластинок.

На поверхности плазмолеммы кровяных пластинок содержится гликоликс, гликопротеины которого представляют рецепторы, принимающие участие в адгезии и агрегации кровяных пластинок (агрегация пластинок - их склеивание).

По степени зрелости различают 5 видов кровяных пластинок: юные, зрелые, старые, дегенеративные и гигантские формы раздражения.

Функция кровяных пластинок : в них содержится примерно 12 факторов свёртывания крови. Они принимают участие в коагуляции фибриногена: фибрин → протромбин → тромбин.

В плазме крови содержится фактор свёртывания фон Виллебранда (vWF), к которому в плазмолемме кровяных пластинок имеется специальный рецептор P Ib. Другой рецептор P IIb – IIIа связывает фибриноген, вследствие чего кровяные пластинки агрегируют.

Кроме того, тубулярная система цитоплазмы кровяных пластинок синтезирует циклоксигеназы и простагландины. Она является также резервуаром для ионов Са.

Тромбоциты птиц и пресмыкающихся выполняют аналогичные функции.

Переливание крови или гемотрансфузия - разновидность инфузионной терапии, в процессе которой от донора к реципиенту переливается либо цельная кровь, либо ее отдельные компоненты (фракции).

Для переливания используется:

• Цельная кровь с консервантом для предотвращения внесосудистого свертывания (чаще всего, это цитрат натрия, в пропорции 4:1). Кровь забирается у донора в стерильный сосуд, где смешивается с цитратом и дополнительно с изотоническим раствором натрия хлорида. Не допускается применение любых других растворов (глюкозы, Рингера, Рингера-Локка и т. д.).
• Отдельные фракции форменных элементов (тромбоцитарная, эритроцитарная массы, плазма). При этом нужная фракция отделяется при помощи сепарирования, смешивается с изотоническим раствором натрия хлорида и вводится в организм.

Слева кровь реципиента, справа кровь реципиента и донора. Хорошо видна разница в количестве форменных элементов.

К сожалению, альтернативы человеческим банкам крови в ветеринарии пока не существует, поэтому зачастую владельцы и сами ветеринарные врачи вынуждены искать доноров самостоятельно. Далеко не каждое животное способно стать донором.

К донорству допускаются животные, удовлетворяющие следующим условиям:

• возраст 2-6 лет;
• у кошек, вес не менее 3 кг, у собак - не менее 15 кг;
• наличие действующих прививок;
• отсутствие хронических заболеваний, носительства вирусных, бактериальных инфекций (подтверждается лабораторно);
• удовлетворительное клиническое состояние;
• с гематокритом не менее 40;

При этом важно помнить, что кровь донора для реципиента является чужеродным биологическим материалом, именно поэтому нужно:

1. Профилактировать возникновение аллергической реакции, гемотрансфузионного шока.

Для этого перед процедурой переливания проводится десенсибилизирующая терапия в виде введения средств, снижающих аллергический ответ (кальция глюконат, дексаметазон) за 10-15 минут до начала процедуры. Стоит отметить, что чаще всего аллергическая реакция немедленного типа (крапивница, аллергический отек морды, шеи, подгрудка, чихание и кашель со слизистыми выделениями из глаз) развивается вовсе не на кровь реципиента, а на консервант (т. н. цитратный шок)

2. Предупредить возможную несовместимость крови донора и реципиента

Стоит заметить, что у собак процент возникновения несовместимости крови донора и реципиента при первом переливании крайне мал засчет того, что в кровотоке пока не образовалось специфически антител, которые запускают процесс активизации иммунной реакции. А вот при повторном и последующих переливаниях у собак,и при любом переливании крови у кошек необходимо проводить так называемую перекрестную пробу.

Суть пробы заключается в следующем: в отдельной небольшой емкости смешивается сыворотка донора и форменные элементы реципиента, или наоборот. После этого все аккуратно перемешивается. Через 5-7 минут производится учет реакции: если форменные элементы схватились в тугой ком (гемагглютинация), либо наоборот, «расплавились» в сыворотке,окрасив ее в слабо-красный (гемолиз), кровь донора считается неподходящей для реципиента по причине несовместимости. В случае полного равномерного смешивания кровь считается совместимой.

Нужное количество крови для реципиента рассчитывается, исходя из показателей общего анализа крови, а именно, из числа гематокрита. Общепризнанным является тот факт, что для восстановления 1 % гематокрита реципиенту необходимо перелить 1-5 мл цельной крови X вес в килограммах.

Забор крови у донора, как правило, осуществляется непосредственно перед переливанием ее реципиенту (исключением является плазма, ее можно замораживать на срок до 15-20 суток). Для забора крови чаще всего используется яремная вена, иногда - периферические вены. Если процедура забора крови для донора является излишне психотравмирующей, ему проводят седацию (чаще всего, кошкам).

Процедура переливания подразумевает под собой длительное нахождение животного в стационарных условиях, так как скорость гемотрансфузии регулируется в соответствии с состоянием пациента и длительность процедуры может достигать 8-12 часов. При этом смесь для гемотрансфузии периодически слегка подогревается, для облегчения восприятия материала, а также для профилактики температурного шока.

В дальнейшем минимум через неделю,максимум через пару недель (7-21 день, в зависимости от массивности гемотрансфузии и изначальной тяжести состояния) производится контрольный анализ крови для определения результата.

Зачастую переливание крови - процедура неоднократная. В среднем, для восстановления животного после тяжелой анемии требуется от 3 до 5 переливаний. Частота гемотрансфузий, их объем рассчитываются индивидуально в каждом отдельно взятом случае.

При соблюдении техники, правил переливания крови, а также мер предосторожности это относительно безопасная процедура, аналогов которой пока нет ни в ветеринарной, ни в гуманитарной медицине.

Клинический случай

Собака породы стаффордширский бультерьер по кличке Тофа в возрасте 8 лет.

Фото 1. Собака была настолько слаба, что сама не ходила, но на переливании начала оживать. Стоит обратить внимание, для гемотрансфузии используется специальная система с фильтром в камере,чтобы мелкодисперсные сгустки не проходили в трубочку.

Фото 2. Пациент на гемотрансфузии вел себя спокойно, переносимость процедуры была отличная, наблюдались общие симптомы в виде гипертермии, небольшой одышки, покраснения слизистых. Симптомов аллергической реакции не проявилось во многом благодаря предварительной десенсибилизирующей терапии

Первичный общий анализ крови Тофы, измененные показатели и нормы:

RBC (эритроциты) 1,39X10^12/L при норме 5,50-8,50

HCT (гематокрит) 9,6 % при норме 37-55

HGB (гемоглобин) не определяется

WBC (лейкоциты) 0,24X10^12/L при норме 5,5-16,9

PLT (тромбоциты) 150 k/µL при норме 170-500

Первичный биохимический анализ крови Тофы, измененные показатели и нормы:

UREA (мочевина) 16,8 mmol/L при норме 2,5-9,6

СREA (креатинин) 335 µmol/L при норме 44-159

Активную детоксикационную терапию ввиду малого количества эритроцитов проводить было нельзя, во избежании усиления гипоксического синдрома. Было решено провести пробную гемотрансфузию в 2 этапа: в день забора крови и через пару дней. Большой объем крови, разбитый на два призван был снизить нагрузку на все системы организма, особенно на мочетоделительную.

В первое переливание собаки было введено около 150 мл цельной крови, что соответствует восстановлению около 7 ед. гематокрита. При повторном, основном переливании пациенту ввели в общей сложности около 400 мл цельной крови.

В перерывах между гемотрансфузиями собаке вводили растворы подкожно и капельно внутривенно, проводилась симптоматическая терапия, была назначена диета. Промежуточный контроль осуществляемого лечения проводился по биохимическим показателям, а также опираясь на самочувствие животного, которое значительно улучшилось через неделю после второй гемотрансфузии.

Контрольные анализы крови удалось сделать лишь через пару месяцев:

Контрольный общий анализ крови Тофы, измененные показатели и нормы:

RBC (эритроциты) 7,66X10^12/L при норме 5,50-8,50

HCT (гематокрит) 55 % при норме 37-55

HGB (гемоглобин) 17,6

WBC (лейкоциты) 6,0X10^12/L при норме 5,5-16,9

PLT (тромбоциты) 313 k/µL при норме 170-500

Контрольный биохимический анализ крови Тофы, измененные показатели и нормы:

UREA (мочевина) 7,2mmol/L при норме 2,5-9,6

СREA (креатинин) 220 µmol/L при норме 44-159

В последствие Тофа порадовала нас длительной ремиссией и, несмотря на то, что почечная недостаточность, это заболевание, которое полностью не излечивается, собака получила благоприятный прогноз.

Биохимический анализ крови.

Биохимический анализ крови – это метод лабораторной диагностики, позволяющий оценить работу многих внутренних органов. Стандартный биохимический анализ крови включает определение ряда показателей, отражающих состояние белкового, углеводного, липидного и минерального обмена, а также активность некоторых ключевых ферментов сыворотки крови.

На исследование берут кровь строго натощак в пробирку с активатором свертывания, исследуют сыворотку крови.

• Общие биохимические показатели.

Общий белок.

Общий белок – это общая концентрация всех белков крови. Существуют различные классификации белков плазмы. Наиболее часто их разделяют на альбумин, глобулины (все другие белки плазмы) и фибриноген. Концентрация общего белка и альбумина определяется с помощью биохимического анализа, а концентрация глобулинов путем вычитания концентрации альбумина из общего белка.

Повышение:

— дегидратация,

— воспалительные процессы,

— тканевые повреждения,

— заболевания, сопровождающиеся активацией иммунной системы (аутоиммунные и аллергические заболевания, хронические инфекции и т.д.),

— беременность.

Ложное завышение белка может происходить при липемии (хилез), гипербилирубинемии, значительной гемоглобинемии (гемолиз).

Понижение:

— гипергидратация,

— кровотечение,

— нефропатия

— энтеропатия,

— сильная экссудация,

— асцит, плеврит,

— недостаток белка в пище,

— длительные хронические болезни, характеризующиеся истощением иммунной системы (инфекции, новообразования),

— лечение цитостатиками, иммунодепресантами, глюкокортикостероидами и др.

При кровотечении концентрация альбумина и глобулинов падает параллельно, однако при некоторых расстройствах, сопровождающихся потерей белка, снижается преимущественно содержание альбумина, так как размер его молекул меньше по сравнению с другими белками плазмы.

Нормальное значение

Собака 55-75 г/л

Кошка 54-79 г/л

Альбумин

Гомогенный белок плазмы, содержащий небольшое количество углеводов. Важной биологической функцией альбумина в плазме является поддержание внутрисосудистого коллоидно-осмотического давления, благодаря чему предотвращается выход плазмы из капилляров. Поэтому существенное снижение уровня альбумина приводит к появлению отеков и выпотов в плевральную или брюшную полости. Альбумин служит молекулой – переносчиком, транспортируя билирубин, жирные кислоты, лекарственные средства, свободные катионы (кальций, медь, цинк), некоторые гормоны, различные токсические агенты. Так же собирает свободные радикалы, связывает медиаторы воспалительных процессов, представляющих опасность для тканей.

Повышение:

— дегидратация

Расстройства, которые сопровождались бы усилением синтеза альбумина, не известны.

Понижение:

— гипергидратация;

— кровотечение,

— нефропатии и энтеропатии,

— сильная экссудация (например, ожоги);

— хроническая недостаточность печени,

— недостаток белка в пище,

— синдром мальабсорбции,

— недостаточность экзокринной функции поджелудочной железы

Нормальное значение

Собака 25-39 г/л

Кошка 24-38 г/л

Билирубин.

Билирубин продуцируется в макрофагах путем ферментативного катаболизма фракции гема из различных гемпротеидов. Большая часть циркулирующего билирубина (около 80%) образуется из «старых» эритроцитов. Погибшие «старые» эритроциты разрушаются ретикулоэндотелиальными клетками. При окислении гема образуется биливердин, который метаболизируется до билирубина. Оставшаяся часть циркулирующего билирубина (около 20%) образуется из других источников (разрушение зрелых эритроцитов в костном мозге, содержащих гем, миоглобин мышц, ферменты). Образованный таким образом билирубин циркулирует в кровотоке, транспортируясь в печень в форме растворимого билирубин-альбуминового комплекса. Связанный с альбумином билирубин может быть легко извлечен из крови печенью. В печени билирубин связывается с глюкуроновой кислотой под влиянием глюкуронилтрансфераз. Связанный билирубин включает билирубин-моноглюкуронид, который преобладает в печени, и билирубин-диглюкуронид, который преобладает в желчи. Связанный билирубин транспортируется в желчные капилляры, откуда он поступает в желчевыводящие пути, а затем в кишечник. В кишечнике связанный билирубин подвергается ряду превращений с формированием уробилиногена и стеркобилиногена. Стеркобилиноген и небольшое количество уробилиногена выводятся с фекалиями. Основное количество уробилиногена вторично всасывается в кишечнике, достигая печени через портальное кровообращение и реэкскретируясь желчным пузырем.

Уровни сывороточного билирубина растут тогда, когда его продукция превышает его метаболизм и выведение из организма. Клинически гипербилирубинемия выражается желтухой (желтая пигментация кожи и склер).

Прямой билирубин

Это связанный билирубин, растворимый и с высокой реакционной способностью. Повышение уровня прямого билирубина в сыворотке крови связано с пониженной экскрецией конъюгированного пигмента из печени и желчевыводящих путей и проявляется в виде холестатической или гепатоцеллюлярной желтухи. Патологический рост уровня прямого билирубина ведет к появлению этого пигмента в моче. Поскольку непрямой билирубин не выводится мочой, наличие билирубина в моче подчеркивает увеличение в сыворотке крови уровня связанного билирубина.

Непрямой билирубин

Сывороточная концентрация неконъюгированного билирубина обусловлена скоростью, с которой вновь синтезированный билирубин проникает в плазму крови и скоростью элиминации билирубина печенью (печеночный клиренс билирубина).

Непрямой билирубин вычисляется расчетным способом:

непрямой билирубин = общий билирубин - прямой билирубин.

Повышение

— ускоренное разрушение эритроцитов (гемолитическая желтуха),

— гепатоцеллюлярное заболевание (печеночное и внепеченочное происхождение).

Хилез может обусловить ложно завышенную величину содержания билирубина, что следует учитывать, если высокий уровень билирубина определяется у пациента в отсутствии желтухи. «Хилезная» сыворотка крови приобретает белый цвет, что связано с повышенной концентрацией хиломикронов и\или липопротеинов очень низкой плотности. Чаще всего хилез является результатом недавнего приема пищи, однако у собак ее могут вызывать такие заболевания как сахарный диабет, панкреатит, гипотиреоз.

Понижение

Клинического значение не имеет.

Нормальное значение:

Билирубин общий

Собака – 2.0-13.5 мкмоль/л

Кошка – 2.0-10.0 мкмоль/л

Билирубин прямой

Собака – 0-5.5 мкмоль/л

Кошка – 0-5.5 мкмоль/л

Аланинаминотрансфераза (АЛТ)

АЛТ – эндогенный фермент из группы трансфераз, широко используемый в медицинской и ветеринарной практике для лабораторной диагностики повреждений печени. Синтезируется внутриклеточно, и в норме лишь небольшая часть этого фермента попадает в кровь. Если энергетический метаболизм клеток печени нарушается инфекционными факторами (например, вирусный гепатит) или токсическими, то это приводит к увеличению проницаемости клеточных мембран с прохождением в сыворотку компонентов цитоплазмы (цитолиз). АЛТ является показателем цитолиза, самым изученным и самым показательным даже для обнаружения минимальных поражений печени. АЛТ является более специфичным для нарушений печени, чем АСТ. Абсолютные значения AЛT все же не коррелируют напрямую с тяжестью повреждений печени и с прогнозированием развития патологического процесса, и поэтому наиболее целесообразным являются серийные определения АЛТ в динамике.

Повышено:

— повреждение печени

— применение гепатотоксичных препаратов

Понижено:

— дефицит пиридоксина

— повторный гемодиализ

— иногда при беременности

Нормальное значение:

Собака 10-58 ед/л

Кошка 18-79 ед/л

Аспартатаминотрансфераза (АСТ)

Аспартатаминотрансфераза (АСТ) - эндогенный фермент из группы трансфераз. В отличие от АЛТ, который встречается, главным образом, в печени, АСТ присутствует во многих тканях: миокарде, печени, скелетных мышцах, почках, поджелудочной железе, ткани мозга, селезенке, являясь менее характерным показателем функции печени. На уровне клеток печени изоферменты АСТ находятся как в цитозоле, так и в митохондриях.

Повышено:

— Токсический и вирусный гепатит

— Некроз ткани печени

— Острый инфаркт миокарда

— Введение опиоидов пациентам с заболеваниями желчных путей

Увеличение и быстрое снижение предполагает обструкцию желчных внепеченочных путей.

Понижено:

— Азотемия

Нормальное значение:

Собака – 8-42 ед/л

Кошка – 9-45 ед/л

Повышение АЛТ, превышающее повышение АСТ, характерно для повреждения печени; если же показатель АСТ повышается больше, чем повышается АЛТ, то это, как правило, свидетельствует о проблемах клеток миокарда (сердечной мышцы).

γ — глутамилтрансфераза (ГГТ)

ГГТ – это фермент, локализованный на мембране клеток различных тканей, катализирующий реакцию трансаминирования или переаминирования аминокислот в процессе их катаболизма и биосинтеза. Фермент переносит γ- глутамил с аминокислот, пептидов и других веществ на акцепторные молекулы. Эта реакция обратима. Таким образом, ГГТ участвует в транспорте аминокислот через клеточную мембрану. Поэтому наибольшее содержание фермента отмечается в мембране клеток с высокой секреторной и абсорбционной способностью: печеночные канальцы, эпителий желчных путей, канальцы нефрона, эпителий ворсинок тонкой кишки, панкреатические экзокринные клетки.

Так как ГГТ ассоциирована с эпителиальными клетками системы желчных протоков, она имеет диагностическое значение при нарушении функции печени.

Повышено:

— желчнокаменная болезнь

— у собак при повышении концентрации глюкортикостероидов

— гипертиреоз

— гепатиты вне- или внутрипеченочного происхождения, неоплазии печени,

— острый панкреатит, рак поджелудочной железы

— обострение хронического гломерулонефрита и пиелонефрита,

Понижено:

Нормальное значение

Собака 0-8 ед/л

Кошка 0-8 ед/л

В отличие от АЛТ, которая содержится в цитозоле гепатоцитов и поэтому является чувствительным маркером нарушения целостности клеток, ГГТ обнаруживается исключительно в митохондриях и высвобождается только при значительном повреждении ткани. В отличие от человека, противосудорожные препараты, применяемые у собак, не взывают повышение активности ГГТ или оно минимально. У кошек при липидозе печени активность ЩФ повышается в большей степени, чем ГГТ. Молозиво и грудное молоко в ранние сроки кормления содержат высокую активность ГГТ, поэтому у новорожденных уровень ГГТ повышен.

Щелочная фосфатаза.

Этот фермент обнаруживается главным образом в печени (желчные канальцы и эпителий желчных протоков), канальцах почек, тонком кишечнике, костях и плаценте. Это связанный с мембраной клеток фермент, катализирующий щелочной гидролиз самых разнообразных веществ, в ходе которого происходит отщепление остатка фосфорной кислоты от ее органических соединений.

Общая активность ЩФ в циркулирующей крови здоровых животных складывается из активности печеночных и костных изоферментов. Доля активности костных изоферментов наиболее велика у растущих животных, в то время как у взрослых их активность может увеличиваться при опухолях костей.

Повышение:

— нарушение тока желчи (холестатическое гепатобилиарное заболевание),

— нодулярная гиперплазия печени (развивается при старении),

— холестаз,

— повышение активности остеобластов (в молодом возрасте),

— заболевания костной системы (опухоли костей, остеомаляция др.)

— беременность (повышение ЩФ во время беременности происходит за счет плацентарного изофермента).

— У кошек может быть связано с печеночным липидозом.

Понижение:

— гипотиреоз,

— гиповитаминоз С.

Нормальное значение

Собака 10-70 ед/л

Кошка 0-55 ед/л

Альфа – амилаза

Амилаза - гидролитический фермент, участвующий в расщеплении углеводов. Амилаза образуется в слюнных железах и поджелудочной железе, затем поступает в полость рта или просвет двенадцатиперстной кишки соответственно. Значительно более низкой амилазной активностью обладают также такие органы как яичники, фаллопиевы трубы, тонкий и толстый кишечник, печень. В сыворотке крови выделяют панкреатический и слюнной изоферменты амилазы. Выводится фермент почками. Следовательно, увеличение сывороточной активности амилазы приводит к повышению активности амилазы в моче. Амилаза может образовывать крупные по размеру комплексы с иммуноглобулинами и другими белками плазмы, что не позволяет ей проходить через почечные клубочки, в результате чего содержание её в сыворотке возрастает, а в моче активность амилазы наблюдается нормальная.

Повышено:

— Панкреатит (острый, хронический, реактивный).

— Новообразования поджелудочной железы.

— Закупорка протока поджелудочной железы (опухолью, камнем, спайками).

— Острый перитонит.

— Сахарный диабет (кетоацидоз).

— Заболевания желчных путей (холелитиаз, холецистит).

— Почечная недостаточность.

— Травматические поражения брюшной полости.

Понижено:

— Острый и хронический гепатит.

— Панкреонекроз.

— Тиреотоксикоз.

— Инфаркт миокарда.

Нормальные значения:

Собака – 300-1500 ед./л

Кошка – 500-1200 ед./л

Панкреатическая амилаза.

Амилаза – фермент катализирующий расщепление (гидролиз) сложных углеводов (крахмала, гликогена и некоторых других) до дисахаридов и олигосахаридов (мальтоза, глюкоза). У животных значительная часть амилазной активности обусловлена слизистой тонкого кишечника и другими внепанкреатическими источниками. С участием амилазы в тонком кишечнике завершается процесс переваривания углеводов. Разнообразные нарушения процессов в ацинозных клетках экзокринной части поджелудочной железы, повышение проницаемости протока поджелудочной железы и преждевременная активация ферментов приводят к «утечке» ферментов внутри органа.

Повышение:

— почечная недостаточность

— тяжелые воспалительные заболевания кишечника (прободение тонкого кишечника, завороты),

— продолжительное лечение глюкокортикостероидами.

Понижение :

— воспаление,

— некроз или опухоль поджелудочной железы.

Нормальное значение

Собака 243,6-866,2 ед/л

Кошка 150,0-503,5 ед/л

Глюкоза.

Глюкоза – основной источник энергии в организме. В составе углеводов глюкоза поступает в организм с пищей и всасывается в кровь из тощей кишки. Так же она может синтезироваться организмом в основном в печени и почках из неуглеводных компонентов. Потребность в глюкозе имеют все органы, но особенно много глюкозы используется тканями мозга и эритроцитами. Печень регулирует уровень глюкозы в крови посредством гликогенеза, гликолиза и глюконеогенеза. В печени и мышцах глюкоза запасается в виде гликогена, который используется для поддержания физиологической концентрации глюкозы в крови, прежде всего в промежутках между приемами пищи. Глюкоза является единственным источником энергии для работы скелетной мышцы в анаэробных условиях. Основными гормонами, влияющими на гомеостаз глюкозы, являются инсулин и дерегулирующие гормоны – глюкагон, катехоламины и кортизол.

Повышение:

— недостаточность инсулина или резистентность тканей к инсулину,

— опухоли гипофиза (встречается у кошек),

— острый панкреатит,

— почечная недостаточность,

— прием некоторых лекарственных средств (глюкокортикостероиды, тиазидные диуретики, внутривенное введение жидкостей, содержащих глюкозу, прогестины и др.),

— тяжелая гипотермия.

Кратковременная гипергликемия возможна при травмах головы и поражениях ЦНС.

Понижение:

— опухоль поджелудочной железы (инсулинома),

— гипофункция эндокринных органов (гипокортицизм);

— печеночная недостаточность,

— цирроз печени;

— продолжительное голодание и анорексия;

— врожденные портосистемные шунты;

— идиопатическая ювенильная гипогликемия у собак мелких и охотничьих пород,

— передозировка инсулином,

— тепловой удар

При продолжительном контакте сыворотки крови с эритроцитами возможно падение глюкозы, так как эритроциты активно ее потребляют, поэтому кровь желательно как можно быстрее отцентрифугировать. Содержание глюкозы в неотцентрифугированной крови снижается приблизительно на 10 % в час.

Нормально значение

Собака 4,3-7,3 ммоль/л

Кошка 3,3-6,3 ммоль/л

Креатинин

Креатин синтезируется в печени, и после высвобождения поступает в мышечную ткань на 98%, где происходит его фосфорилирование. Образованный фосфокреатин играет важную роль в запасании мышечной энергии. Когда данная мышечная энергия необходима для осуществления метаболических процессов, фосфокреатин расщепляется до креатинина. Креатинин является стойким азотистым составляющим крови, не зависящим от большинства пищевых продуктов, нагрузок или других биологических констант, и связан с метаболизмом мышц.

Нарушения функции почек снижает экскрецию креатинина, обуславливая повышение уровня сывороточного креатинина. Таким образом, концентрации креатинина приблизительно характеризуют уровень клубочковой фильтрации. Главная ценность определения сывороточного креатинина - это диагностика почечной недостаточности.

Сывороточный креатинин является более специфичным и более чувствительным показателем функции почек, в отличие от мочевины.

Повышение:

— острая или хроническая почечная недостаточность.

Обусловлено преренальными причинами вызывающими снижение скорости клубочковой фильтрации (обезвоживание, сердечно-сосудистые заболевания, септический и травматический шок, гиповолемия и др.), ренальными связанными с тяжелыми заболеваниями паренхимы почек (пиелонефрит, лептоспироз, отравления, неоплазии, врожденные расстройства, травмы, ишемия) и постренальными — обструктивными расстройствами, препятствующими выделению креатинина с мочой (обструкция мочеиспускательного канала, мочеточника или разрыв мочевыводящих путей).

Понижение :

— возрастное снижение мышечной массы.

Нормальное значение

Собака 26-130 мкмоль/л

Кошка 70-165 мкмоль/л

Мочевина

Мочевина образуется в результате катаболизма аминокислот из аммиака. Аммиак, образующийся из аминокислот токсичен и превращается с помощью ферментов печени в нетоксичную мочевину. Основная часть мочевины поступающая после этого в кровеносную систему легко фильтруется и экскретируется почками. Мочевина может так же пассивно диффундировать в интерстициальную ткань почек и возвращаться в кровоток. Пассивная диффузия мочевины зависит от скорости фильтрации мочи – чем она выше (например, после внутривенного введения диуретиков), тем ниже уровень мочевины в крови.

Повышение:

— почечная недостаточность (может быть обусловлена преренальными, ренальными и постренальными расстройствами).

Понижение

— низкое поступление белка в организм,

— заболевания печени.

Нормальное значение

Собака 3.5-9.2 ммоль/л

Кошка 5.4-12.1 ммоль/л

Мочевая кислота

Мочевая кислота – конечный продукт катаболизма пуринов.

Мочевая кислота всасывается в кишечнике, циркулирует в крови в виде ионизированного урата и выделяется с мочой. У большинства млекопитающих элиминация осуществляется печенью. Гепатоциты с помощью уреазы окисляют мочевую кислоту с образованием водорастворимого аллантоина, который экскретируется почками. Снижение метаболизма мочевой кислоты в сочетании с ослаблением метаболизма аммиака при портосистемном шунтировании ведет к образованию кристаллов урата с возникновением уратных камней (уролитиаз).

При портосистемном шунтировании (ПСШ) мочевая кислота, образованная в результате метаболизма пурина, практические не проходит через печень, так как ПСШ представляют собой прямую сосудистую связь воротной вены с системной циркуляцией в обход печени.

Предрасположенность собак с ПСШ к уратному уролитиазу связана с сопутствующей гиперурикемией, гипераммониемией, гиперурикурией и гипераммониурией. Так как мочевая кислота при ПСШ не попадает в печень, она не полностью конвертируется в аллантоин, что приводит к патологическому повышению сывороточной концентрации мочевой кислоты. При этом мочевая кислота свободно фильтруется клубочками, реабсорбируется в проксимальных канальцах и секретируется в канальцевый просвет проксимальных нефронов. Таким образом, концентрация мочевой кислоты в моче частично определяется ее концентрацией в сыворотке.

Далматинские доги предрасположены к образованию уратных кристаллов вследствие особенного метаболического нарушения печени, приводящего к неполному окислению мочевой кислоты.

Повышение

— мочекислый диатез

— лейкоз, лимфома

— анемия, вызванная дефицитом витамина В12

— некоторые острые инфекции (пневмония, туберкулез)

— заболевания печени и желчных путей

— сахарный диабет

— дерматологические заболевания

— заболевания почек

— ацидоз

Понижение:

— диета, бедная нуклеиновыми кислотами

— применение диуретиков

Нормальное значение

Собака <60 мкмоль/л

Кошка <60 мкмоль/л

Липаза

Липаза поджелудочной железы – фермент, выделяющийся в большом количестве в двенадцатиперстную кишку с панкреатическим соком и катализирующий гидролиз триглицеридов до жирных кислот и моноглицеридов. Активность липазы отмечается так же в желудке, печени, жировой и др. тканях. Панкреатическая липаза действует на поверхности липидных капель, образуемых в кишечнике.

Повышение :

— прободение тонкого кишечника,

— хроническая почечная недостаточность,

— применение кортикостероидов,

— послеоперационный период

Понижение

— гемолиз.

Нормальное значение

Собака <500 ед/л

Кошка <200 ед/л

Холестерин

Определение уровня холестерина характеризует липидный статус и нарушение обмена веществ.

Холестерин (холестерол) - вторичный одноатомный спирт. Свободный холестерин является компонентом клеточных плазматических мембран. В сыворотке крови преобладают его эфиры. Холестерин является предшественником половых гормонов, кортикостероидов, желчных кислот и витамина D. Большая часть холестерина (до 80%) синтезируется в печени, а остальная часть поступает в организм с продуктами животного происхождения (жирное мясо, сливочное масло, яйца). Холестерин нерастворим в воде, транспорт его между тканями и органами происходит за счет образования липопротеидных комплексов.

С возрастом уровень холестерина в крови увеличивается, появляются половые различия в концентрации, что связано с действием половых гормонов. Эстрогены снижают, а андрогены повышают уровень общего холестерина.

Повышено:

— гиперлипопротеинемия

— обструкция желчных путей: холестаз, билиарный цирроз;

— нефроз;

— заболевания поджелудочной железы;

— гипотиреоз, сахарный диабет;

— ожирение.

Понижено:

— тяжелые гепатоцеллюлярные повреждения;

— гипертиреоз;

— миелопролиферативные заболевания;

— стеаторея с мальабсорбцией;

— голодание;

— хронические анемии (мегалобластная / сидеробластная);

— воспаления, инфекции.

Нормальное значение:

Собака – 3.8-7.0 ммоль/л

Кошка – 1.6-3.9 ммоль/л

Креатинфосфокиназа (КФК)

Креатинфосфокиназа – фермент цитоплазмы клеток скелетных мышц и миокарда, катализирующий обратимую реакцию превращения креатинфосфата в креатинин в присутствии АДФ, который при этом превращается в АТФ, являющийся источником энергии для мышечного сокращения.

Активная форма КФК представляет собой димер, состоящий из субъединиц М и В, соответственно существует 3 изофермента КФК: ВВ (содержится в головном мозге) , МВ (в миокарде), и ММ (в скелетных мышцах и миокарде). Степень увеличения зависит от характера повреждения и исходного уровня фермента в ткани. У кошек содержание КФК в тканях относительно меньше, чем у животных других видов, поэтому у них следует обращать внимание даже на незначительное превышение верхней границы стандартного интервала.

Часто у кошек страдающих анорексией уровень КФК может повышаться и снижается через несколько дней после соответствующего поддерживающего питания.

Повышение

— повреждение скелетных мышц (травмы, операции, мышечные дистрофии, полимиозиты и др.).

— после значительной физической нагрузки,

— эпилептические приступы

— инфаркт миокарда (через 2-3 часа после поражения, а через 14-30 часов достигает максимума, снижение уровня происходит на 2-3 сутки).

— нарушение обмена веществ (недостаточность фосфофруктокиназы у собак, гипотиреоз, гиперкортицизм, злокачественная гипертермия).

При повреждении мышечной ткани наряду с КФК будут также увеличены также ферменты как ЛДГ и АСТ.

Понижение:

— снижение мышечной массы

Нормальное значение

Собака 32-220 ед./л

Кошка 150-350 ед./л

Лактатдегидрогеназа ЛДГ

Цитозольный фермент, катализирующий обратимое превращение лактата в пируват с участием NADH в процессе гликолиза. При полноценном обеспечении кислородом лактат в крови не скапливается, а нейтрализуется и выводится. При дефиците кислорода, фермент имеет свойство накапливаться, вызывая мышечную усталость, нарушая тканевое дыхание. Высокая активность ЛДГ присуща многим тканям. Существовует 5 изоферментов ЛДГ: 1 и 2 представлены, главным образом, в сердечной мышце, в эритроцитах и почках, 4 и 5 – локализованы в печени и скелетных мышцах. ЛДГ 3 характерен для легочной ткани. В зависимости от того какая из пяти изоформ фермента находится в той или иной ткани, зависит способ окисления глюкозы – аэробный (до СО2 и Н2О) или анаэробный (до молочной кислоты).

Поскольку в тканях активность фермента высока, даже относительно небольшое тканевое повреждение или слабый гемолиз приводят к значительному повышению активности ЛДГ в циркулирующей крови. Из этого следует, что любые заболевания сопровождающиеся разрушением клеток, в которых содержатся изоферменты ЛДГ, сопровождаются повышением ее активности в сыворотке крови.

Повышение

— инфаркт миокарда,

— повреждение и дистрофия скелетных мышц,

— некротическое поражение почек и печени,

— холестатические заболеваниях печени,

— панкреатит,

— пневмония,

— гемолитические анемии и т.д.

Понижение

Клинического значения не имеет.

Нормальное значение

Собака 23-220 ед/л

Кошка 35-220 ед/л

Степень нарастания активности ЛДГ при инфаркте миокарда не коррелирует с размерами поражения сердечной мышцы и может служить для прогноза заболевания только ориентировочным фактором. В целом, являясь не специфическим лабораторным маркером, изменение уровня ЛДГ должно оцениваться только в сочетании со значениями других лабораторных показателей (КФК, АСТ и пр.), а так же данными инструментальных методов диагностики. Так же важно не забывать, что даже незначительный гемолиз сыворотки крови ведет к значительному повышению активности ЛДГ.

Холинэстераза ХЭ

Холинэстераза – фермент, относящийся к классу гидролаз, катализирующий расщепление эфиров холина (ацетилхолина и др.) с образованием холина и соответствующих кислот. Различают два типа фермента: истинную (ацетилхолинэстераза) – которая играет важную роль в передаче нервных импульсов (находится в нервной ткани и мышцах, эритроцитах), и ложную (псевдохолинэсераза) – сывороточная, присутствует в печени и поджелудочной железе, мышцах, сердце, головном мозге. ХЭ выполняет в организме защитную функцию, в частности не допускает инактивации ацетилхолинэстеразы, гидролизуя ингибитор данного фермента – бутирилхолин.

Ацетилхолинэсераза строго специфичный фермент, гидролизует ацетилхолин, который принимает участие в передаче сигналов через окончания нервных клеток и является одним из важнейших нейромедиаторов мозга. При снижении активности ХЭ, ацетилхолин накапливается, что приводит сначала к ускорению проведения нервных импульсов (возбуждение) и далее к блокированию передачи нервных импульсов (паралич). Это вызывает дезорганизацию всех процессов организма, а при тяжелых отравлениях может привести к летальному исходу.

Измерение уровня ХЭ в сыворотке крови может быть полезным при отравлении инсектицидами или различными токсичными соединениями ингибирующими фермент (фосфорорганические, фенотиазины, фториды, различные алкалоиды и др.)

Повышение

— диабет;

— рак молочной железы;

— нефроз;

— гипертония;

— ожирение;

Понижение

— поражения печени (цирроз, метастатическое поражение печени)

— мышечные дистрофии, дерматомиозиты

Нормальное значение

Собака 2200-6500 Е/л

Кошка 2000-4000 Е/л

Кальций. Ионизированный кальций.

В плазме крови кальций присутствует в трех формах:

1) в комплексе с органическими и неорганическими кислотами (очень незначительный процент),

2) в связанной с белками форме,

3) в ионизированном виде Са2+.

Общий кальций включает в себя общую концентрацию всех трех форм. Из общего кальция 50 % — это ионизированный кальций, а 50 % — связанный с альбумином. Физиологические сдвиги быстро изменяют связывание кальция. В биохимическом анализе крови измеряется как уровень общего кальция в сыворотке крови, так и отдельно концентрация ионизированного кальция. Ионизированный кальций определяют в тех случаях, когда необходимо определить содержание кальция вне зависимости от уровня альбумина.

Ионизированный кальций Са2+ — это биологически активная фракция. Даже незначительное повышение Са2+ в плазме может привести к смерти из-за паралича мышц и комы.

В клетках кальций служит внутриклеточным медиатором, воздействующим на разнообразные обменные процессы. Ионы кальция принимают участие в регуляции важнейших физиологических и биохимических процессов: нейромышечное возбуждение, свертывание крови, процессы секреции, подержания целостности мембран и транспорт через мембраны, многие ферментативные реакции, высвобождение гормонов и нейромедиаторов, внутриклеточное действие ряда гормонов, участвует в процессе минерализации костей. Обеспечивают, таким образом, функционирование сердечно-сосудистой и нервно-мышечной систем. Нормальное протекание этих процессов обеспечивается тем, что концентрация Са2+ в плазме крови поддерживается в очень узких пределах. Поэтому нарушение концентрации Са2+ в организме может служить причиной множества патологий. При снижении кальция самыми опасными последствиями являются атаксия и приступы судорог.

Изменение концентрации плазменных белков (в первую очередь альбумина, хотя глобулины тоже связывают кальций) сопровождаются соответствующими сдвигами уровня общего кальция в плазме крови. Связывание кальция с белками плазмы зависит от рН: ацидоз способствует переходу кальция в ионизированную форму, а алкалоз повышает связывание с белками, т.е. снижает концентрацию Са2+.

В гомеостазе кальция принимают участие три гормона: паратиреоидный (ПТГ), кальцитриол (витамин D), и кальцитонин – которые действуют на три органа: кости, почки, и кишечник. Все они работают по механизму обратной связи. На метаболизм кальция влияют эстрагены, кортикостероиды, гормон роста, глюкагон и Т4. ПТГ главный физиологический регулятор концентрации кальция в крови. Главным сигналом, влияющим на интенсивность секреции этих гормонов, служит изменение ионизированного Са в крови. Кальцитонин секретируется парафолликулярными с-клетками щитовидной железы в ответ на повышение концентрации Са2+ при этом он нарушает высвобождение Са2+ из лабильного депо кальция в костях. При падении Са2+ происходит обратный процесс. ПТГ секретируется клетками паращитовидных желез и при падении концентрации кальция секреция ПТГ повышается. ПТГ стимулирует высвобождение из костей кальция, реабсорбцию Са в почечных канальцах.

Повышение:

— гиперальбуминемия

— злокачественные опухоли

— первичный гиперпаратиреоз;

— гипокортицизм;

— остеолитические поражения костей (остомиелит, миелома);

— идиопатическая гиперкальциемия (кошки);

Понижение:

— гипоальбуминемия;

— алкалоз;

— первичный гипопаратиреоз;

— хроническая или острая почечная недостаточность;

— вторичный почечный гиперпаратиреоз;

— панкреатит;

— несбалансированная диета, дефицит витамина D;

— эклампсия или послеродовой парез;

— нарушения всасывания из кишечника;

— гиперкальцитонизм;

— гиперфосфатемия;

— гипомагнеимия;

— энтероколит;

— переливание крови;

— идиопатическая гипокальциемия;

— обширная травма мягких тканей;

Железо

Железо является важным компонентом гем-содержащих ферментов, входит в состав гемоглобина, цитохромов и других биологически важных соединений. Железо необходимый элемент для образования эритроцитов, участвет в переносе кислорода и тканевом дыхании. Так же участвует в ряде окислительно-востановительных реакция, работе иммунной системы, синтезе коллагена. Развивающиеся эритроидные клетки забирают от 70 до 95% железа, циркулирующего в плазме, а на долю гемоглобина приходится от 55 до 65 % общего содержания железа в эритроцитах. Абсорбция железа зависит от возраста и здоровья животного, состояния обмена железа в организме, а также количества желез и его химической формы. Под действием соляной кислоты желудка, окислы железа, попавшие с пищей, переходят в растворимую форму и связываются в желудке с муцином и различными небольшими молекулами, сохраняющими железо в растворимом состоянии, пригодном для абсорбции в щелочной среде тонкого кишечника. В обычных условиях лишь небольшой процент железа, поступающего с пищей, попадает в кровоток. Абсорбция железа повышается при его недостатке в организме, усилении эритропоэза или гипоксии и уменьшается при его высоком общем содержании в организме. Больше половины всего железа входит в состав гемоглобина.

Исследовать кровь на железо желательно натощак, поскольку имеются суточные колебания его уровня с максимальными значениями по утрам. Уровень железа в сыворотке зависит от ряда факторов: всасывание в кишечнике, накопление в печени, селезенке, костном мозге, разрушение и потеря гемоглобина, синтез нового гемоглобина.

Повышено:

— гемолитическая анемия,

— фолиево-дефицитная гиперохромная анемия,

— заболевания печени,

— введение кортикостероидов

— интоксикация свинцом

Понижено:

— авитаминоз В12;

— железодефицитная анемия;

— гипотиреоз;

— опухоли (лейкозы, миелома);

— инфекционные заболевания;

— кровопотери;

— хронические поражения печени (цирроз, гепатит);

— желудочно-кишечные заболевания.

Хлор

Хлор является основным анионом внеклеточных жидкостей, представлен в желудочном соке, секретах поджелудочной железы и кишечника, поте, спино-мозговой жидкости. Хлор является важным регулятором внеклеточного объема жидкости и осмолярности плазмы. Хлор поддерживает целостность клетки за счет своего влияния на осмотическое давление и кислотно-щелочной баланс. Кроме того, хлор способствует сохранению бикарбоната в дистальных отделах почечных канальцев.

Есть два типа метаболического алкалоза с гиперхлоремией:

хлор-чувствительный тип, который может корректироваться введением хлора, происходит с рвотой и назначением диуретиков, как результат потери ионов Н+ и Cl-;

хлор-резистентный тип, некорректируемый введением хлора, наблюдается у больных с первичным или вторичным гиперальдостеронизмом.

Повышено:

— обезвоживание,

— хроническая гипервентиляция с респираторным ацидозом,

— метаболический ацидоз с длительной диареей,

— гиперпаратиреоз,

— ацидоз почечных канальцев,

— черепно-мозговая травма с повреждением гипоталамуса,

— эклампсия.

Понижено:

— общая гипергидратация,

— неукротимая рвота или желудочная аспирация с алкалозом с гипохлоремией и гипокалиемией,

— гиперальдостеронизм,

— синдром Кушинга,

— АКТГ-продуцирующие опухоли,

— ожоги различной степени,

— застойная сердечная недостаточность,

— метаболический алкалоз,

— хроническая гиперкапния с респираторной недостаточностью,

Нормальное значение:

Собака – 96-122 ммоль/л

Кошка – 107-129 ммоль/л

Калий

Калий является основным электролитом (катионом) и компонентом внутриклеточной буферной системы. Почти 90% калия сосредоточено внутри клетки, и лишь небольшие количества присутствуют в костях и крови. Калий сосредотачивается, в основном, в скелетных мышцах, печени и миокарде. Из поврежденных клеток калий высвобождается в кровь. Весь калий, поступающий в организм с продуктами питания, всасывается в тонком кишечнике. В норме до 80% калия выводится с мочой, а остальное количество с калом. Не зависимо от количества поступающего калия из вне, он ежедневно выводится почками, в результате чего быстро наступает тяжелая гипокалиемия.

Калий является жизненно важным компонентом для нормального формирования мембранных электрических явлений, он играет важную роль в проведении нервных импульсов, мышечных сокращениях, кислотно-щелочном балансе, осмотическом давлении, анаболизме белка и гликогенообразовании. Вместе с кальцием и магнием, K+ регулирует сокращение сердца и сердечный выброс. Ионы калия и натрия имеют большое значение в регулировании почками кислотнощелочного равновесия.

Бикарбонат калия является основным внутриклеточным неорганическим буфером. При дефиците калия развивается внутриклеточный ацидоз, при котором дыхательные центры реагируют гипервентиляцией, что приводит к снижению рСО2.

Рост и снижение уровня калия в сыворотке крови вызваны нарушениями внутреннего и внешнего баланса калия. Фактором внешнего баланса, является: потребление калия с пищей, кислотно-щелочной баланс, функция минералокортикоидов. К факторам внутреннего баланса относят функцию гормонов надпочечников, которые стимулируют его экскрецию. Минералокортикоиды прямо влияют на секрецию калия в дистальных отделах канальцев, глюкокортикостероиды действуют непрямым способом, увеличивая скорость клубочковой фильтрации и мочевыделения, а также и повышая уровни натрия в дистальных отделах канальцев.

Повышено:

— массивные травмы мышц

— деструкция опухоли,

— гемолиз, ДВС-синдром,

— метаболический ацидоз,

— декомпенсированный сахарный диабет,

— почечная недостаточность,

— назначение противовоспалительных нестероидных препаратов,

— назначение K-сберегающих диуретиков,

Понижено:

— назначение некалийсберегающих диуретиков.

— диарея, рвота,

— прием слабительных,

— обильная потливость,

— сильные ожоги.

Гипокалиемия, связанная со снижением экскреции К+ с мочой, но без метаболического ацидоза или алкалоза:

— парентеральная терапия без дополнительного поступления калия,

— голодание, анорексия, мальабсорбция,

— быстрый рост клеточной массы при лечении анемии препаратами железа, витамина В12 или фолиевой кислоты.

Гипокалиемия, связанная с повышенной экскрецией К+ и метаболическим ацидозом:

— почечный канальцевый ацидоз (ПКА),

— диабетический кетоацидоз.

Гипокалиемия, связанная с повышенной экскрецией К+ и нормальным уровнем рН (обычно почечного происхождения):

— восстановление после обструктивной нефропатии,

— назначение пенициллинов, аминогликозидов, цисплатина, маннита,

— гипомагниемии,

— моноцитарный лейкоз

Нормальные значения:

Собака – 3,8-5,6 ммоль/л

Кошка – 3,6-5,5 ммоль/л

Натрий

В жидкостях организма натрий находится в ионизованном состоянии (Na+). Натрий присутствует во всех жидких средах организма, преимущественно во внеклеточном пространстве, где он является главным катионом, а калий является главным катионом внутриклеточного пространства. Преобладание натрия над другими катионами сохраняется и в других жидкостях организма, таких как желудочный сок, панкреатический сок, желчь, кишечный сок, пот, СМЖ. Относительно большое количество натрия находится в хрящах и немного меньше - в костях. Общее количество натрия в костях увеличивается с возрастом, а доля запасов снижается. Эта доля является важной с клинической точки зрения, поскольку она представляет резервуар при потере натрия и ацидозе.

Натрий является основным компонентом осмотического давления жидкости. Все перемещения натрия вызывают перемещение и определенных количеств воды. Объем внеклеточной жидкости напрямую зависит от общего количества натрия в организме. Концентрация натрия в плазме является идентичной концентрации в межклеточной жидкости.

Повышено:

— применения диуретиков,

— диарея (у молодых животных)

— синдром Кушинга,

Понижено:

Снижение объема внеклеточной жидкости наблюдается при:

— нефрит с потерями соли,

— дефицит глюкокортикоидов,

— осмотический диурез (диабет с глюкозурией, состояние после нарушения обструкции мочевыводящих путей),

— ацидоз почечных канальцев, метаболический алкалоз,

— кетонурия.

Умеренное повышение объема внеклеточной жидкости и нормальный уровень общего натрия наблюдается при:

— гипотиреоз,

— боль, стресс

— иногда в послеоперационном периоде

Повышение объема внеклеточной жидкости и повышение уровня общего натрия наблюдается при:

— застойная сердечная недостаточность (уровень натрия в сыворотке является прогностическим фактором смертности),

— нефротический синдром, почечная недостаточность,

— цирроз печени,

— кахексия,

— гипопротеинемия.

Нормальное значение:

Собака – 140-154 ммоль/л

Кошка – 144-158 ммоль/л

Фосфор

После кальция, фосфор является наиболее распространенным минеральным элементом в организме, присутствуя в любой ткани.

В клетке фосфор, в основном, принимает участие в метаболизме углеводов и жиров или связан с белками, и лишь небольшая часть находится в виде фосфат-иона. Фосфор входит в состав костей и зубов, является одним из составляющих нуклеиновых кислот, фосфолипидов клеточных мембран, также участвует в поддержании кислотно-щелочного баланса, в запасании и передаче энергии, в ферментативных процессах, стимулирует сокращение мышц и необходим для поддержания активности нейронов. Почки являются основными регуляторами гомеостаза фосфора.

Повышено:

— Остеопороз.

— Применение цитостатиков (цитолиз клеток и высвобождение фосфатов в кровь).

— Острая и хроническая почечная недостаточность.

— Распад костной ткани (при злокачественных опухолях)

— Гипопаратиреоз,

— Ацидоз

— Гипервитаминоз D.

— Портальный цирроз.

— Заживление переломов костей (образование костной «мозоли»).

Понижено:

— Остеомаляция.

— Синдром мальабсорбции.

— Выраженная диарея, рвота.

— Гиперпаратиреоз первичный и эктопический синтез гормонов злокачественными опухолями.

— Гиперинсулинемия (при лечении сахарного диабета).

— Беременность (физиологический дефицит фосфора).

— Дефицит соматотропного гормона (гормона роста).

Нормальное значение:

Собака – 1,1-2,0 ммоль/л

Кошка – 1,1-2,3 ммоль/л

Магний

Магний является элементом, который, хотя и находится в небольших количествах в организме, но имеет большое значение. Около 70% общего количества магния входит в состав костей, а остальная часть распределена в мягких тканях (особенно в скелетных мышцах) и в различных жидкостях. Приблизительно 1% находится в плазме, 25% связано с белками, а остальная часть остается в ионизованной форме. Большинство магния находится в митохондриях и ядре. Кроме своей пластической роли как составляющего компонента костей и мягких тканей, Mg выполняет множество функций. Вместе с ионами натрия, калия и кальция, магний регулирует нервно-мышечную возбудимость и механизм свертывания крови. Действия кальция и магния тесно связаны между собой, дефицит одного из двух элементов в значимой мере влияет на метаболизм другого (магний является необходимым как для кишечной абсорбции, так и для метаболизма кальция). В мышечной клетке магний действует как антагонист кальция.

Недостаток магния ведет к мобилизации кальция из костей, поэтому рекомендуется учитывать уровни кальция при оценке уровня магния. С клинической точки зрения, дефицит магния обуславливает нервномышечные заболевания (мышечная слабость, тремор, тетания и судороги), и может вызывать аритмии со стороны сердца.

Повышено:

— ятрогенные причины

— почечная недостаточность

— обезвоживание;

— диабетическая кома

— гипотиреоз;

Понижено:

— болезни органов пищеварения: мальабсорбция или чрезмерные потери жидкостей через ЖКТ;

— почечные заболевания: хронический гломерулонефрит, хронический пиелонефрит, ацидоз почечных канальцев, диуретическая фаза острого некроза канальцев,

— применение мочегонных средств, антибиотиков (аминогликозиды), сердечные гликозиды, цисплатин, циклоспорин;

— эндокринные расстройства: гипертиреоз, гиперпаратиреоз и другие причины гиперкальциемии, гиперпаратиреоз, сахарный диабет, гиперальдостеронизм,

— метаболические расстройства: чрезмерная лактация, последний триместр беременности, лечение инсулином диабетической комы;

— эклампсия,

— остеолитические опухоли костей,

— прогрессирующая болезнь костей Педжета,

— острый и хронический панкреатит,

— сильные ожоги,

— септические состояния,

— гипотермия.

Нормальное значение:

Собака – 0,8-1,4 ммоль/л

Кошка – 0,9-1,6 ммоль/л

Желчные кислоты

Определение общего содержания желчных кислот (ЖК) в циркулирующей крови является функциональным тестом печени в силу особого процесса рециклирования ЖК, называемого энтерогепатической циркуляцией. Основными компонентами, принимающими участие в рециркулировании желчных кислот, служат гепатобилиарная система, концевой отдел подвздошной кишки и система воротной вены.

Расстройства циркуляции в системе воротной вены у большинства животных связаны с портосистемным шунтированием. Портсистемный шунт – анастамоз между венами желудочно-кишечного тракта и каудальной полой веной, из – за которого кровь, оттекающая от кишечника, не проходит очищение в печени, а сразу поступает в организм. Вследствие этого в кровь попадают токсические для организма соединения, в первую очередь аммиак, вызывая тяжелые расстройства со стороны нервной системы.

У собак и кошек большая часть образовавшейся желчи до еды обычно сохраняется в желчном пузыре. Прием пищи стимулирует высвобождение из кишечной стенки холецистокинина, вызывающего сокращение желчного пузыря. Существует индивидуальная физиологическая вариабельность количества сохраняемой желчи и степени сокращения желчного пузыря во время стимуляции пищей и соотношение между этими величинами изменяется у некоторых больных животных.

Когда концентрация циркулирующих желчных кислот находится в пределах стандартного интервала или близка к нему, такие физиологические колебания могут привести к тому, что уровень желчных кислот после приема пищи становится сходным с их уровнем натощак или даже меньше его. У собак это может возникнуть и при чрезмерном размножении бактерий в тонком кишечнике.

Увеличение содержания желчных кислот в крови, вторичное по отношению к заболеванию печени или портосистемному шунтированию, сопровождается их повышенной экскрецией с мочой. У собак и кошек определение в моче соотношения желчные кислоты\креатинин является достаточно чувствительным тестом при диагностике заболеваний печени.

Исследование уровня желчных кислот важно проводить натощак и через 2 часа после еды.

Редко могут быть ложноотрицательные результаты являющиеся следствием тяжелой мальабсорбции в кишечнике.

Повышено:

— гепатобилиарные заболевания, при которых происходит нарушение секреции ЖК через желчевыводящие пути (обструкция кишечника и желчных протоков, холестаз, неоплазии и др.);

— расстройства кровообращения в системе воротной вены,

— портсистемный шунт (врожденный или приобретенный);

— терминальная стадия цирроза печени;

— микрососудистая дисплазия печени;

— нарушение способности гепатоцитов абсорбировать ЖК, характерное для многих заболеваниях печени.

Нормальное значение:

Собака 0-5 мкмоль/л

Для того, чтобы поставить правильный диагноз и понять, что же происходит со здоровьем наших маленьких пациентов, часто приходится брать биологический материал для выполнения различных . В этой статье мы попытаемся освятить вопрос, касающийся того, какие анализы в ветеринарии и для каких целей берутся чаще всего и как нужно к ним готовиться.

Анализы крови
Для взятия крови у кошек и собак наиболее часто используются подкожная вена предплечья и латеральная (малая) вена сафена на наружной стороне голени.
Самые частые исследования, для которых берется кровь – клинический и биохимические анализы.

Что мы можем узнать по общему анализу крови?
По количеству , а точнее при их снижении, можно судить о наличии вследствие заболевания внутренних органов или кровотечения. Увеличение этого показателя свидетельствует об или так называемого сгущения крови, когда относительное количество форменных элементов преобладает над жидкой частью крови - .
Способность крови транспортировать кислород оценивается по общему содержании гемоглобина в литре крови и в цветном показателе – содержании в одном эритроците.
свидетельствуют о защитных силах организма. Понижение этого показателя () говорит об истощении этих сил, а увеличение – на развитие воспалительного процесса.
Снижение количества предупреждает об опасности кровотечения, а повышение – о возможности .
Обязательным элементом общего анализа является скорость оседания эритроцитов – увеличение этого показателя указывает на развившуюся патологию.

Что мы узнаем по биохимии крови?
Биохимия крови позволяет исследовать широкий спектр ферментов, органических и минеральных веществ. Полученные анализы дают четкое представление о минеральном, белковом, углеводном и жировом обмене. В случае отклонения показателей от нормы лабораторным путем диагностируются различные патологии органов и систем организма – почек, печени, сердца, скелетных мышц, кровеносной системы, ЖКТ и др.

Биохимический анализ крови помогает получить более обширные результаты исследования в сравнении с общим анализом крови. На основании одного параметра нельзя делать выводы о состоянии организма в целом, но анализ всех изменений, взятых в совокупности, позволяет выявить определенное заболевание.

Обозначения:
«+» - рекомендуется;
«+/-» - допускается с ограничениями, суточный ритм следует учитывать при исследованиях в динамике и пограничных значениях результатов относительно референсных значений;
«-» - нежелательно.

Правила для подготовки к исследованиям
Существуют определенные предписания, которые желательно соблюдать при проведении биохимических, гормональных, гематологических и комплексных иммунологических тестов.
По возможности рекомендуется сдавать кровь утром натощак, в период с 8 до 11 часов (не менее 8 часов и не более 14 часов голода, вода - в обычном режиме, вволю), накануне сдачи анализа избегать пищевых перегрузок.
Если пациент принимает лекарственные препараты, следует проконсультироваться с на предмет целесообразности проведения исследования на фоне приёма медикаментов или возможности отмены приёма препарата перед исследованием. Продолжительность отмены определяется периодом выведения препарата из крови.
Для ряда тестов есть специальные правила подготовки пациента перед взятием анализа для исследования, о которых лучше узнать у лечащего врача.
При выполнении исследований на наличие инфекций необходимо принимать во внимание тот факт, что у пациента может быть отрицательный результат, который зависит от состояния иммунной системы и срока инфицирования. В данном случае рекомендуется взять повторные анализы спустя 2-3 дня.

Анализ мочи

Что мы можем узнать из общего анализа мочи?

По общему можно судить не только о состоянии почек и мочевыделительной системы, но и всего организма в целом. Ведь моча по сути своей – это отфильтрованная почками плазма крови. И обнаруженные изменения могут косвенно указывать на , печени, поражения мышц, септические состояния. Информативность одного этого исследования низкая – по одному анализу мочи нельзя поставить достоверный диагноз. Тем не менее, обнаруженные изменения служат основанием для более детальной диагностики не только мочевыделительной системы, но и всего организма в целом.

Чтобы правильно собрать мочу для анализа, нужно знать несколько правил:
1. Для общего анализа лучше собирать утреннюю мочу.
2. Моча собирается в чистую стерильную сухую посуду. Специальные контейнеры можно приобрести в любой медицинской аптеке.
3. Непосредственно перед самой процедурой нужно осуществить гигиенические мероприятия наружных половых органов. Для этих целей хорошо подходит спринцевание раствором Хлоргексидина 0, 05% или Мирамистина.
4. Доставка мочи в лабораторию должна быть совершена не позднее 4 часов с момента ее сбора.
5. Часто возникают проблемы со сбором мочи у кошек. Многие из них отказываются ходить в туалет, если в нем нет наполнителя. К счастью, в настоящее время появились очень удобные в использовании наборы для сбора мочи, заменяющие наполнитель.

Анализы кала

Кал – конечный продукт переработки пищи и при его исследовании можно получить данные о работе не только пищеварительной системы, но и других органов. Также важным методом исследования является на яйца глист и цисты простейших, что позволяет обнаружить различные их виды, диагностировать заболевание и назначить соответствующее лечение.
Правила подготовки к сдаче кала
1. Забор кала осуществляется путем самостоятельной дефекации, лучше в утренние часы.
2. Перед сбором кала лучше выдержать животное на диете, не рекомендуется прием жирной пищи, продуктов окрашивающих кал, а также некоторых медикаментов.
3. Кал, предназначенный для исследования, следует доставить в лабораторию не позднее 4 часов после сбора, особенно если планируется проведение анализа на цисты простейших.
4. За 3-4 дня до исследования необходимо отменить приём слабительных препаратов, касторового и вазелинового масла, прекратить введение ректальных свечей. Кал, полученный после клизмы, а также после приёма бария (при рентгеновском обследовании) для исследования не используется.

Исследование соскобов кожи

Путем обычного клинического осмотра вашего питомца не всегда можно понять, с какой мы столкнулись. Часто бывает, что очаги поражения покрываются толстыми корками, сильно расчесаны самим животным, а зачастую к исходной патологии присоединяется вторичная бактериальная или грибковая инфекция, а также раздражение или аллергическая реакция на применяемое лекарство, поэтому судить о причинах такого кожного заболевания становится проблематично. В таких случаях на помощь приходят ветеринарные анализы соскобов с кожи и кожная цитология. Взятие соскоба кожи может пролить свет на множество вопросов. Какова природы данного заболевания? Это аллергия? Лишай? Клещ? Но не следует забывать, что если результат соскоба отрицательный (ничего не выявлено), то можно предположить, что кожная проблема является проявлением какого-либо иного заболевания (аллергии, бактериальной инфекции, заболевания внутренних органов). Кожными проявлениями могут сопровождаться и различные системные заболевания, такие как сахарный диабет, болезни печени, почек, гормональные нарушения.
Частой причиной кожных поражений и расчесов является банальная блошиная инвазия, так что всего лишь тщательная может привести к исчезновению и корочек и зуда.
Подготовка к взятию соскоба: если вы в ближайшие дни планируете посещение ветеринарного специалиста по поводу дерматологических проблем, помните - очаги поражения нельзя ничем обрабатывать. Ничем! То есть ни смазывать, ни протирать, ни обмывать не только с мылом, но даже и просто водой. Поэтому когда у животного появляются новые кожные очаги поражения, их нужно сохранить до визита в ветеринарную клинику нетронутыми. Врачу необходимо увидеть проблему в ее естественном виде.

Обследование с помощью лампы Вуда

Данное исследование применяется в дерматологии. В его основе лежит явление свечения пораженных дерматофитией волос в спектре ультрафиолетовых лучей, которые имеют определенную длину волны. Несмотря на простоту в использовании, широкое распространение и применение, данное устройство позволяет лишь проводить вспомогательный вид исследования, но дает четкого представления об окончательном диагнозе.
Возможно получение ложных результатов, как положительных, так и отрицательных. Например, может наблюдаться свечение здоровых волос, вызванное обработкой определенными лекарственными препаратами при одновременном несвечении пораженных дерматофитией участков. Кроме того, как показывает практика, при исследовании выявляется всего лишь половина случаев микроспории (одна из разновидностей дерматофитии (лишая)), при этом тогда как при поражении трихофитией результат люминесцентной диагностики отрицателен, несмотря на то, что животное поражено лишаем.
Люминесцентная диагностика является абсолютно безопасным методом исследования.
Участки кожного покрова животных, пораженных грибами Трихофитон, Кандида, Малассезия, характерного свечения не дают, поэтому на основании люминесцентной диагностики отрицать микоз у животного нельзя.

Подготовка и проведение исследования

Перед проведением исследования желательно не обрабатывать место поражения какими-либо лекарственными средствами, так как некоторые из них могут влиять на результат люминесцентной диагностики.

Кровь. Кровь — это жидкостная тканевая система, состоящая из плазмы и форменных, или клеточных, элементов, которая циркулирует по сосудам, выполняя разнообразные функции: транспортную, дыхательную, регуляторную, гомеостатическую и защитную. Последняя выражается как в иммунном надзоре, так и в неспецифической защите - фагоцитозе, нейтрализации чужеродных агентов, выделении лизоцима, комплемента и других факторов. Кровь составляет у позвоночных животных от 5 до 9 % массы тела, причем на плазму приходится около 60 % объема крови, а на форменные элементы около 40 %.

Плазма крови. В плазме млекопитающих содержится 90…93 % воды и 7…10 % органических и минеральных соединений.

Плазма представляет собой коллоидную систему, в состав которой входят: солевые растворы, белки (альбумины, глобулины и фибриноген), жиры (фосфолипиды, холестерин), углеводы (глюкоза), аминокислоты и различные продукты обмена.

Форменные элементы крови. Их подразделяют на три группы: эритроциты (красные кровяные тельца у млекопитающих), лейкоциты (белые, или бесцветные, клетки) и тромбоциты (кровяные пластинки у млекопитающих)

Эритроциты. Это основной тип клеток крови: в 1 мкл крови их содержится в 1000 раз больше, чем лейкоцитов. Эритроциты - узкоспециализированные клетки; у млекопитающих животных они в процессе дифференцировки утратили ядро и приобрели вид двояковогнутого диска; у всех других позвоночных они овальной формы и содержат ядро с сильно конденсированным хроматином. Эритроциты животных разных видов существенно отличаются по размерам: диаметр эритроцита составляет, мкм: у лошади 5,7, у коровы 5,1, у свиньи 5,5, у овцы 4,3, у слона 9,4, у морской свинки 7,2, у кабарги 2,5. Размеры эритроцитов не зависят от массы тела животного: самые мелкие, как правило, обнаруживают у животных с более высоким уровнем тканевого метаболизма.

Снаружи эритроцит покрыт плазматической мембраной толщиной 20 нм, гликопротеиды которой определяют группу крови. Плазмолемма эритроцитов эластична и пластична, что необходимо при их движении по сети мелких кровеносных сосудов. Она легко проницаема для газов и анионов, обеспечивает активный перенос ионов натрия и глюкозы. Цитоплазма эритроцита на 34 % состоит из гемоглобина, в котором кроме белковых цепей (глобинов) присутствует простетическая (небелковая) группа - гем. Эта сложная гетероциклическая структура содержит атом двухвалентного железа и служит местом присоединения кислорода. Наличие гемоглобина в эритроцитах обусловливает оксифилию цитоплазмы последних при окраске азуром и эозином. При этом более вогнутая центральная часть клетки - (там, где было ядро), окрашивается слабее, чем периферическая. Площадь центральной части составляет около 30 % общей площади эритроцита. При анемиях и кахексиях наблюдают гипохромные эритроциты (за счет расширения бледно окрашенной центральной части). В цитоплазме зрелых эритроцитов даже при электронной микроскопии не удается обнаружить никаких органелл. Внутреннее содержимое клеток характеризуется высокой электронной плотностью. В некоторых эритроцитах при электронно-микроскопическом исследовании можно выявить компоненты белоксинтезирующей системы - рибосомы, отдельные митохондрии и элементы ЭПС. При специальном суправитальном окрашивании мазков крови бриллиантовым крезиловым синим, указанные компоненты выявляются в виде зернисто-сетчатых структур; такие клетки, называют ретикулоцитами, они являются предшественниками зрелых эритроцитов. Их количество может значительно увеличиваться при усиленном эритропоэзе.

У эритроцитов большинства млекопитающих форма двояковогнутого диска (и только у отряда мозоленогих эритроциты овальные), размеры могут колебаться в пределах 20 %. Форма эритроцитов обеспечивает максимальную площадь при минимальном объеме. Эритроциты меньшего диаметра носят названием микроцитов, большего - макроцитов, а среднего - нормоцитов. В количественном отношении все три типа соотносятся как 12,5 %, 12,5 % и 75%. Резкое различие эритроцитов по размерам - анизоцитоз - отмечают при функциональной недостаточности кроветворных органов. Появление в крови разнообразных по форме эритроцитов - пойкилоцитоз - наблюдают при септических заболеваниях и истинных анемиях. При анемиях и кахексиях снижается способность цитоплазмы эритроцитов воспринимать эозин, и в мазке крови обнаруживают олигохромные клетки.

Продолжительность жизни эритроцитов составляет дни: у свиньи 70, у крупного рогатого скота 50…60, а у овцы 140. Ежедневно в организме разрушаются миллионы эритроцитов. Их гибель компенсируется интенсивным кроветворением. Следует иметь в виду, что соотношение клеток различных генераций в периферической крови довольно постоянно, поэтому его нарушение между молодыми и стареющими формами имеет важное диагностическое значение. Основная функция эритроцитов - обеспечение клеток, тканей и органов кислородом. Кроме того, эритроциты могут адсорбировать на своей поверхности и транспортировать аминокислоты, некоторые лекарственные вещества и токсины. В плазматической мембране животных присутствует большое количество антигенных факторов (А, В, С и так далее), по которым определяют группу крови.

Лейкоциты. Количество лейкоцитов в крови может варьировать в зависимости от функционального состояния организма (увеличиваться во время пищеварения, при усиленной физической работе, беременности). Эти клетки принимают участие в защитных реакциях, в восстановительных и обменных процессах, о чем свидетельствуют обильные включения гликогена в цитоплазме (например, в лейкоцитах лошади и свиньи), а также присутствие многочисленных ферментов.

Морфологическая идентификация лейкоцитов основана на особенностях строения ядра, наличии зернистости в цитоплазме и тинкториальных свойствах последней. По этим признакам лейкоциты классифицируют следующим образом.

Гранулоциты или зернистые лейкоциты, имеют сегментированное ядро, и содержат в цитоплазме специфическую зернистость.

В зависимости от окраски гранул их подразделяют:
на базофильные - гранулы окашиваются основным красителем (азуром) в сине-фиолетовый цвет;
эозинофильные - гранулы окрашиваются кислым красителем (эозином) в розовый цвет;

нейтрофильные - содержат видимые только под электронным микроскопом гранулы двух видов, что придает цитоплазме слабо розовый цвет.

Агранулоциты или незернистые лейкоциты, не содержат в цитоплазме гранул и их ядра не сегментированы.

Среди агранулоцитов различают лимфоциты и моноциты

Количество лейкоцитов более или менее постоянно у каждого вида животных. Процентное соотношение различных форм лейкоцитов напевают лейкограммой. В зависимости от преобладания лимфоцитов или нейтрофилов различают лимфоцитарный профиль лейкограммы (например, у крупного рогатого скота) или нейтрофильный (например, у лошади) (табл.)

Лейкограмма крови некоторых домашних животных (%)

Вид животного

Примечание.

Б - базофильные гранулоциты;

Э - эозинофильные гранулоциты;

Н — нейтрофильные гранулоциты

(ю — юные, п — палочкоядерные, с — сегментоядерные)

Л -лимфоциты;

М - моноциты

Базофильные гранулоциты. Это относительно крупные, округлой формы клетки, размером 11…17 мкм, с хорошо выраженной зернистостью в цитоплазме и окрашивающимся диффузно полиморфным ядром. У лошади и свиньи форма ядра напоминает лист клевера, а у крупного рогатого скота - розетку с 5…7 сегментами. В цитоплазме базофилов встречаются гранулы двух типов - специфические (базофильные) и азурофильные. Последние весьма малочисленны и представляют собой лизосомы. Специфические гранулы окрашиваются азуром не в синий, а в красно-фиолетовый цвет, то есть с изменением цвета красителя. Гранулы нестойки и легко растворяются в воде. В их состав входит гепарин, препятствующий свертыванию крови, гистамин, расширяющий гемокапилляры и увеличивающий порозность их стенки, и серотонин, способствующий сокращению миофибрилл и сужению просвета капилляров. Кроме того, в гранулах содержится ЕСЕ-фактор, привлекающий эозинофилы, и протолитические ферменты - кислая фосфатаза и пероксидаза.

Базофилы в мазках крови встречаются редко.

Эозинофильные гранулоциты. Эти клетки крупнее базофилов в полтора-два раза. Ядро их состоит из 2…3 сегментов, гранулы цитоплазмы окрашиваются эозином в красноватый цвет, характерны эозинофилы у лошади и собаки: крупные пурпурные гранулы придают эозинофилу сходство с ягодой малины.

В гранулах содержатся гидролитические ферменты - оксидаза, пероксидаза, арилсульфатаза, а в кристаллоидах (специфические гранулы) - гистаминаза и основной белок (состоит на 50 % из аргинина), характеризующийся мощными антипротозойными, антигельминтными и антибактериальными свойствами. Количество эозинофилов в периферической крови максимально в ночные часы и минимально в утренние. Эти клетки, попав в периферическую кровь из красного костного мозга, пребывают в ней не более 3…8 ч, затем мигрируют в соединительную ткань (кишечника, легких, кожи и других органов), стимулируя фагоцитарную активность макрофагов. Их количество резко возрастает в крови при аллергических реакциях, а также некоторых инвазиях.

Кроме защитной, эозинофилы выполняют иммунорегуляторную функцию (особенно при аллергических реакциях), нейтрализуют антигены, гистамин и медиаторы воспаления.

Нейтрофильные гранулоциты. Это небольших размеров клетки, диаметром 12мкм, со слабооксифильной цитоплазмой. Их количество в лейкограмме составляет до 60 % у животных с нейтрофильным профилем и до 30 % — с лимфоцитарным профилем.

У нейтрофилов полиморфные ядра. Для зрелых клеток характерно сильно сегментированное ядро, состоящее из 2…5 сегментов (у свиньи чище 3, у коровы и лошади 4), связанных тонкими перемычками. V молодых незрелых клеток (их количество в лейкограмме незначительно, но возрастает существенно в острую фазу инфекционного процесса) ядро в форме подковы или палочки. В цитоплазме нейтрофилов кроме органелл общего значения постоянно встречаются включения гликогена и многочисленные азурофильные и специфические гранулы - видимые только при микроскопировании в иммерсионной системе или под электронным микроскопом.

Азурофильные гранулы (их количество составляет 10…20 %) представляют собой лизосомы, содержащие не более шести гидролитических ферментов, в том числе пероксидазу. В специфических гранулах (их количество достигает 90%) содержится щелочная фосфатаза, основной катионный белок и фагоцитины, обладающие антибактериальной активностью. У кроликов, многих птиц и представителей других классов вместо гранул встречаются оксифильные палочковидные включения, за что эти клетки получили название псевдоэозинофилов. Нейтрофилы играют важную роль в воспалительных реакциях, особенно в острой фазе. Они движутся по градиенту концентрации веществ, выделяемых бактериями (хемотаксис), фагоцитируют и переваривают последних. И. И. Мечников назвал эти клетки микрофагами.

Моноциты. Это самые крупные клетки лейкоцитарного ряда, диаметром до 20 мкм, с бобовидным, лопастным или округлым ядром, расположенным эксцентрично. Их бледно-голубая цитоплазма (слабобазофильная) содержит азурофильные гранулы, в состав которых входят гидролитические ферменты - пероксидаза, кислая фосфатаза и эстеразы. Клетки снабжены многочисленными микроскопическими выростами цитоплазмы (микровилли) и обладают амебоидной подвижностью. Моноциты находятся в периферической крови от 16 до 104 ч, затем мигрируют за пределы сосудистого русла, превращаясь в типичные макрофаги, снабженные отростками. В цитоплазме макрофагов обнаруживают множество лизосом, фагосом, вакуолей и липидные включения. Макрофаги несут на своих мембранах рецепторы иммуноглобулинов и комплемента и способны к селективному фагоцитозу. Они инактивируют антигены и стимулируют иммунокомпетентные лимфоидные клетки. Активированные макрофаги секретируют и выделяют в окружающую среду различные биологически активные вещества - интерлейкины (1 и 4), катионные белки, хемотаксические факторы для нейтрофилов, лизоцим, пирогены и другие. В очагах воспаления макрофаги утилизируют продукты распада погибших клеток и секретируют факторы, стимулирующие процессы регенерации ткани, активируют фибробласты к пролиферации и коллагенезу. Их количество в периферической крови возрастает при воспалительных процессах.

Лимфоциты. Среди агранулоцитов это самая многочисленная группа клеток. Лимфоциты сходны морфологически с моноцитами, их основные отличия от гранулоцитов - округлое ядро и отсутствие зернистости в цитоплазме. Количество лимфоцитов варьирует в зависимости от возраста и, особенно, от вида животного. У животных с нейтрофильным профилем лейкограммы (лошадь, свинья, собака) лимфоциты составляют 20…40 %, а у животных с лимфоцитарным профилем (крупный рогатый скот, овцы, грызуны) - 40…65%.

Из источника своего развития - красного костного мозга и лимфоидных органов лимфоциты попадают в кровь или лимфу, где пребыва ют не более 1 ч. После чего возвращаются (рециркулируют) в лимфоидные органы. Лимфоциты обеспечивают иммунитет - специфическую защиту организма от чужеродных и собственных измененных (утративших рецепторы гистосовместимости) белков - антигенов.

Лимфоциты называют главными иммунокомпетентными клетками иммунной системы. В зависимости от морфологии лимфоциты, встречающиеся в периферической крови, подразделяют на малые, средние и большие.

Малые лимфоциты по размерам сходны с эритроцитами; их округлое, богатое хроматином ядро, занимает до 90 % объема клетки. Окружает ядро незаметный серповидный ободок базофильной цитоплазмы. Малые лимфоциты при определенных условиях способны к бластотрансформации, то есть к превращению в бластные элементы, которые могут пролиферировать. Благодаря малым размерам и наличию микроворсинок клетки проходят через эндотелий капилляров и венозных сосудов.

Средние и большие лимфоциты значительно крупнее по размерам: их диаметр варьирует от 8 до 18 мкм. Для них характерно относительно светлое округлое или бобовидное ядро, окруженное широким ободком цитоплазмы. Они представляют собой популяцию дифференцирующихся клеток лимфоидного ряда: лимфобластов и иммунобластов.

По иммунным свойствам лимфоциты классифицируют на два, отличающихся функционально, типа:

Т-лимфоциты, отвечающие за клеточный иммунитет, и В-лимфоциты, обеспечивающие гуморальный иммунитет.

Т-лимфоциты - тимусзависимые - образуются в тимусе из клеток-прекурсоров, мигрирующих в вилочковую железу из костного мозга. Здесь под влиянием ретикулоэпителиальных клеток и гуморальных медиаторов они программируются в эффекторные и регуляторные тимоциты, которые мигрируют из тимуса во вторичные органы иммуногенеза - лимфоузлы, селезенку, лимфоидную ткань кишечника, пролиферируют и дифференцируются, по крайней мере, в три самостоятельных типа лимфоцитов: Т-хелперы, Т-супрессоры и Т-эффекторные клетки. Последние во вторичных органах под влиянием антигенной стимуляции обеспечивают накопление популяции сенсибилизированных лимфоцитов - Т-киллеров.

Т-лимфоциты обеспечивают иммунную реакцию клеточного типа, вырабатывают растворимые биологически активные вещества, гуморальным путем запускающие разнообразные воспалительные реакции. Коммитированность Т-лимфоцита (способность отвечать только на ограниченную группу сходных антигенов) выражается в наличии на его мембране рецепторов, специфических для детерминант определенного антигена.

В-лимфоциты - бурсозависимые - получили название от бурсы, или Фабрициевой сумки птиц, где они развиваются; образуются у млекопитающих из стволовых клеток-предшественников миелоидной ткани красного костного мозга.

В-лимфоциты участвуют в выработке особых защитных белков - иммуноглобулинов (IG), которые подразделяют на пять классов: IG О - нейтрализуют бактериальные токсины и защищают от вирусов; IGМ - активируют лизис чужеродных клеток и агглютинацию антигена, а также комплемент (особый белок, влияющий на связывание антигена иммуноглобулином); IGА - содержатся в слезной жидкости и слюне и обеспечивают защиту эпителия слизистых оболочек; IG Е - способствуют выделению гистамина в тучных клетках; IG В - встречаются только на поверхности эмбриональных лимфоцитов.

Предшественники В-клеток под влиянием еще неизвестных пока причин превращаются в красном костном мозге в костномозговые В-лимфоциты, несущие на своей поверхности IG М-рецепторы. Эти клетки мигрируют во вторичные органы иммуногенеза, где трансформируются в зрелые плазматические клетки, продуцирующие (иммуноглобулины) IG М, IGО и IGА. Молекулы иммуноглобулинов могут существовать как в виде секретируемых антител, так и быть прикрепленными к клеточной мембране В-лимфоцита (в последнем случае они служат его рецепторами).

Зрелые В-лимфоциты (плазмоциты) имеют на мембранах соответствующие иммуноглобулиновые рецепторы для антигена, а также иммуноглобулины класса О. При связывании иммуноглобулинов новых рецепторов с антигеном клетка активируется, что проявляется в усилении ее пролиферации и дифференцировке. Антителообразующие В-лимфоциты способны регулировать количество плазмоцитов, синтезирующих и секретирующих антитела всех пяти классов.

Кроме указанных двух главных типов в организме продуцируются лимфоциты, ответственные за неспецифические цитотоксические реакции - так называемые природные киллеры НК, способные убивать, и частности, опухолевые клетки.

К иммунокомпетентным клеткам относят также моноциты крови и другие клетки макрофагальной системы, ведущие свое происхождение от???моноцитов красного костного мозга.

Три популяции зрелых Т-лимфоцитов, три популяции зрелых В-пимфоцитов и макрофаги - это семь основных клеточных иммуно-компетентных партнеров, обеспечивающих всю гамму специфических (иммунных) реакций.

Проникший в организм антиген, фагоцируется и перерабатывается из корпускулярной формы в молекулярную. В этом виде он распознается Т-хелпером. Последний при помощи макрофага передаёт В-лимфоциту специфический сигнал, представляющий собой комплекс - рецептор Т-лимфоцита с антигеном и одновременно хелпер воздействует на В-лимфоцит неспецифическим фактором, стиимулирующим его пролиферацию. Эти два сигнала включают клетки в антителогенез. Роль

Т-супрессоров заключается в ингибиронании этого включения, то есть они тормозят развитие клона клеток-антителопродуцентов. Таким образом, в реализации иммунного ответа участвуют, по крайней мере, три клеточных системы: макрофаги, Т-лимфоциты и В-лимфоциты.

У активированных лимфоцитов есть еще один путь развития - долгоживущие клетки памяти, которые присутствуют в лимфоидных органах до 5 лет и более. При повторной стимуляции антигеном эти клетки активируются легче, чем исходные В-лимфоциты. Клетки памяти при участии Т-лимфоцитов обеспечивают быстрый синтез большого количества антител при повторном попадании антигена.

Кровяные пластинки и тромбоциты. Кровяные пластинки представляют собой мелкие (2…4 мкм) двояковыпуклые безъядерные цитоплазматические элементы, встречающиеся в крови млекопитающих; образуются в красном костном мозге из особых полиплоидных клеток - мегакариоцитов в результате фрагментации их уплощенных цитоплазматических отростков. Периферическая часть пластинки - гиаломер - слабо окрашивается; центральная - грануломер - содержит зернышки. В центре грануломера методом электронной микроскопии можно обнаружить единичные митохондрии, профили Гр и ГлЭПС, а также гранулы нескольких ионов, в которых содержится фибриноген, фибронектин, тромбоцитарный фактор роста (ТРФР), факторы свертывания крови, а также гистамин, серотонин и гидролитические ферменты. В гиаломере находятся только филаменты или микротрубочки, расположенные по периферии в виде кольца.

Тромбоциты - овальные ядросодержащие клетки низших позвоночных животных (рыбы, амфибии, рептилии, птицы) выполняют ту же функцию, что и кровяные пластинки у млекопитающих - обеспечивают свертывание крови: при повреждении стенки сосудов останавливают кровотечение путем аггрегации или слипания, образу тромбы. Активно участвуют в регенерации кровеносных сосудов эпителиев.

Пластинки циркулируют в крови до 10 дней, затем мигрируют в селезенку, где фагоцитируются макрофагами. Недостаток в крови пластинок - тромбоцитопения может быть обусловлена нарушением функции мегакариоцитов или очень быстрым удалением кровяных пластинок из крови; ее наблюдают при заболеваниях кишечника, глистных инвазиях, инфекционной анемии лошадей, лучевой болезни и лечении бензолом. Увеличение количества пластинок отмечают при пневмониях, саркоме.

Лимфа. Лимфа состоит из плазмы и форменных элементов, представленных в основном лимфоцитами, а также моноцитами. Плазма лимфы по химическому составу близка к плазме крови, но содержит меньше белков. Лимфа обогащается форменными элементами в лимфатических узлах и, поступая в крупные лимфатические сосуды, вливается в кровь. Таким образом, между кровью и лимфой существуют определенные взаимодействия.

Лимфа поддерживает гомеостаз в тканях и метаболическую регуляцию, а также участвует в транспорте электролитов, белков, воды и минеральных веществ.

Кроветворение. Гемоцитопоэз- процесс образования и развития зрелых клеток периферической крови. Различают эмбриональное кроветворение, которое возникает в эмбриональный период и приводит к развитию крови как ткани, и постэмбриональное, представляющее собой физиологическую регенерацию крови.

Эмбриональное кроветворение. В нем различают 3 периода.

Первый период (внезародышевый). Кроветворение начинается в мезенхиме стенки желточного мешка. В кровяных островках клетки дифференцируются на уплощенные эндотелиоциты и округлые кроветворные клетки, превращающиеся в стволовые, из которых формируются первичные эритроциты, названные за свои крупные размеры мегалобластами. Последние делятся внутри сосудистого русла (интраваскулярно). Часть из них у млекопитающих превращается в крупные безъядерные эритроциты - мегалоциты. Одновременно образуются и клетки меньшего размера - вторичные эритроциты. Экстраваскулярно дифференцируется и часть первичных лейкоцитов (гранулоцитов - нейтрофилов и эозинофилов). Из желточного мешка стволовые клетки крови расселяются в теле зародыша.

Второй период (гепато-тимо-лиенальный). Важнейшим центром кроветворения становится печень. Процесс кроветворения наблюдают по ходу капилляров, которые врастают вместе с мезенхимой в формирующиеся дольки органа. Источником кроветворения служат стволовые клетки, проникшие сюда из желточного мешка. Одновременно с эритроцитами развиваются гранулоциты и гигантские многоплоидные клетки - мегакариоциты. К концу внутриутробного периода кроветворение в печени прекращается.

Следующим универсальным органом кроветворения становится селезёнка, в которой вначале развиваются все клетки крови. К концу эмбриогенеза в селезенке наблюдают только лимфоцитопоэз.

В тимусе лимфоциты развиваются из стволовых клеток и заселяют соответствующие зоны вторичных органов лимфоцитопоэза.

Третий период (медулло-тимо-лимфоидный). Кроветворные процессы перемещаются в миелоидную гемопоэтическую ткань красного костного мозга и в лимфоидную ткань тимуса, селезенки и лимфатических узлов.

В красном костном мозге из стволовых клеток экстраваскулярно формируются все форменные элементы крови. Он становится центральным органом кроветворения: универсальный гемопоэз, начинаясь в эмбриональный период, продолжается и в постнатальный.

В красном костном мозге продуцируются также стволовые клетки для тимуса и других гемопоэтических органов.

Постэмбриональное кроветворение. В постнатальный период гемоцитопоэз совершается в специализированных гемопоэтических тканях - миелоидной и лимфоидной. В первой образуются эритроциты, все виды гранулоцитов, тромбоциты и моноциты, а также протекают ранние стадии формирования лимфоцитов, а во второй размножаются и дифференцируются Т- и В-лимфоциты и плазмоциты. Миелоидная и лимфоидная ткани создают особое микроокружение для развивающихся гемопоэтических элементов. Стромальные ретикулярные и гемопоэтические клетки функционируют как единое целое.

Среди гемопоэтических клеток миелоидной ткани особое место занимают стволовые клетки крови (СКК). Они являются полипотентными предшественниками всех клеток крови и клеток, относящихся к саморегулирующейся популяции. Морфологически стволовая клетка не идентифицирована, так как она сходна с малым лимфоцитом. СКК делятся митотически (полагают, что одна клетка способна совершить около 100 митозов, то есть обеспечить своими потомками всю кроветворную систему) и после цикла пролиферации переходят в состояние покоя. Эти клетки можно выявить методом колониеобразования: облученным смертельной дозой мышам-реципиентам вводят кровь или взвесь клеток из кроветворных органов здоровых мышей-доноров. В селезенке реципиентов каждая стволовая клетка образует колонию и называется уже колониеобразующей единицей (КОЕ). Клетки КОЕ дифференцируются в двух направлениях. Одна линия дает начало полипотентной стволовой клетке (ПСК), которая в дальнейшем будет являться унитарным предшественником для клеток крови всех видом эритроцитарного (КОЕ-Э), гранулоцитарного (КОЕ-ГН, КОЕ-Нейт, КОЭ-Эоз, КОЕ-Баз), моноцитарного (КОЕ-Мо) и мегакариоцитарного (КОЕ-МГКц) рядов гемопоэза. Вторая линия дает начало полипотентной стволовой клетке - предшественнице лимфоцитопоэза. Стволовые клетки, полипотентные стволовые и унипотентные стволовые клетки морфологически не различаются. Из каждой унипотентной клетки образуются незрелые клетки - бласты для данного вида клеток, которые можно морфологически идентифицировать.

Эрйтроцитопоэз. Схематично его можно представить: СКК- ПСК-КОЕ-Э-проэритробласт-эритробласт (базофильный, полихроматофильный, оксифильный) - ретикулоцит - эритроцит.

Проэритробласт - крупная клетка, содержит овальное ядро с пылевидным хроматином и четко выраженным ядрышком. Пролиферируют проэритробласты с интервалом 8…12 ч. В результате ряда делений образуются более мелкие клетки с интенсивно окрашивающимся округлым ядром и базофильной цитоплазмой - базофильные эритробласты. Базофилия цитоплазмы обусловлена накоплением в ней РНК. Базофильные эритробласты после ряда делений постепенно, по мере накопления гемоглобина, приобретают легкую оксифилию и превращаются в полихроматофильные эритробласты. Интенсивность пролиферация клеток снижается и вскоре (у млекопитающих животных) наблюдаются деструктивные процессы в ядре: оно пикнотизируется и удаляется из клетки. Органеллы редуцируются, и клетка превращается сначала ретикулоцит, а затем в зрелый эритроцит, поступающий в сосудистое русло.

Гранулоцитопоэз. Включает в себя следующие клеточные трансформации: СКК-ПСК-КОЕ-ГЭММ (колониеобразующая единица гранулоцитарного, эритроцитарного, моноцитарного и мегакариоцитарного рядов гемопоэза)-унипотентные предшественники I (КОЕ-Баз, КОЕ-Эо, КОЕ-ГН) - миелобласт - промиелоцит - миелоцит - метамиелоцит - палочкоядерный гранулоцит-сегментоядерный гранулоцит.

Миелобласты после ряда митотических делений дифференцируются в промиелоциты - клетки с крупным светлым овальным ядром, содержащим до нескольких ядрышек. В слегка базофильной цитоплазме клетки встречаются немногочисленные азурофильные (первичные) гранулы, представляющие собой типичные лизосомы. У промиелоцитов отсутствует специфическая зернистость и они способны к митотическому делению. Специфическая зернистость появляется в цитоплазме миелоцитов позже.

У нейтрофильных миелоцитов оксифильная цитоплазма, в которой наряду с первичными азурофильными гранулами встречаются и вторичные (специфические). Ядро клеток приобретает бобовидную форму, глыбки хроматина становятся грубыми, а ядрышки исчезают после многочисленных митотических делений миелоцитов. С этого момента клетки утрачивают способность к делению и превращаются в метамиелоциты, в цитоплазме которых резко увеличивается число вторичных гранул. При дальнейшем созревании клетки ее ядро приобретает вид изогнутой палочки. Эти клетки получили название палочкоядерных нейтрофильных гранулоцитов. Затем ядро сегментируется, и клетка превращается в зрелый сегментоядерный нейтрофильный гранулоцит.

Эозинофильные миелоциты на начальных стадиях содержат округлое ядро, которое с каждым митотическим делением приобретает все более бобовидную форму. В цитоплазме обнаруживают эозинофильную зернистость. По мере деления увеличивается количество специфических и неспецифических гранул, форма ядра становится палочковидной, клетки приобретают признаки эозинофильного метамиелоцита и утрачивают способность к делению, затем ядро сегментируется, и клетки превращаются в палочкоядерные и сегментоядерные лейкоциты с характерным двудольчатым ядром.

У базофильных миелоцитов округлое ядро с рыхло расположенным хроматином. В цитоплазме содержатся специфические базофильные зерна разных размеров. По мере созревания эти клетки превращаются сначала и базофильные метамиелоциты, а затем в зрелые базофильные лейкоциты.

Мегакариоцитопоэз (тромбоцитопоэз). Включает в себя следующие стадии: СКК-ПСК-КОЕ-МГЦ-мегакариобласт-промегакариоцит-мегакариоцит-тромбоцит.

Мегакариобласт - крупная клетка с лопастным ядром и базофильной цитоплазмой. При дальнейшем развитии на стадии промегакариоцита и мегакариоцита происходит полиплоидизация ядра и его сегментирование. Размеры клеток увеличиваются, а по ходу каналов ЭПС цитоплазмы отепляются небольшие фрагменты, которые у млекопитающих животных получили название кровяных пластинок.

Моноцитопоэз. Схема моноцитопоэза выглядит следующим образом: СК-ПСК-унипотентный предшественник моноцита СОЕ-М-монобласт -промоноцит - моноцит - тканевой макрофаг.

Лимфоцитопоэз. Состоит из следующих этапов: СК-ПСК - шпотентный предшественник лимфоцита - лимфобласт- пролимфоцит - лимфоцит. Особенность процесса заключается его обратимости, то есть лимфоциты способны дедифференцироваться в бластные формы.

Процесс дифференцировки Т-лимфоцитов в периферических органах приводит к образованию регуляторных и эффекторных клеток, а В-лимфоцитов - к превращению в плазмоциты и в клетки памяти. Развитие Т-лимфоцитов в тимусе регулируется с помощью их контактного взаимодействия с эпителиальными клетками стромы органа, а также ряда выделяемых эпителиоцитами специфических тимусных факторов - (тимозина, тимопоэтина, интерлейкинов: ИЛ-1, ИЛ-6) и других.